石杉碱甲对急性炎症小鼠室旁核和脑干c-Fos和GFAP表达的影响

目的:探讨石杉碱甲对急性炎症小鼠下丘脑室旁核和脑干神经元c-Fos和星形胶质细胞(astrocytes,AST)胶质原纤维酸性蛋白(glial fiberillany acidic protein,GFAP)表达的影响.方法:①采用蛋清致小鼠足趾肿胀模型,检测致炎后30min,1h,2h的小鼠足容积并计算肿胀度;②免疫组化技术检测孤束核、迷走背核及室旁核神经元c-Fos及星形胶质细胞GFAP的表达.结果:①与生理盐水组比较,不同浓度的石杉碱甲均可明显抑制蛋清致小鼠足肿胀(P0.05或P0.01).②与对照组相比,致炎组小鼠孤束核和室旁核内Fos免疫阳性神经元(Fos-immunoreactive neurons,Fos-IR)及GFAP免疫阳性星形胶质细胞(GFAP-immunoreactive astrocytes,GFAP-IR)数目均明显增多(P0.01),而迷走背核增加不显著(P0.05).与致炎组相比,石杉碱甲给药组孤束核、迷走背核及室旁核内Fos-IR神经元及GFAP-IR星形胶质细胞数目均明显增多(P0.01).结论:石杉碱甲对蛋清致小鼠足肿胀有明显的抗炎作用;石杉碱甲能够显著增强急性炎症小鼠孤束核、迷走背核及室旁核内神经元和星形胶质细胞的活动.     

大鼠在空间辨别性学习记忆时海马CA1,CA3区和DG的ACh能纤维和星形胶质细胞的变化

目的通过建立大鼠空间辨别性学习记忆的动物模型,观察大鼠海马CA1,CA3区和齿状回(DG)的乙酰胆碱(ACh)能纤维密度和含量的变化以及星形胶质细胞的数量及其胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化,从形态学上探讨中枢ACh和星形胶质细胞与空间辨别性学习记忆的关系.方法建立空间辨别性学习记忆的动物模型,采用乙酰胆碱酯酶(AChE)的组织化学染色及GFAP标记星形胶质细胞.并用显微镜方格目测系统和图像分析仪对大鼠海马CA1,CA3区及DG的GFAP免疫阳性星形胶质细胞的数量及其GFAP表达进行检测.结果模型组与对照组相比大鼠各观察部位的AChE阳性纤维的密度和含量均增高,有显著性差异(P<0.05).而空白组和游水组相比大鼠各观察部位的AChE阳性纤维的密度和含量均无显著性差异(P>0.05),模型组内各组间两两比较大鼠各观察部位的AChE阳性纤维的密度和含量均无显著性差异(P>0.05);模型组与对照组相比大鼠各观察部位的星形胶质细胞的数量及其GFAP的表达均增加,有显著性差异(P<0.05).而空白组和游水组相比大鼠各观察部位的星形胶质细胞的数量及其GFAP的表达均无显著性差异(P>0.05),模型组内各组间两两比较大鼠各观察部位的星形胶质细胞的数量及其GFAP的表达均无显著性差异(P>0.05).结论在空间辨别性学习记忆过程中,大鼠各观察部位的AChE阳性纤维的密度和含量增高,说明中枢ACh参与空间辨别性学习记忆过程;在空间辨别性学习记忆过程中,大鼠各观察部位的星形胶质细胞的数量及其GFAP表达的增加,说明星形胶质细胞参与空间辨别性学习记忆过程.     

辣椒素对束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响

目的观察辣椒索对束缚-浸水应激大鼠脑于迷走运动背核(DMV)和孤束核(NTS)c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响,并探讨c-fos蛋白在DMV和NTS表达与胃溃疡的关系.方法大鼠皮下注射辣椒素,束缚-浸水应激,免疫组织化学技术检测原癌基因c-fos在脑干的DMV和NTS的蛋白表达,计算胃溃疡的指数.结果与盐水对照组相比,注射辣椒索组DMV和NTS中c-fos阳性细胞数显著减少(P<0.01),胃溃疡指数明显降低(P<0.05).结论辣椒素抑制束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的,DMV,NTS及辣椒素敏感传入神经可能参与应激性胃溃疡的形成.     

小鼠嗅鞘细胞的分离、纯化和免疫细胞化学特性

目的:对小鼠嗅鞘细胞的体外分离、纯化和免疫细胞化学特性进行研究.方法:分离新生小鼠嗅鞘细胞,综合运用差速贴壁法、阿糖胞苷抑制和丝裂原刺激等方法对其进行纯化,并用免疫细胞化学方法对其进行检测.结果:体外培养的新生小鼠嗅鞘细胞主要为双极或三极细胞.纯化培养后其纯度可以达到88.7%以上,污染细胞中有星形胶质细胞、神经元、少突胶质细胞和成纤维细胞.免疫组化结果提示,嗅鞘细胞呈P75和CNP免疫阳性,GFAP和Nestin阴性.结论:本研究对新生小鼠嗅鞘细胞的形态学和免疫细胞化学特性提供了部分数据.但不同的取材时间,不同的培养条件对嗅鞘细胞的影响尚需进一步研究.     

马钱子苷对神经干细胞的增殖、存活和分化的调节作用

为探讨不同浓度的马钱子苷对神经干细胞的增殖、存活和分化的调节作用及其相关分子机制，本实验从成年小鼠大脑中分离培养了神经干细胞，用不同浓度的马钱子苷进行干预，观察马钱子苷对神经干细胞增殖、存活和分化的影响。结果显示：成年小鼠神经干细胞在含有中、高浓度马钱子苷的增殖培养基中培养5 d和7 d后，神经球数量和直径与对照相比显著增加（P<0.05）；中、高剂量的马钱子苷能够促进神经干细胞的有丝分裂，低剂量马钱子苷处理显著促进神经干细胞发生分化（P<0.01），并增加神经元和星形胶质细胞的数量及比例（P<0.01）；中、高剂量马钱子苷抑制神经干细胞分化（P<0.05），高剂量的马钱子苷使得神经元的数量减少（P<0.05）。研究结果表明，高浓度的马钱子苷能够促进神经干细胞存活，并通过促进神经干细胞有丝分裂来提高其增殖能力；低浓度的马钱子苷促进神经干细胞分化，有利于神经再生和少突胶质细胞再生。研究结果为神经干细胞治疗中枢神经系统疾病的研究奠定了理论和实验基础。     

银消片合用银消软膏主要药效学研究

目的:观察银消片合用其软膏的主要药效学作用,为该药临床治疗银屑病提供药理学依据.方法:采用体内外抗真菌、消炎、抗自由基、细胞免疫和体液免疫等试验.结果:银消片合用其软膏具有下述作用:(1)对粉小孢子菌和石膏样小孢子菌等常见皮肤真菌具有显著抑制作用.(2)明显抑制二甲笨所致小鼠耳壳肿胀.(3)抑制角叉莱胶诱发的小鼠足跖肿胀.(4)明显抑制小鼠和大鼠棉球肉芽组织生成.(5)提高小鼠血液中性粒细胞的吞噬葡萄球菌的功能.(6)抑制2.4-二硝基氯苯诱导的小鼠迟发型超敏反应.(7)明显抑制酵母多糖激活的小鼠腹腔巨噬细胞产生的活性氧.(8)提高小鼠胸腺和脾脏的抗氧化功能,降低活性氧对免疫器官的脂质过氧化损伤.(9)显著提高豚鼠的致痒阈.(10)对SRBC诱导的小鼠血清溶血素、脾空斑生成细胞溶能力和小鼠血清IgM、IgG含等没有明显影响.体外实验:(1)银消片对粉小孢子菌、石膏样小孢子菌、红色毛癣菌等三种真菌有明显抑制作用.(2)有效的清除体内的O2、OH、H2O2、O21等多种活性氧.结论:银消片合用银消软膏具有抗真菌、消炎、止痒、抗氧化功能、增强机体的非特异性免疫及抑制细胞免疫等功能,而对体液免疫的影响不明显.这为银消片舍用其软膏治疗银屑病等多种皮肤病提供了药理学依据.     

中药复方宫炎净的乙醇提取物抗炎作用研究

为探讨中药复方宫炎净乙醇提取物的抗炎作用,并筛选抗炎作用最好的乙醇提取物剂量。将实验小鼠分为生理盐水组、地塞米松组以及高、中、低剂量中药复方宫炎净乙醇提取物组,同时建立二甲苯所致耳廓肿胀、蛋清所致足趾肿胀、棉球所致肉芽肿小鼠炎症模型,通过测定小鼠耳廓肿胀率、足趾肿胀率以及棉球所致肉芽组织重来判定乙醇提取物的抗炎效果。结果表明：中剂量乙醇提取物能够显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀率,并显著低于高、低剂量乙醇提取物组（P〈0．05）,与地塞米松组差异不显著（P〉0．05）;各组均能明显降低蛋清所致小鼠足趾肿胀率,其中中剂量乙醇提取物组显著低于高、低剂量乙醇提取物组（P〈0．05）,极显著低于生理盐水组（P〈0．01）,与地塞米松组差异不显著（P〉0．05）;中剂量乙醇提取物能明显抑制棉球所致小鼠肉芽组织增生,并显著低于高、低剂量乙醇提取物组（P％0．05）,极显著低于生理盐水组（P〈0．01）,与地塞米松组差异不显著（P〉0．05）。结果显示,中药复方宫炎净的中剂量乙醇提取物抗炎效果最好。     

HRP和AP呈现束缚-浸水应激大鼠NTS儿茶酚胺能神经元Fos表达的效果比较

用辣根过氧化物酶(HRP)单酶先后标记Fos和酪氨酸羟化酶(TH),用二氨基联苯胺(DAB)增强剂和DAB分别呈色;以及同时用碱性磷酸酶(AP)和HRP双酶分别标记TH和Fos,再分别用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)和氯化硝基四氮唑蓝(NBT)对TH和DAB对Fos呈色,比较免疫双标时两种不同酶标记显色方法...     

大叶胡枝子根皮提取物抗炎镇痛作用研究

目的探讨大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药的抗炎镇痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,研究大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药对急慢性炎症的作用。采用热板法和醋酸扭体法致痛,研究大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药的镇痛作用。结果与模型组相比,大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(P 0.01),明显抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀(P 0.01),明显抑制大鼠棉球肉芽肿(P 0.01)。大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组给药后明显提高热板所致小鼠的痛阈值,与模型组和自身给药前比较差异显著(P 0.05、0.01);大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数,与模型组比较差异显著(P 0.05、0.01)。大叶胡枝子根皮水提物的抗炎镇痛作用强于醇提物(P 0.05、0.01)。结论大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药具有一定抗炎、镇痛作用,且其水提物强于醇提物。     

补肾中药对过度训练大鼠运动能力及下丘脑室旁核c-fos表达的影响

目的：观察中药雪芙蓉胶囊对雄性大鼠力竭跑台时间、血清激素水平及下丘脑室旁核c—fos表达的影响。方法：将30只雄性成年大鼠随机分为3组,即安静对照组、训练组、中药训练组。中药训练组每天灌服雪芙蓉胶囊（5mg／kg）,8周后测试大鼠力竭跑台时间,检测血清睾酮及皮质醇含量,用免疫组织化学结合图像半定量方法对c—fos神经元的数量、面积及灰度进行测量和分析。结果：与训练组比较,中药训练组大鼠力竭跑台时间延长、血清睾酮水平增高（P〈0．01,P〈0．05）、血清皮质醇水平下降（P〈0．05）;下丘脑室旁核c—fos免疫阳性细胞数量和阳性产物面积表达均降低（P〈0．05,P〈0．01）,灰度没有显著差异（P〉0．05）。结论：中药雪芙蓉胶囊可提高大鼠的运动能力,延缓中枢疲劳,机理可能与此中药提高力竭运动大鼠血清睾酮水平,同时降低大鼠血清皮质醇水平及下丘脑室旁核c—fos的过度表达有关。     

铁苋菜抗炎镇痛有效部位的筛选

目的 筛选铁苋菜抗炎镇痛作用的有效部位,并初步探究其作用机制.方法 采用热板和醋酸扭体疼痛模型,考察铁苋菜镇痛作用的有效部位,采用二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀以及大鼠棉球肉芽肿炎症模型,考察铁苋菜抗炎作用的有效部位.结果 铁苋菜乙酸乙酯萃取部位明显延长热板所致小鼠痛阈值和明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数,与正...     

全反式维甲酸联合苦参素干预SD大鼠肝癌变进程中β-catenin的动态表达

用全反式维甲酸(ATRA)联合苦参素(OMT)对由二乙基亚硝胺(DENA)诱发建立的SD大鼠肝癌变动物模型进行联合干预.采用免疫组化及Western blot法对大鼠肝癌演变进程及药物干预后β-catenin的表达变化进行研究.结果显示,在肝癌变进程中,诱癌组β-catenin的表达逐渐升高,在重度炎性反应期(HI)至肝癌期(CCC)呈极显著性差异(P<0.05,P<0.01),并出现异位转移现象,其表达从肝细胞间质/胞膜逐渐转移至胞浆/胞核;干预组总β-catenin的表达在整个癌变进程中均显著低于诱癌组,且非典型性腺瘤样增生期(AAH)至CCC期呈极显著性差异(P<0.05,P<0.01),但异位转移的发生略晚于诱癌组.提示β-catenin与肝癌演进密切相关,ATRA联合OMT可通过减缓肝癌变进程中β-catenin的上调速度,阻碍异位转移的进行,在一定程度上延缓和推迟肝癌的发生发展.     

爵床提取物抗炎镇痛作用的实验研究

目的探讨爵床提取物的抗炎镇痛作用。方法采用致炎剂二甲苯引起小鼠耳肿胀、新鲜蛋清引起大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及棉球引起大鼠肉芽肿慢性炎症模型,研究爵床提取物灌胃给药对急慢性炎症的作用。采用热板法、醋酸扭体法和甲醛法致痛,研究爵床提取物灌胃给药的镇痛作用。结果与纯化水对照组相比,爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组对致炎剂二甲苯所引起的小鼠耳廓肿胀抑制显著(P 0. 01,P 0. 05),对蛋清所引起的大鼠足跖肿胀抑制显著(P 0. 01),对大鼠棉球肉芽肿抑制显著(P 0. 01)。爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组给药后对热板所引起的小鼠痛阈值明显提高,与纯化水对照组和自身给药前比较差异明显(P 0. 01,P 0. 05);爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组对致痛剂醋酸所引起的小鼠扭体反应次数明显减少,也明显抑制甲醛所引起的早期(0～5 min)和晚期(15～30 min)小鼠足痛反应,与纯化水对照组比较差异显著(P 0. 01)。爵床醇提取物的抗炎镇痛作用比水提取物强(P 0. 01,P 0. 05)。结论爵床提取物灌胃给药具有一定抗炎、镇痛作用,且醇提取物强于水提取物。     

家兔蓝斑复合核注射P物质对膈神经放电的影响及机制

目的 :探讨 P物质在蓝斑复合核对呼吸的作用及机制。方法 :实验在 45只麻醉、制动、人工呼吸的家兔上进行。结果 :将 P物质 (SP)微量注入蓝斑复合核区 (L c— Sc) ,使膈神经放电频率明显增加 ,吸气时程延长 ,呼气时程缩短 ,呼吸频率无明显变化。SP在 L c— Sc区使膈神经放电频率增加的效应可被延髓孤束核 (NTS)分别预注射 α或 β受体阻断剂拮抗。结论 :L c— Sc是 SP在中枢呼吸兴奋效应的有效作用部位 ,其作用机制可能是通过 NTS的 α和 β受体介导     

Deciphering a neuronal circuit that mediates appetite

Hypothalamic neurons that co-express agouti-related protein (AgRP), neuropeptide?Y and γ-aminobutyric acid (GABA) are known to promote feeding and weight gain by integration of various nutritional, hormonal, and neuronal signals. Ablation of these neurons in mice leads to cessation of feeding that is accompanied by activation of Fos in most regions where they project. Previous experiments have indicated that the ensuing starvation is due to aberrant activation of the parabrachial nucleus (PBN) and it could be prevented by facilitating GABA(A) receptor signalling in the PBN within a critical adaptation period. We speculated that loss of GABA signalling from AgRP-expressing neurons (AgRP neurons) within the PBN results in unopposed excitation of the PBN, which in turn inhibits feeding. However, the source of the excitatory inputs to the PBN was unknown. Here we show that glutamatergic neurons in the nucleus tractus solitarius (NTS) and caudal serotonergic neurons control the excitability of PBN neurons and inhibit feeding. Blockade of serotonin (5-HT(3)) receptor signalling in the NTS by either the chronic administration of ondansetron or the genetic inactivation of Tph2 in caudal serotonergic neurons that project to the NTS protects against starvation when AgRP neurons are ablated. Likewise, genetic inactivation of glutamatergic signalling by the NTS onto N-methyl D-aspartate-type glutamate receptors in the PBN prevents starvation. We also show that suppressing glutamatergic output of the PBN reinstates normal appetite after AgRP neuron ablation, whereas it promotes weight gain without AgRP neuron ablation. Thus we identify the PBN as a hub that integrates signals from several brain regions to bidirectionally modulate feeding and body weight.     

迷迭香酸对小鼠炎症介质的影响

通过角叉菜胶致小鼠足肿胀法检测炎症渗出液中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)、组胺(Histamine)和5-羟色胺(5-HT)的含量变化,以及血清中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮(NO)含量的变化,研究迷迭香酸抗炎的作用机制.结果表明,连续给小鼠灌胃7 d,迷迭香酸能明显抑制角叉菜胶致小鼠后足肿胀,并且显著降低炎症渗出液中前列腺素E2、丙二醛、组胺和5–羟色胺的含量,显著提高血清中过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性,显著降低血清中一氧化氮含量.说明迷迭香酸能够通过抑制炎症部位炎症因子的合成或释放而起到抗炎作用,为迷迭香酸更好地应用于营养食品、保健药品中提供理论依据.