金属硫蛋白清除羟自由基功能的研究

引言金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,简称ＭＴ）是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。１９５７年Ｍａｒｇｏｓｈｅｓｅｔａｌ首次从马肾中分离出该蛋白,现发现ＭＴ几乎存在于所有生物体中。哺乳类动物的ＭＴ通常是一条６１个氨基酸的肽链,其中含有...     

赤点石斑鱼LECT2基因的克隆与组织表达分析

基于LECT2的EST序列设计特异引物,采用RACE技术,成功克隆获得赤点石斑鱼LECT2 cDNA全序列,全长601 bp,包括了79 bp的3′UTR区、468 bp的开放阅读框(ORF)以及54 bp的5′UTR区,共编码155个氨基酸.通过与21个物种的氨基酸序列进行同源比对发现,所推导氨基酸序列与大黄鱼的相似性最高,为78%,与其他物种的相似性在40%～73%之间,表明LECT2氨基酸序列具有较高的保守性.基于LECT2基因的氨基酸序列构建的脊椎动物系统进化树与传统物种树基本吻合.同时,通过RT-PCR方法得出,LECT2在健康赤点石斑鱼多种组织中均有表达,肝组织表达量最高,感染哈维氏弧菌(Vibrio barveyi)后LECT2在脾、头肾、鳃等免疫器官中有较高表达量,而在肝脏中表达量上调最为显著,其结果证实了LECT2与赤点石斑鱼免疫应答相关,肝脏可能是赤点石斑鱼LCET2蛋白最主要的表达场所.     

植物谷氨酰胺合成酶研究进展

谷氨酰胺合成酶(GS)是参与高等植物氨同化过程的关键酶．介绍了高等植物谷氨酰胺合成酶及其同工酶的种类、性质、生理作用和分子生物学等方面的研究进展及在植物抗盐性方面的作用。     

RACE理论研究及其在植物基因工程中的应用

cDNA末端快速扩增—RACE(rapid amplification of cDNA ends),是近年发展起来的快速有效的获得全长cDNA的途径之一。本文阐述了RACE的历史、技术原理、局限性以及新型的RACE技术,并且讨论了RACE技术在植物基因研究中的技术优势、应用现状和发展前景。     

杨树抗杨四瘿螨相关基因的表达分析

采用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,在构建杨四瘿螨诱导差异表达的抑制消减cDNA文库的基础上,通过RTPCR技术对候选基因进行了验证,其中有6条差异表达候选基因在4个时间点表达量有明显的增强。运用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术克隆获得了一段全长2 053 bp的cDNA克隆,命名为PtWRKY,编码588个氨基酸。     

Changes of levels of glutamine synthetase isoforms in roots and leaves in response to nitrogen fertilizer application at different growth stages in irrigated rice

Nitrogen is a key element to control the growth and yield of crops. Fertilizer urea nitrogen (N) 60,45, and 30 kg/hm² was applied at three different stages, midtillering, panicle initiation, and flowering, of the growth and development of rice plants, respectively. At both midtillering and panicle initiation, the total activity of glutamine synthetase (GS) in rice roots and leaves was incrased remarkably as a result of a large amount of ammonia absorbed by roots. Native-PAGE and activity staining showed that the increase of total activity in rice roots and leaves was due to the synthesis of GSrb in roots and GS2 in leaves and that the activity of GSra in roots and GS1 in leaves remained constant. The results showed that the assimilation of external nitrogen was carried out by GSrb but not GSra in rice roots and that the activitry of GS2 was induced also by the external nitrogen, and that GSrb played main role in meeting the needs of the rapid tillering for nitrogen. At flowering, the activity of GS in rice roots and leaves did not change almost after topdressing. These rssults suggest that the change of GS activity in rice roots may use as a measure of the utilization efficiency of the fertilizer. Supported by the National Natural Science Foundation of China, Natural Science Foundation of Hubei Province, and International Rice Institute, P. O. Box 933 1099 Manila, Philippines Zhang Chufu: born in 1946, Professor, to whom Correspondence should be addressed     

镉和铅对鹌鹑肝脏金属硫蛋白的诱导

鹌鹑（Coturnix cotumix japonica）经口染毒CdCl₂溶液或CdCl₂和PbCl₂混合溶液,16 d后剖杀,取肝脏,Sephadex G-75柱层析得到肝脏金属硫蛋白(metallothionein,MT).经氨基酸组分检测分析其生化特性,结果表明纯化所得蛋白具有63个氨基酸残基,半胱氨酸含量为31.83%,分子量为6 614 Da,与哺乳动物金属硫蛋白的生化性质相类似.运用镉-血红蛋白饱和法对鹌鹑肝脏中MT进行定量测定,结果显示镉和铅可诱导鹌鹑肝脏内MT合成的增加,且肝脏中MT的含量随着金属暴露浓度的增加显著提高.这表明鹌鹑体内MT维持重金属内稳态的机制可能和哺乳动物体内的极为相似.     

酵母细胞表达金属硫蛋白对铅离子的吸附研究

根据人肝金属硫蛋白的基因序列,结合酿酒酵母菌密码子使用规律,改造并合成了可在酵母细胞内高效表达的金属硫蛋白基因,并将该基因转入酵母细胞内进行了表达.以野生型菌株为对照,初步测定了酿酒酵母INVSC1-mt菌株对pb2+的吸附作用.研究结果表明,金属硫蛋白基因的表达有助于提高酿酒酵母细胞对pb2的吸附作用,其最大吸附量比野生型菌株提高了11％.同时,酿酒酵母INVSC1-mt菌株吸附pb2+的速度较快,在30 min时,其吸附率就达到了96.03％,吸附量为5.76 mg/g湿重细胞.而野生型菌株至120 min时,其吸附率才达到90.44％.     

儿童铅中毒的研究现状

本文对铅的利用、国内外儿童铅中毒现状、铅中毒的根源、铅中毒对儿童的影响以及采取的驱铅方法做了讨论,介绍了金属硫蛋白对驱铅的意义,同时提出了防治儿童铅中毒的方法。     

Functional characterization of cadmium-responsive garlic gene AsMT2b： A new member of metallothionein family

METALLOTHIONEINS(MT)ARE LOW-MOLECULAR-WEIGHT AND CYSTEINE-RICH PROTEINS.THE FIRST MT PROTEIN WAS ISOLATED FROM EQUINE RENAL CORTEX IN1957[1].GENES EN-CODING MTS OCCUR IN DIVERSE ORGANISMS SUCH AS ANIMALS,HIGHER PLANTS,EUKARYOTIC MICROORGANISMS AND IN SOME…     

与ATP6相互作用的蛋白质的筛选和Bn HDL基因的cDNA克隆

以与甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育有关的atp6基因作为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术,筛选甘蓝型油菜的cDNA文库,寻找与其相互作用的蛋白质.根据筛选所获得的其中一个阳性克隆的序列,利用RACE技术和TAIL PCR技术,获得该基因的全长cDNA序列.将氨基酸序列在NCBI上进行Blast比对分析,具有水解酶家族17的保守结构域,与拟南芥的beta-1,3-glucanase 5具有84%的同源性,可能为水解酶家族的一个成员,暂定该蛋白质为Bn HDL.     

诸葛菜EPSPS基因5′端的克隆和序列分析

烯醇式丙酮基莽草酸 3 磷酸合成酶(5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase,EP SPS)是植物和微生物莽草酸途径中的一个必需合成酶,植物中该基因的超量表达或该基因中某些氨基酸突变可以产生对除草剂草甘膦(glyphosate)的耐性.采用5′ RACE技术从诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)叶中克隆出一条长743bp的cDNA片段.序列分析结果表明:该cDNA与其它植物的EPSPS基因具有相当高的核苷酸序列同源性.其所编码的氨基酸序列与欧洲油菜(Brassicanapus)同源性最高为90%,与拟南芥(Arabidopsisthaliana)、玉米(Zeamays)、西红柿(Lycopersiconesculentum)、烟草(Nicotianatabacum)和水稻(Oryzasativa)的同源性分别为88%,81%,64%,62%和71%.     

镉盐及镉与锌联合应用对lewis肺癌小鼠的影响

探讨4种镉盐对lewis肺癌的作用,以及锌与镉联合应用时锌的保护机制.建立lewis肺癌小鼠模型,随机分成不同的给药组.16 d后检测瘤重、胸腺指数、脾脏指数以及肝脏和肿瘤中的金属硫蛋白含量.氯化镉组对lewis肺癌抑制作用明显并可以增强荷瘤小鼠的免疫功能.1 mg·kg^-1氯化镉组与联合应用组相比肿瘤抑制率无显著性差异,而且后者小鼠肝脏中MT表达量显著增加.结果表明氯化镉可有效抑制lewis肺癌细胞的增殖,最佳抑制剂量为1 mg·kg^-1;在联合应用组中,氯化锌在不影响镉抗lewis肺癌效果的同时还能够进一步减轻镉对机体正常组织的毒性作用.