河蚬乙酸乙酯提取物的抗氧化活性及其对人胆管癌细胞的抑制作用

作为传统中药的河蚬具有退热、治疗肝病和解酒等功效.以新鲜河蚬 (Corbicula fluminea)肉为原料,经甲醇抽提,乙酸乙酯萃取等方法得到河蚬乙酸乙酯提取物.运用DPPH法检测其清除自由基的能力,通过MTT法和倒置显微镜观察其对人胆管癌细胞QBC939生长的影响,并通过流式细胞术分析其对QBC939细胞周期的影响.结果显示:河蚬乙酸乙酯提取物对DPPH自由基具有一定的清除作用,在较低的浓度下有较高的清除效果,IC50值为0.6 mg/mL,且随其浓度的增加而不断增强;河蚬乙酸乙酯提取物对QBC939细胞有显著的抑制作用,处理48 h,IC50值为250 μg/mL,细胞形态发生明显变化;处理后的QBC939细胞出现明显的凋亡峰.研究表明:河蚬乙酸乙酯提取物不但具有抗氧化活性,且对体外培养的QBC939细胞具有明显的增殖抑制作用,能够改变QBC939细胞周期分布,并诱导QBC939细胞发生凋亡.说明河蚬乙酸乙酯提取物可能具有天然药物开发的潜力,同时也为胆管癌的防治提供新的思路和方法.     

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的：研究紫杉醇（PTX）对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用，其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

两种新型倍半萜类化合物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

研究两种从盘花垂头菊中分离出的高含氧甜没药烯型倍半萜（HOBS）化合物对肿瘤细胞的影响．结果显示HOBS能够诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡．单细胞电泳实验证明HOBS能够以剂量依赖的方式诱导SMMC-7721细胞损伤,流式细胞技术显示HOBS能够以剂量依赖的方式诱导SMMC-7721细胞凋亡,凋亡率达到38．9％,Ci（Ca^2＋）的测定显示HOBS能够诱导,Ci（Ca^2＋）升高,所有的结果证明HOBS能够诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡．提示这两种化合物有抗人肝癌细胞的SMMC-7721活性,为抗肿瘤药物的设计提供了新的思路．     

茜草蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的探讨茜草提取物蒽醌单体对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用.方法采用MTT法、形态学、集落形成法,检测蒽醌对人肝癌细胞增殖的抑制结果.结果MTT法显示各个浓度的蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,呈现出与药物浓度、作用时间的依赖性;生长曲线由＂S＂型逐渐变得低平;倒置显微镜下可见药物组细胞数减少,间隙增大,细胞间出现＂接触性抑制＂;集落形成率降低（P〈0.01）,集落中细胞数减少.结论茜草蒽醌对人肝癌SMMC-7721细胞生长具有抑制作用;蒽醌有可能成为抗肝癌新药,为抗癌新药的开发提供理论与实验依据.     

亚硝酸盐对人肝癌SMMC-7721细胞HIF-1α表达的影响

为了探讨肿瘤细胞有氧糖酵解的原因,以人肝癌SMMC-7721细胞为对象,体外研究了亚硝酸钠对细胞HIF-1α表达的影响.结果表明:人肝癌SMMC-7721细胞体外培养条件下,加用一定剂量的亚硝酸钠可以促进细胞增殖和HIF-1α表达,超过一定剂量反而抑制细胞增殖和HIF-1α表达;当用亚硝酸钠和NO特异性清除剂c-PTIO一起作用细胞时,细胞增殖效应和HIF-1α表达总体有所下降,但细胞增殖和HIF-1α表达的低剂量促进高剂量抑制现象依然存在.结果提示,亚硝酸根离子和NO共同阻滞细胞线粒体呼吸链,导致细胞耗氧量下降,HIF-1α降解减少,使细胞有氧糖酵解加强,促进细胞增殖.     

HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞核基质-中间纤维系统构型的影响

应用选择性抽提，整装光镜和电镜样品制备技术，观察人肝癌SMMC-7721细胞经HMBA处理后核基质-中间纤维系统的变化．经HMBA诱导处理后，人肝癌细胞核基质纤维和中间纤维数量增多，结构层次丰富，分布均匀，并通过核纤层使3种纤维之间形成紧密联系．结果表明人肝癌细胞在诱导分化过程中核基质-中间纤维系统构型发生明显变化，对肿瘤细胞恶性表型逆转变化具有重要影响．     

HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞核基质-中间纤维系统构型的影响

应用选择性抽提,整装光镜和电镜样品制备技术,观察人肝癌SMMC-7721细胞经HMBA处理后核基质-中间纤维系统的变化.经HMBA诱导处理后,人肝癌细胞核基质纤维和中间纤维数量增多,结构层次丰富,分布均匀,并通过核纤层使3种纤维之间形成紧密联系.结果表明人肝癌细胞在诱导分化过程中核基质-中间纤维系统构型发生明显变化,对肿瘤细胞恶性表型逆转变化具有重要影响.     

河蚬对曝气池污泥的减量效果研究

城市污泥的减量化处理是当前污水处理厂急需解决的问题之一。以南昌市某污水处理厂曝气池污泥为供试对象,研究河蚬对污泥有机质、SS、N和P的减量化效果。结果表明,24 h后污水污泥有机物去除率达到35.78%。河蚬对水体SS、N和P的减量化效果明显,随着处理时间的延长,河蚬对水体中N的去除呈下降趋势,对水体P的去除呈先增后下降趋势。至第9天,河蚬对水体N和P的去除率分别达到67%和53%。     

三氮唑席夫碱衍生物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用

用不同浓度的3-吡啶-3-基-4-[(4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基)氨基]-5-甲硫基-1,2,4-三唑(LH-37)处理细胞,观察其对人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡诱导作用. 结果发现,LH-37可抑制细胞增殖,且抑制率随浓度的增加而增高,IC50为2.0×10-4 mol/L;药物浓度为1×10-5 mol/L时作用48 h,SMMC-7721细胞皱缩,呈现凋亡各期改变,Caspase-3阳性细胞明显增加,细胞凋亡率显著高于对照组的现象(P＜0.05).     

文蛤多肽粉对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及免疫调节作用

将文蛤肉以复合胰蛋白酶酶解,经喷雾干燥工艺得到了文蛤多肽粉,研究文蛤多肽粉对肝癌细胞的抑制作用和对昆明种小鼠的急性毒理作用和免疫调节作用,结果显示文蛤多肽粉对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721具有明显的杀伤作用,使细胞变形以至破裂从而抑制癌细胞的生长,抗肿瘤作用明显;文蛤多肽粉给药组的胸腺指数和脾脏指数较空白对照组明显升高,提示文蛤多肽粉能促进小鼠胸腺和脾脏的生长发育,增强免疫力.     

自噬对肝癌SMMC-7721细胞侵袭迁移能力的影响

为探讨自噬对照射过程中肝癌SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响及其潜在的作用机制,将肝癌SMMC-7721细胞分为6组,分别为阴性对照(NC)组、8 Gy X-线照射(IR)组、自噬激活剂雷帕霉素(Rapa)组、自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)组、照射+雷帕霉素(IR+Rapa)组和照射+三甲基腺嘌呤(IR+3-MA)组,利用划痕实验和Transwell实验检测自噬对肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭的影响;用CCK8实验检测照射、雷帕霉素和3-MA对肝癌细胞增殖的影响;用蛋白免疫印迹(Western blot)检测N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和LC3B蛋白表达情况。研究结果显示,照射可增强肝癌SMMC-7721细胞侵袭迁移的能力(P<0.05),同时,照射可抑制细胞的增殖能力(P<0.05);雷帕霉素激活自噬可增强细胞的侵袭迁移能力(P<0.05),3-MA抑制自噬可抑制细胞侵袭迁移和细胞的增殖能力(P<0.05)。照射可上调N-cadherin、Vimentin表达水平(P<0.05),激活或抑制自噬可分...     

AFP基因shRNA表达质粒稳定转染肝癌细胞克隆的构建

甲胎蛋白(AFP)是一种重要的胚胎期及肝癌相关蛋白,为了深入研究其在肝癌细胞增殖中的作用,构建了针对AFP基因的shRNA表达质粒,拟建立可稳定转染的肝癌细胞克隆;利用生物信息学方法设计shRNA,经酶切连接和抗生素筛选构建表达质粒;通过酶切、琼脂糖凝胶电泳及测序对质粒加以验证;优化转染条件后采用脂染法转染肝癌SMM C-7721细胞,利用Purom yc in筛选稳定转染的细胞克隆.成功获得高特异的shRNA设计结果,构建了针对人类AFP基因的shRNA表达质粒,并获得该质粒稳定转染的细胞克隆.     

反义VEGF165基因对肝癌细胞生长的抑制作用

人肝癌细胞株SMMC-7721体外转染反义VEGR_(165)基因,观察反义VEGF_(165)基因对肝癌细胞生长的作用。用分子克隆的方法构建反义VEGF_(165)基因其核表达载体 pcDNA_3-as-VEGF_(165),用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将反义基因转入SMMG-7721肝癌细胞株,观察反义VEGF_(165)基因抑制肝癌细胞 VEGF蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡的作用。RT-PCR结果显示转染反义VEGF_(165)基因后肝癌细胞内 VEG mRNA水平显著下降;ELISA方法显示转染反义基因 2 d后培养液上清 VEGF蛋白分泌显著下降((142.01±7.95)vs(1 625.52±64.46)pg/mL,n=4,P<0.01);免疫组织化学染色显示在培养板中转染及义VEGF_(165)基因的肝癌细胞细胞数显著减少,仅有少数细胞表达VEGF蛋白。流式细胞仪结果显示转染反义VEGF_(165)基因2 d后肝癌细胞的存活率下降了 12.53％(n=4,P<0.05),而凋亡率则上升了 13.12％(n=4,P<0.01)。MTT法显示反义VEGF_(165)基因能显著抑制肝癌细胞的增殖。反义VEGF_(165)基因能显著的抑制肝癌细胞VEGF蛋白的表达,抑制细胞的增殖,促进肝癌细胞凋亡。因此反义VEGF_(165)基因治疗有望成为一种新的治疗肝癌的方法。