MTT比色法在检测重组人GM—CSF生物活性中的应用

探索了ＭＴＴ比色法的一系列实验条件，并利用ＧＭ－ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ－１，测定了家蚕基因工程生产的重组人ＧＭ－ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ）的生物活性，并与半固体培养集落刺激法进行了比较。     

ELISA方法检测人外周血中的IL-18

建立了一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的酶联夹心ELISA方法,可定量检测人外周血中的白细胞介素18(hIL-18)。将体外重组表达的hIL-18蛋白作为抗原免疫新西兰家兔,纯化兔血清中的抗体IgG,用辣根过氧化物酶(HRP)标记,检测正常人血清样本中的hIL-18。此方法灵敏度高,可重复性良好,且结果数据化。适合于IL-18的临床定量检测,为进一步开展研究提供了有力的工具。     

CCK-8法和MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的最佳条件比较研究

以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4h,适宜细胞数量范围为8×10^2-1×10^5个。在检测抗肿瘤药物阿霉素（ADM）对PC3细胞的增殖影响实验中,发现CCK-8法测得数据的线性相关性优于MTT法,并且数据偏差较MTT法小。实验结果表明CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。     

兔抗人M-CSF特异性抗体在夹心ELISA方法检测人M-CSF中的应用

用人尿来源经纯化的 M-CSF 免疫家兔制备抗 M-CSF 物异性抗体.经 ELISA试验证明该抗体可对天然和重组人 M-CSF 进行特异性识别,与人的 GM-CSF 和 IL-3无交叉反应,并且该抗体可中和天然人 M-CSF 集落刺激活性。用该抗体与人 M-CSF 标准品进行夹心 ELISA 实验,结果证明夹心 ELISA 方法测定的标准品 M-CSF 含量与实际相一致,并且与软琼脂骨髓细胞集落形成试验检测到的活性结果相平行。     

MTT法检测鸡外周血淋巴细胞增殖性反应的最佳条件探讨

对鸡外周血淋巴细胞增殖反应MTT比色法的四个主要因素,即培养时间、ConA浓度、细胞浓度及培养液小牛血清等应用L_16(4~5)四因素四水平正交试验设计,对最佳反应条件进行了研究．结果表明、影响增殖反应的主次顺序为ConA、细胞浓度、培养时间及血清浓度;最佳反应条件为:15μg/ml的ConA、1×10~7/ml细胞、10%小牛血清及48小时的培养时间.     

MTT法检测Rh—bFGF提高Balb／c 3T3细胞酶活性及？…

以Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞为勒细胞，采用体外细胞培养方法，观察重组人碱性成纤维细胞生长因子的促分裂和提高酶活性作用。结果发现：重组人碱性成纤维细胞生长因子提高Ｂａｌｂ／ｃ ３Ｔ３细胞酶活性的最佳作用浓度为６．２５ｎｇ／ｍＬ，而促分裂增殖的最佳作用浓度为１００ｎｇ／ｍＬ，两者分别与应的对照组比较Ｐ〈０．０１，具有统计学意义。从而证实了重组人碱性成纤维细胞生长因子具有促分裂和增强酶活性的作用。     

ELISA方法检测尿液sIgA的方法学评价

目的 为尿液sIgA测定提供ELISA方法。方法 采用ELISA方法测定尿sIgA，并进行方法学评价。结果 ELISA方法测定尿液sIgA准确性高、特异性强。敏感性达到RIA水平。结论 ELISA方法测定尿液sIgA具有临床实用价值。     

基因重组人粒细胞或（和）巨噬细胞集落刺激因…

目的：为探索血液系恶性疾患化疗后粒细胞减少患低谷期应用基因重组人粒细胞或（和）巨噬细胞休落刺激因子「ｒｈＧ（Ｍ）－ＣＳＦ」的疗效。方法：对３２例生白血病和恶性淋巴瘤秋主的血液系恶性肿瘤４１例次化疗后粒细胞减少（或缺乏）的低谷期应用ｒｈＧ（Ｍ）＿ＣＳＦ治疗。８０％的病例剂量〈２００μｇ（ｍ＾２．ｄ）。观察用药后争性白血化疗后或低谷值至中性粒细胞绝对值（ＡＮＣ）≥０．５×１０＾９／Ｌ的天数，并以同期     

用ELISA方法检测鸡蛋氟喹诺酮类药物残留的研究

针对鸡蛋中喹诺酮类药物的残留．采用间接竞争ELISA方法建立了检测手段．样品经提取净化后,以氟喹诺酮类药物多残留试剂盒为基础,建立了鸡蛋中喹诺酮类药物残留的检测方法．结果显示,在5～50μg／kg浓度范围内的平均添加回收率在70％以上,批内变异系数在10％以内,批间变异系数在15％以内．检测限为5μg／kg,低于国家规定的喹诺酮类药物在鸡蛋中的残留限,建立了一种快速的对鸡蛋中喹诺酮类药物残留的检测方法,能满足目前基层初筛工作的实际需要．     

重组碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测方法的建立

小鼠或家克经重组bFGF免疫后产生高滴度的抗血清,用此血清建立了间接ELISA检测方法,检测bFGF的灵敏度达10ng/ml.     

MTT比色分析法在贴壁生长细胞药物敏感性测定中的应用

用ＭＴＴ法测定了几种小檗胺类化合物对三种贴壁生长细胞生长增殖的影响。结果显示：ＭＴＴ分析法比传统的活细胞计数法，单细胞克隆尖及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定样品，省时，省试剂，精确度高，重复性好及没有同位素污染等优点，是肿瘤药物研究中较理想的检测方法。     

改良MTT比色法测定淋巴细胞增殖反应

本文应用改良MTT（四甲基偶氮唑盐）比色法检测淋巴细胞增殖反应。结果表明，改良MTT比色法具有简便、快速、敏感之优点，便于一般实验室推广应用。     

人绒毛膜促性腺激素的纯化及其对小鼠脾细胞产生CSFs的诱导作用

HCG 粗品(10Iu/mg)经乙醇抽提,Sephadex G-100和 SE-Sephadex C-50凝胶过滤后,纯化了800倍,免疫活性达8370Iu/mg.经 SDS-PAGE 鉴定 HCG 的两亚基分子量分别为17000和32000.用纯化的 HCG 制备具有较高滴度的抗 HCG 抗血清.通过软琼脂培养法观察了 HCG 诱导小鼠脾细胞产生 CSFs 的影响,结果表明 HCG 浓度为400Iu/mg时,诱导效应最大。时间依赖曲线以72小时的 CSFs 活力最高.HCG 的诱导作用可以被抗HCG 抗血清完全中和。     

用ELISA双抗体夹心法检测人重组白细胞介素2(rHuIL-2)在酵母菌中表达的研究

采用ELISA夹心法检测人重组IL-2在酵母菌中表达产物的免疫学活性.结果表明,本法具有特异性强、简易、快速和重复性好等特点,尤其对利用工程菌制备及纯化rlL-2过程中能较快地监测出是否有该产物表达.     

人肿瘤坏死因子穿梭表达载体的构建

应用ＤＮＡ重组技术,将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游,得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ;再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上,构建成穿梭表达载体ＰＤＣ＿ＴＮＦ．转化大肠杆菌ＴＧ１后,进行发酵培养．ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分析和免疫印迹检测结果显示ｒｈＴＮＦ获稳定表达,分子量为１７ｋｕ．本研究结果为ｒｈＴＮＦ在蓝藻中的表达提供了技术基础．     

双抗体夹心ELISA法测定人凝血因子IX蛋白

用双抗体夹心ELISA法测定人凝血因子IX蛋白。在转入了外源人凝血因子IX基因的CHO细胞和HSF细胞的培养液中均测得一定量的IX因子蛋白,其量相当于正常人血浆IX因子蛋白的0.89%～3.81%,而对照细胞均为阴性结果。对一例血友病B患者(IX:C<0.1%)的分析结果表明,其血浆中含有的IX因子蛋白量相当于正常人的52.3%,因而将此病例归属于血友病B~R型。本法灵敏度高、特异性强、重复性好,可与一期法相互补充,应用于临床血友病B的诊断、分类、家系分析及携带者的检出。     

小鼠集落刺激因子（CSFs）的体外诱导研究

用体外淋巴细胞培养系统，对一些非淋巴因子诱导小鼠脾细胞产生集落刺激因子（ＣＳＦｓ）进行研究的结果发现，静止的小鼠脾细胞对原激酶（ＵＫ）不产生应答，只有当ＣｏｎＡ刺激后才能产生ＣＳＦｓ；表皮生长因子（ＥＧＦ）与ＣｏｎＡ协同作用能明显诱导ＣＳＦｓ的产生．人绒毛膜促性腺激素（ＨｃＧ）可直接作用于静止的脾细胞，使其产生ＣＳＦＳ．剂量依赖试验表明当ＵＫ为１６００ＩＵ／ｍｌ，ＥＧＦ为２０ｎｇ／ｍｌ，ＨＣＧ为４００ＩＵ／ｍｌ时所诱导的ＣＳＦｓ活性达到最高值．此外，ＣＳＦｓ的诱导还具有时间依赖关系．ＵＫ作用６０ｈ，ＥＧＦ和ＨＣＧ作用４８ｈ诱导产生的ＣＳＦｓ活性达到最高值．ＨＣＧ抗体中试验进一步说明ＨＣＧ可直接作用于脾细胞．联苯胺染色结果表明ＵＫ．ＥＧＦ和ＨＣＧ诱导的条件培养液中均不含红系集落刺激因子．     

也谈人力资源要素的确认与计量

近些年来,随着企业经营理念的不断更新和发展,企业资产的范围也在不断扩大,人力资源在企业的价值越来越被重视。本文通过对目前在国内外学术领域尚存争议的人力资源要素的确认与计量问题进行分析和讨论,最终提出了对人力资源要素进行确认与计量的具体方法和实施意见,以供国内外学术界和企业会计准则的制定者参考。