小鼠囊胚玻璃化冷冻保存研究

在20°C室温下,用玻璃化冷冻液(体积分数为0.4的乙二醇,质量浓度为0.18kg/L的葡聚糖和0.3mol/L海藻糖)对昆明小白鼠囊胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存.一步法的1min平衡组和二步法的0.5min平衡组胚胎解冻后,体外培养24h后的发育率较高,都为91%,与对照组(98%)相比无显著差异(P＞0.05);体外培养48h后的囊胚孵化率较好,分别为48%和51%,但与对照组(90%)相比,均有极显著差异(P＜0.01).将此两组冷冻囊胚植入假孕3d的受体鼠子宫内,其产仔率分别为43%和50%,与对照组(55%)相比,均无显著差异(P＞0.05).     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

冷冻保存2年的体外受精胚胎移植产犊报道

１４０枚利用完全体外化培养技术生产、经常规方法进行冷冻保存两年后的良种肉牛胚胎，通过非手术法移植到７０头本地母牛，每头受体牛移入２枚胚胎以繁殖纯种后代。结果受体母牛２个情期不返情率为５０％（３５／７０）；１２０ｄ后经直肠检查确诊怀孕率为２７．１％（１９／７０）；９头受体母牛足月产下犊牛１０头，产犊率为１２．９％（９／７０），双胎率为１１．１％（１／９）。受体母牛平均妊娠期为２８０．８天（２６６￣２     

巨峰葡萄胚培养技术的研究

选用巨峰葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3I、AA、6-BA的不同激素水平MS培养基上进行胚挽救,以研究葡萄的幼胚培养技术.结果表明,巨峰葡萄在花后60 d效果最好.在附加GA30.5 mg/LI、AA1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L的最佳培养基上得到了(76.0±16.7)%的发育率和(69.1±13.1)%的成苗率.     

里扎马特葡萄胚培养技术的研究

选用里扎马特葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3、IAA、6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚培养,以研究里扎马特葡萄的胚培养技术.结果表明,里扎马特葡萄胚在花后60 d培养效果最好,在附加GA30.5 mg/L、IAA1.5 mg/L的MS培养基上得到了(84.0±8.9)%的发育率和(76.7±2.9)%的成苗率(p<0.01).     

生物质快速热解液化的实验

在集成的生物质热解液化系统装置上,进行了生物质快速热解制取液体燃料的实验.以几种代表性生物质为原料,研究了热解温度、生物质种类、运行操作条件等对热解液化率的影响.试验结果表明,在现有系统装置上,生物质最高液化率可达51.7%,不同操作条件对最终热解液化率有显著的影响.     

小鼠胎儿成纤维细胞的冷冻保存研究

为了摸索小鼠胎儿成纤维细胞冷冻保存的简易方法,采用常规冷冻和玻璃化冷冻2种模式,探讨了不同的冷冻方法、不同的冷冻前平衡时间、不同的冷冻保护液的配比等因素对成纤维细胞冷冻效果的影响。实验结果表明:常规冷冻采用含10%(体积分数)甘油的DMEM液作保护剂,可将0~5℃下平衡时间缩短至45~60 min,细胞活力可达0.87。玻璃化冷冻采用10%(体积分数)NBS+1.8 mol/L乙二醇+0.1 mol/L蔗糖的PBS冷冻小鼠胎儿成纤维细胞效果好于其他组合,细胞活力可达到0.86。玻璃化冷冻法与常规冷冻法的冷冻效果差异不显著。     

角膜快速冷冻低温保存的实验研究

本文用新鲜角膜，在不同浓度抗冻剂中作不同时间的抗冻处理后，采用快连冷冻法进行了低温保存的实验研究，并得到了比较满意的结果．实验中采用了茜素红和台盼蓝联合染色法鉴别内皮活性．实验结果认为，为得到较高的细胞存活率，角膜抗冻处理应尽量减小抗冻剂对细胞的毒性影响，可采用高浓度、短时间的方式；角膜冷却的关键是提高内皮层的冷却速率，可采用双级冷却法．     

影响玻璃化法冷冻保存胚胎的一些因素

探讨了用玻璃化法冷冻保存小鼠桑椹胚的一些影响因素。冷冻胚胎的保护剂采用性质较温和的甘油和1,2-丙二醇组成的玻璃化液,以37℃,体积分数5％CO2条件下能发育到囊胚期为保持正常生命力的指标。结果表明,玻璃化液中的甘油和丙二醇的浓度是冷冻保存胚胎的关键因素,而甘油和丙二醇比例对保存效果也有影响。在所用的不同组合的玻璃化液中,含2．5mol／L甘油和3．5mol／L1,2-丙二醇效果最好。0．25mL的冷冻管比0．5mL的效果更好。     

牛体外受精卵的冷冻保存研究

将胚胎分别以PBS 20?S 10%乙二醇和PBS 20?S 10%甘油为冷冻保护液,或者在PBS 20?S 10%乙二醇中添加或不加蔗糖为保护液,用常规冷冻方法进行冷冻处理.胚胎保存1～18天后将其解冻,并在发育用培养液TCM199 10%OCS(发情母牛血清) 丙酮酸钠中培养48小时.结果表明解冻胚的形态正常率和培养后的发育率在乙二醇处理组和甘油处理组中分别为81.2%(13/19)、56.2%(9/16)和84.6%(11/13)、46.2%(6/13),两组之间无量著差异.在添加蔗糖和不加蔗糖的处理组中,胚胎解冻后的形态正常率和培养后的发育率分别为75.0%(15/20)、55.0%(11/20)和83.3%(15/18)、61.1%(11/18),两组之间也无明曼差异.试验结果证明,用乙二醇为防冻剂对牛体外受精胚胎进行冷冻保存,其效果相当于或略优于甘油,在乙二醇处理组中,添加蔗糖与否并不影响其冷冻效果.     

山羊胚胎的体外发育及冷冻保存研究

采用体外培养的方法，对山羊２～８细胞胚进行培养以后将体外发育至囊胚的胚胎进行冷冻保存，以便探讨山羊早期胚的体外培养方法和冷冻方法对体外发育胚冷冻效果的影响。将胚胎分别放入Ｍ１９９、Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞和Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞＋ＥＧＦ的培养液中进行培养，选取发育至囊胚期的胚胎分别以甘油和乙二醇为冷冻保护剂进行冷冻保存。结果体外培养胚的囊胚发育率在三个处理组中分别为１２．５％、７０．６％和７６．９％。使用Ｍ１９９处理组与添加输卵管上皮细胞、添加输卵管上皮细胞和ＥＧＦ的处理组之间具有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。冷冻解冻胚的形态正常率和发育率在以甘油和乙二醇为防冻剂的处理组中分别为６８．７、５８．３％和７８．６％、７２．８％。两组之间无明显差异，结果表明，采用与输卵管上皮细胞共同培养的方法能够提高山羊胚胎体外培养的发育率，以甘油和乙二醇为冷冻防冻剂均适合于山羊体外发育胚的冷冻保存，两者相比乙二醇的效果略优于甘油。     

冻土爆破施工冻结管的破坏准则

冻土爆破施工，既要提高施工速度，又要保证冻结管的安全。本文给出了冻结管的破坏准则即爆破震动破坏准则、强度准则和变形破坏准则，对冻结管安全性检验具有一定的参考作用     

凝固点降低法测定分子量实验改进

从三方面对凝固点降低法测定分子量的实验进行了改进，一是以水-葡萄糖体系代替原来的苯-萘体系；二是以上端带有乳胶头的玻璃管代替搅拌棒；三是在漫没贝克曼温度计水银球的液面上方5～10mm处的常规内测玻璃壁上添加一个小铜螺栓．结果表明，本实验具有省试剂，误差小，少污染，便于操作等特点．     

哺乳动物胚胎冷冻技术研究进展

报道了胚胎冷冻技术的发展及现状。根据它的发展分别介绍了慢冻慢解法、常规快速解冻法、玻璃化冷冻、1步细管法冷冻、1步冷冻和半胚冷冻，并且就胚胎冷冻保护剂、冷冻方法、解冷方法、冷冻保护剂的脱除及胚胎发育时期等对胚胎冷冻效果的影响进行了探讨。     

人毛乳头细胞的冻存

寻找一种不影响人毛乳头细胞生物活性的冻存方法，采用标本沉降式液氮冻存方法，冻存新分离的人毛乳头；在冻存1月、3月和6月时解冻复苏，接种培养，观察毛乳头的贴壁率和细胞生长情况，复苏冻存了1月、3月和6月的毛乳头，培养2天时毛乳头贴壁率为90％－95％左右，与新分离的毛乳头贴壁率相近；瓶内细胞融合时间也基本相同，为15天。液氮冻存人毛乳头不会影响其细胞生物活性，值得推广。     

奶牛胚胎简易快速冷冻及其移植试验研究

将7日龄的黑白花奶牛胚胎,采用简易冷冻仪,以液氮作冷冻源的快速冷冻、解冻法对胚胎进行冷冻.甘油作冷冻保护剂,以1℃/min的速度由室温降至-7℃,在-7℃下绣发结晶,并在-7℃下维持5分钟;又以0.3℃/min降到-10℃,最后以0.5℃/min速度降至-30℃,平衡10分钟后,胚胎直接投入液氮罐申保存。需移植时,直接在37℃温水中解冻。本试验解冻了25枚胚胎,取1,2级胚胎15枚,除去甘油后,将15枚胚胎用凯氏枪输卵器分别移植给15头同期受体的的母牛,现已产下3头牛犊.结果表明,采用简易冷冻仪、以液氮作冷冻源的快速冷冻、解冻的胚胎可以成活,且有利在生产实践中推广应用。     

青刀豆在速冻和冷藏过程中的品质变化

对新鲜、加工后速冻的和在－２０℃贮藏６个月的青刀豆的品质变化进行了研究，内容包过干物质、ＰＨ值、酸度、糖、可溶性固形物、果胶物质、叶绿素和脱镁叶绿素，分析结果表明，烫漂和速冻可引起干物质、酸、糖和可溶性固形物含量的损失；脱镁作用发生的程度越少，颜色越稳定，试验证明，青刀豆在－２０℃贮藏６个月后，品质变化很少，颜色、 和风味都令人满意。     

地铁换乘站水平冻结压力的监测与分析

以在建上海地铁工程实际为例，通过有说服力的现场实测数据，总结分析了由冻结施工引起的冻结压力的变化规律，从而为上海地铁工程水平冻结设计、施工和检验提供了参考依据。     

摄动法用于冷冻生物组织的热分析

本文提出了用于预测球形低温冷刀周围被损伤组织增长速率的一阶摄动解.模型中包括有血流和代谢热的影响,且允许生物组织的初始温度高于其相变温度.在求解过程中,冻结相和未冻结相的热容影响均被考虑.结果表明,本文所提出的一阶摄动解比Cooper解更接近实验值和数值解.