葡萄球菌院内感染的耐药性分析

葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，是引起人类感染的最常见致病菌。近几年由于临床广泛使用抗生素，导致细菌耐药菌株不断增多，引起宿主体内菌群生态平衡失调，所以抗生素的耐药性也日益受到重视。本文从临床送检的标本中分离出100株葡萄球菌，并做了7种抗生素药物敏感试验。 1 材料与方法 100株葡萄球菌均为我院临床各科送检标本中分离获得，并经细菌生化鉴定证实；培养基选用M-H琼脂培养基，按常规配制；抗生素纸片由上海医化所提供；药敏试验：采用K-B纸片扩散法。用金黄色葡萄球菌ATCC25923作药敏试验质控，结果判断，按NCCLS标准。 …     

苯唑西林和万古霉素对金葡菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度的关系

目的分析苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的纸片扩散法抑菌圈直径和E-test法最低抑菌浓度间的关系。方法用纸片扩散法检测苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径,用E-test法检测最低抑菌浓度(M IC)。结果纸片扩散法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性,敏感率分别为85.0%和86.5%,中介率分别为2.3%和3.0%,耐药率分别是12.7%和10.5%,个别经K irby-Bauer法判定的中介株或耐药株经E-test法M IC证实为敏感或中介株;所有的菌株都对万古霉素的敏感,其中抑菌圈直径≥15 mm的菌株占91.7%。结论用K irby-Bauer法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素和苯唑西林的敏感性,其药敏结果基本一致,但纸片扩散法结果处折点值附近或万古霉素对菌株的抑菌圈低于超出敏感值下限时,应测量相应抗生素的最低抑菌浓度。     

沙葱多糖的体外抑菌试验研究

采用琼脂扩散法比较了沙葱多糖(SCSP)、沙葱鲜汁及黄芪多糖(HQSP)在体外对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、普通变形杆菌的抑菌作用.结果表明20 mg/mL和40 mg/mL的SCSP对以上6种细菌均有一定的抑制作用,但两者之间的作用效果无显著性差异(P>0.05),SCSP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较为明显,最大抑菌圈直径分别为13.3 mm、9.9 mm;HQSP对以上6种细菌均无任何抑制作用;沙葱鲜汁的抑菌效果最为显著,对6种细菌均有较强的抑制作用,抑菌圈直径均≥8 mm,尤其对肠道细菌痢疾志贺氏菌的抑菌效果更为显著,最大抑菌圈直径为21.2 mm.     

藏药大籽蒿提取物体外抗菌活性研究

目的:研究藏药大籽蒿全草和花蕾提取物的体外抗菌活性.方法:以试管稀释法测定提取物对大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和铜绿假单胞菌(ATCC27853)标准菌株的最小抑菌浓度(MIC),同时测定最小杀菌浓度(MBC).结果:藏药大籽蒿水、乙醇提取物在体外对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用,并有一定的杀菌作用;乙醇的热提取物对铜绿假单胞菌也具有明显的抑菌和杀菌活性.结论:藏药大籽蒿对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株具有一定抗菌作用,其抗菌活性部位为水提取物和乙醇提取物;同一溶剂的大籽蒿全草与花蕾提取物具有相同的抗菌活性.     

香菇提取液的抑菌作用研究

本实验采用超声提取法制备香菇提取液,以超声时间、时间间隔为参变量,通过抑菌圈试验测定抑菌圈直径并比较其对抑菌效果的影响。结果表明,超声提取时超声时间为40s,间隔20s时,该提取液的抑菌效果最佳;其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、黑曲霉的最低抑菌圈直径分别为1.07cm、1.33cm、1.20cm、1.00cm。     

藏药大籽蒿提取物体外抗菌活性研究

目的:研究藏药大籽蒿全草和花蕾提取物的体外抗菌活性。方法:以试管稀释法测定提取物对大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和铜绿假单胞菌(ATCC27853)标准菌株的最小抑菌浓度(MIC),同时测定最小杀菌浓度(MBC)。结果:藏药大籽蒿水、乙醇提取物在体外对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用,并有一定的杀菌作用;乙醇的热提取物对铜绿假单胞菌也具有明显的抑菌和杀菌活性。结论:藏药大籽蒿对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株具有一定抗菌作用,其抗菌活性部位为水提取物和乙醇提取物;同一溶剂的大籽蒿全草与花蕾提取物具有相同的抗菌活性。     

大蒜和生姜提取物体外联合抑菌效果的研究

目的:探讨大蒜和生姜提取物体外联合抑菌效果。方法:以酶解法提取大蒜提取物,用K-B法分别检测大蒜和生姜提取物的体外抑菌效果,用宏量稀释法检测其最低抑菌浓度,以微量稀释法检测大蒜和生姜提取物联合抑菌效果。结果:大蒜提取物对实验菌株的抑菌圈直径均大于生姜提取物,差异具有统计学意义;大蒜提取物对标准株ATCC 25923、ATCC 90029和临床分离株1420的MIC均小于生姜提取物;大蒜与生姜提取物联合使用时,对标准株ATCC25923的抑菌作用是无关作用,对临床分离耐药株1420的抑菌作用表现为协同作用,对ATCC 90029的抑菌作用为相加作用。结论:大蒜和生姜提取物对实验中的革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌均有抑菌作用,其中大蒜提取物的抑菌效果显著强于生姜提取物。大蒜与生姜提取物联合使用时,可增强对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌1420和白色念珠菌标准株ATCC 90029的抑菌效果,减少药物用量。     

520株金黄色葡萄球菌的耐药性变迁与分析

采用K—B法进行药敏实验并用琼脂扩散法对苯唑西林耐药的菌株做耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)测定,对2000-2004年韶关市铁路医院临床检出的520株金黄色葡萄球菌进行耐药性变迁情况的分析.结果表明:测定菌株对β-内酰胺类和氟喹诺酮类抗菌药的耐药性总体上呈逐年上升趋势,对氨基糖苷类则有下降趋势,对苯唑西林耐药率逐年增高,出现耐万古霉素的菌株,提示临床医生在治疗金黄色葡萄球菌引起的感染中,应根据不同感染情况参考耐药性监测选用适宜的抗菌药.     

嗜酸乳杆菌生长状况及抑菌特性的研究

用MRS培养基培养嗜酸乳杆菌,测定其生长曲线,并以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌株,利用杯碟法检测嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果发现在37℃的恒温箱中培养24h后,通过测量抑菌圈大小,可得知嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有明显的抑菌作用。     

负载黄酮类药物细菌纤维素的抑菌效果的研究

为了探究负载黄酮类药物细菌纤维素的抑菌效果,实验采用平板划线法与涂布平板法,分离提纯得到大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的单菌落进行培养;抑菌实验方法为抑菌圈法,用负载黄酮类似物的细菌纤维素膜放置在涂布好实验细菌的培养基中培养得抑菌圈。研究表明:负载黄酮类药物(槲皮素、桑色素及黄芩素)细菌纤维素膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有良好的抑菌效果。     

黄芩提取物对金黄色葡萄球菌体内外抑菌作用的实验研究

研究黄芩醇提物和水提物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,及体内抗感染保护作用的实验研究。采用体外牛津杯药敏法;小鼠体内抗感染的保护作用法。黄芩醇提取物在体外牛津杯药敏法中按药物作用量150μg/μL、200μg/μL、250μg/μL、300μg/μL抑菌圈直径分别为17 mm、18 mm、18 mm、18 mm,黄芩水提取物抑菌圈直径为8 mm、8 mm、11 mm、13 mm。在体内实验中腹腔注射金黄色葡萄球菌0.5 mL细菌数为1×109,黄芩醇提取物的小鼠存活率为10%,黄芩水提取物的小鼠存活率为40%。黄芩醇提取物在体外对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。而黄芩水提取物在体外抑菌实验结果中对金黄色葡萄球菌无明显抑菌作用。在体内的抗感染保护作用中黄芩水提取物的保护作用优于黄芩醇提取物。     

牦牛乳中乳链菌肽产生菌的定向筛选及抗菌活性研究

以新鲜牦牛乳为原料,采用选择培养基及抑菌圈法定向筛选、富集微生物,通过生理生化指标检测及16S rDNA鉴定乳链菌肽产生菌,并采用滤纸片扩散法检测其抗菌活性.结果表明,共筛选出4株乳链菌肽产生菌,4株菌均符合乳酸乳球菌生理生化特征,且其16S rDNA与乳酸乳球菌的测序结果完全一致,确认为乳酸乳球菌;这4株菌只对G~+菌产生抑菌圈,对G~-菌没有抑菌活性,其中菌株Lac4对藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌都体现出强抑制作用,菌株Lac1对藤黄微球菌有强抑制作用,对金黄色葡萄球菌是弱抑制作用,而菌株Lac2和Lac3对藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌都是弱抑制作用.     

Nuc和mecA基因在金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性检测中的初步应用

目的为获得金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药信息,评估通过PCR扩增nuc基因、mecA基因检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。方法收集获得63株临床分离鉴定的金黄色葡萄球菌,采用传统药敏检测方法进行菌株药敏测试;再用PCR方法检测菌株是否携带nuc基因和mecA基因,以传统药敏检测结果为参照,评估用PCR扩增技术检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。结果 1.样本菌株中有24株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphyococcus aureus,MRSA),39株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive Staphyococcus aureus,MSSA)。来自重症医学科的分离株中MRSA数量较多。2.样本菌株nuc基因携带率为85.7%,其中nuc基因在MRSA菌株中的携带率为87.50%,在MSSA菌株中携带率为84.62%;3.样本菌株mecA基因的携带率为19.05%,其中MRSA菌株的mecA基因携带率为50.0%,MSSA中均不携带mecA基因。来自重症医学科的MRSA中同时携带mecA基因和nuc基因的比例为77.78%。结论用PCR技术检测nuc基因、mecA基因来快速鉴定金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性可能存在一定比例的误诊结果。     

烧伤科病原菌分布及抗生素敏感模式分析——以江南大学附属医院为例

收集2020年1-12月江南大学附属医院烧伤科分离细菌标本,分析其中的致病菌种类及抗生素耐药情况,为抗生素选择提供依据。采用质谱仪和全自动细菌药敏仪鉴定细菌并进行药敏试验。共分离738株病原菌,其中革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌163株(占比75.5%),主要来自创口分泌物或脓液标本;革兰阴性菌中铜绿假单胞菌284株(占比57.4%),主要来自血液标本。金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为56.9%,但未发现耐万古霉素的MRSA菌株。鲍曼不动杆菌对碳青酶烯类抗生素耐药率高达71.4%。该院烧伤科分离病原菌耐药严重,应加强药敏监测。     

南、北五味子抑菌活性差异比较研究

用牛津杯法和平板二倍稀释法检测了2种五味子水提取物对8种细菌和1种真菌的抑菌活性差异.结果表明2种五味子提取物对8种供试细菌大肠杆菌ATCC25922和ATCC35218、普通变形杆菌CMCC49027、沙门氏菌CMCC50094、铜绿假单胞菌ATCC27853、枯草芽孢杆菌CMCC63501、粪肠球菌CMCC32219和金黄色葡萄球菌ATCC25923都有明显的抑制作用,对真菌白色念珠菌ATCC10231不具有抑制作用,对同一种供试细菌北五味子的抑菌圈直径显著大于南五味子,最小抑菌浓度比南五味子至少高1个稀释倍数.     

华东师范大学在校生皮肤上葡萄球菌类型及其抗药性分析

实验采集了华东师范大学在校学生皮肤表面的细菌样品,通过Baird Parker培养基选择性分离葡萄球菌属菌株.对分离到的菌株进行染色体DNA的提取,并扩增16S rRNA基因;通过16S rRNA基因序列分析菌株类型及菌株之间的系统发育关系;最后利用纸片琼脂扩散法(K-B法)检测葡萄球菌菌株对10种常见的抗生素敏感性并进行分析.结果分离得到了共31株葡萄球菌菌株,然后对各菌株的16S rRNA基因序列进行系统发育关系分析,将其分为6个不同的葡萄球菌种.通过对抗生素敏感性分析显示,31株菌中对10种抗生素检测没有完全敏感的菌株,其中氨苄青霉素、阿莫西林和恩诺沙星3种抗生素抗菌效果都比较低,抗性率分别为91％,91％和72％;阿米卡星的抗葡萄球菌效果最好,在31株菌株中只有3株菌株对阿米卡星具有抗性.上述结果显示,不管是维族人群还是汉族人群,皮肤表面都存在大量葡萄球菌,而维族人群中存在的数量高于汉族人群,但在菌株类型上并没有显著差异.存在于健康人体表面的葡萄球菌对常见10种抗生素具有较高的抗性,阿米卡星对葡萄球菌的敏感性最好.     

黄连、甘草制黄连乙醇粗提物体外抗菌活性比较

为比较黄连、甘草制黄连的乙醇粗提物的体外抗菌活性,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌和白色念珠菌作为受试菌株,采用滤纸片法测抑菌圈大小,二倍稀释法检测最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果表明,黄连、甘草制黄连的乙醇粗提物对五种菌均具有抑菌作用,并在一定质量浓度范围中具有杀菌作用.甘草制黄连乙醇粗提物对金黄色葡萄球菌、白葡萄球菌的抗菌活性略强于黄连乙醇粗提物.     

苯甲酸、富马酸及其复合酸对常见致病菌体外抑菌效果的研究

旨在探讨苯甲酸、富马酸及其两种酸组合的复合酸对常见致病菌的体外抑菌效果.选取致病性大肠杆菌(ATCC83912)、沙门菌(ATCC21512)、金黄色葡萄球菌(ATCC65213)三种常见的致病菌为指示菌,苯甲酸、富马酸和复合酸(苯甲酸与富马酸按1:1的比例复合)浓度设置0. 25、0. 50、0. 75、1. 00 g/m L四个水平,以无菌水为空白对照.采用牛津杯法测定不同有机酸制剂的抑菌圈直径(mm),以此评价三种不同有机酸制剂体外抑菌活性.结果表明,有机酸对三种致病性菌具有明显的体外抑菌活性.其中,复合酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著优于富马酸和苯甲酸(P 0. 05),而对于沙门菌,苯甲酸和复合酸的抑菌效果要显著优于富马酸(P 0. 05);随着有机酸浓度的升高,抑菌效果显著增强(P 0. 05);不同有机酸制剂和浓度二因素对沙门菌和金黄色葡萄球菌存在显著的互作影响(P 0. 05).综上所述:在0. 25～0. 75 g/m L浓度下,复合酸对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性更优于苯甲酸、富马酸单一使用时的效果.     

一种水产弧菌快速药敏检测方法的建立

【目的】实现弧菌药物敏感性的现场快速检测。【方法】以副溶血性弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌3种弧菌为试验菌株,在Mueller-Hinton(MH)培养基基础上通过添加鱼肉蛋白胨及调节无机盐离子浓度,优选弧菌的增菌液。同时利用阿尔玛蓝作为颜色指示剂,选择11种水产常见药物并设置8个倍比稀释的浓度梯度,结合运用海藻糖作为包被保护剂,制备弧菌快速药敏检测微孔板,板内设有药敏检测区、生长对照区及质控区。【结果】利用药敏微孔板法及传统的试管稀释法分别对副溶血性弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌进行药敏检测,结果显示微孔板法测定的所有药物对3种弧菌的MIC值与试管稀释法完全吻合。【结论】本研究建立的药敏微孔板法能够实现对3种弧菌药敏特性的快速、简便、准确检测,研究结果将为水产病原微生物的现场快速选药技术提供重要参考。     

具抑菌活性的乳酸菌的筛选

采用筛选培养基从泡菜中筛选乳酸菌株,并对其进行生化鉴定．以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌为指示菌,采用抑菌圈法测定所筛菌株的抑菌活性．生化鉴定结果显示,筛选的3株乳酸菌分别为嗜热链球菌、植物乳杆菌及鼠李唐乳杆菌,但仅植物乳杆菌对金黄色葡萄球菌有抑菌作用,抑菌效果为发酵液〉上清液〉菌悬液．成功获得了1株对金黄色葡萄球菌有抑菌作用的植物乳杆菌,该植物乳杆菌中起抑菌作用的主要是发酵液中的胞外代谢产物．