甜菜坏死黄脉病毒不同分离物外壳蛋白的研究

应用SDS-PAGE和PCR—SSCP分析技术，对新疆不同地区的BNYVV分离物进行分析，结果表明：12个分离物蛋白质外壳的蛋白亚基分子量均为20kD；来自库尔勒的K4和K5分离物编码外壳蛋白质的基因不同于其他地区和本地区的分离物，二者彼此间也不相同。     

新疆甜菜坏死黄脉病毒的鉴定

在新疆甜菜丛根病株上分离到一种杆状病毒,侵染甜菜、菠菜、苋色藜、昆诺阿藜和番杏;与BNYVV抗血清有反应、传播介体为甜菜多粘菌(Polymyxa betae)。稀释终点为10~(-3)～10~(-4),致死温度60～65℃,10分钟,体外保毒期约5～6天。粒体有4个主要的长度:80、110、260、400nm左右,宽约18nm。通过上述鉴定工作,认为该病毒与国外报道的甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)是一致的。     

甜菜丛根病病源的研究 1.甜菜坏死黄脉病毒的提取和电镜观察

甜菜丛根病(Sugar beet“rhizomania”disease)是在本世纪五十年代中期在意大利发现的一种土壤传播的病害。此病引起甜菜侧根不正常生长~[l]。以后,类似的病害也发现于日本~[2]、法国~[3]、德国、南斯拉夫、希腊、捷克斯洛伐克和美国等国家     

番茄植酸酶分离提纯及其特性研究

运用硫铵沉淀阴离子交换柱层析,凝胶过滤、ＦＰＬＣ和活性电泳等技术,从缺磷条件下生长的番茄根抽提物中分离提纯了植酸酶。     

甜菜坏死黄脉病毒新疆分离物外壳蛋白基因的原核表达载体和植物表达载体的构建

将克隆入ｐＧＥＭ７ｚｆ（＋）的甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）新疆分离物外壳蛋白（ＣＰ）基因的ｃＤＮＡ的ｐＧＥＢ３，用ＸｂａＩ切下，Ｋｌｅｎｏｗ补平，再用ＢａｍＨＩ切下ｃＤＮＡ片段。用ＮｄｅＩ切开原核表达载体ｐＪＷ２，用Ｋｌｅｎｏｗ补平，再用ＢａｍＨＩ切去小片段。将该ｃＤＮＡ与ｐＪＷ２大片段用Ｔ４连接酶连接，构建了ＢＮＹＶＶＣＰ基因的表达载体ｐＪＷＢ４，转化到大肠杆菌ＤＨ５α。经培养和高温诱导，ｐＪＷＢ４成功地表达出了ＢＮＹＶＶ的外壳蛋白。将ｐＧＥＢ３和ｐＢＩ１２１用Ｘｂａｌ和ＢａｍＨＩ酶切Ｔ４连接酶连接，构建了ＢＹＶＶＣＰ基因的植物表达载体，转化到ＤＨ５α，筛选出正向连结的阳性克隆ｐＢＩＢ３，转化入农杆菌ＬＢＡ４４０４（ｐＡＬ４４０４），经用ＰＣＲ扩增和γ３２Ｐ标记的探针杂交约证实为阳性克隆。往甜菜植株中转化工作正在进行中。     

甜菜上一种球状病毒分离物的特性研究

由田间自然感病和甜菜黑色焦枯病株，坏死黄脉型病株及无明显症 甜菜上分离到一种球状病毒，病毒呈二十面体，直径约25nm，有空心和实心2种粒子，具有分子量为24．7kd的外壳蛋白和长度分别为3．8kb,1.4kb,1.1kb的3个双链RNA组分，该病毒具有较强的稳定性和侵染性，蚜虫不能传毒，土壤诱发可传播，易通过汁液摩擦接种侵染多种植物；但回接甜菜只偶尔出现个别褪绿斑或不规则褪绿斑，并不表现田间症状，表明该病毒与甜菜黑色焦枯病等病害无直接关系。     

香蕉束顶病毒的分离与提纯

香蕉束顶病毒的分离与提纯＠曹先维＠孟清＠李宝庆＠张鹤龄＠孙茂林￥华南农业大学园艺系￥内蒙古大学生物学系￥云南省农科院植物保护研究所香蕉束顶病毒，分离，提纯香蕉束顶病毒的分离与提纯曹先维１，孟清２，李宝庆１，张鹤龄２，孙茂林３（１．华南农业大学园艺系，５１...     

新疆甜菜上两个病毒分离物的研究

在新疆甜菜的根部和叶片分离到两种病毒分离物。回接到甜菜上均产生环斑和沿脉线纹。最后形成坏死斑。病毒粒体为20面体,平均直径28nm。除侵染甜菜外还侵染苋色藜,昆诺阿藜、番杏、菠菜等,引起局部坏死斑,在普通烟、心叶烟、菜豆、黄瓜、番茄上无症状侵染,病毒致死温度为70℃,10分钟,体外存活期13天以上,冻干病叶三年后仍有侵染力。通过PEG沉淀。差速离心,琼脂糖柱层折及蔗糖梯度离心,可得到较高浓度的纯化病毒,病毒的紫外吸收最低值在245nm,最高值在260nm。病毒外壳蛋白的分子量为54000道尔顿,病毒基因组核酸为两个组份。在琼脂双扩散实验中,能与番茄黑环病毒(TBRV)抗血清产生较弱的沉淀线,与黄瓜花叶病毒(CMV),烟草坏死病毒(TMV)。烟草环斑病毒(TRSV)不发生反应,从上述结果可以初步认为这两种分离物为番茄黑环病毒侵染甜菜的一个株系。     

甜菜退绿斑驳病毒的分离和鉴定

本文报导一种甜菜退绿斑驳病毒的分离和鉴定。这种病毒对藜科植物有较强的亲和力,而难以侵染茄科及其它科植物。感病的甜菜表现为系统的退绿斑驳,其它藜科植物则产生局部枯斑、坏死斑及系统顶端坏死。物理化学性质测定表明,这种病毒在体外很不稳定,致死温度为40—45℃;;稀释限点10~(-2)—10~(-3);;体外存活期仅有8—10小时(10—15℃)。病毒粒子含有脂类性质外膜酸球形、椭圆形或其它不规则形态,直径约70—90nm,当用无离子洗涤剂处理除去外膜后,剩下形态较规则的球形核衣壳部分,直径约55—60nm.。超薄切片观察表明,病毒粒子存在于细胞质中,并总是伴随着细胞质浓密染色物质出现。     

天冬氨酸酶的分离提纯及其变性复性的研究

以E.Coli J-3为原料,经菌体破碎、链霉素处理、热处理、硫铵分级、磷酸钙胶处理、DEAESephadex A-50柱层析、羟基磷灰石柱层析、Ultrogel AcA 34凝胶过滤、HPLC层析九个步骤,得到聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳纯的天冬氨酸酶。并探讨了各种环境因素对变性复性程度的影响。结果表明,不同的变性、复性条件会诱导不同构象的产生。诱导酶的性质与天然酶不同。     

蚕蛹蛋白分离提纯的研究

蚕蛹中蛋白质由于分离过程脱色去蛹臭的问题没有得到很好的解决,因而影响它的应用.本文介绍的分离提纯方法,提取的蚕蛹蛋白的纯度高,百分含量高达92%,收得率在65%以上,而且白洁度好,无蛹臭味.     

蜂蜡、糠蜡中三十烷醇的分离提纯及其特性

蜂蜡或糠蜡用乙醇处理,然后用碱醇在苯中皂化,由蜂蜡所得不皂化物再经戊醇-盐酸提取,中层用苯重结晶;由糠蜡所得不皂化物用丙酮萃取后真空分馏,其一馏份也用苯重结晶,两者都得白色鳞片状晶体(m.p.85.5—56.5℃)。其乙酰化物用乙醇重结晶得白色片状晶体(m.p.69—70℃)。元素定量分析及红外光谱分析表明:该物质是三十烷醇-1。     

三角帆蚌蚌瘟病病毒的分离及其生物学特性的初步研究

三角帆蚌蚌瘟病是目前危害我国三角帆蚌最严重的疾病。我们于1982年～1985年对其进行了初步研究,认为蚌瘟病是由某种病毒引起的。同时与上海医科大学生物物理教研室超离心机室一起对三角帆蚌瘟病病毒进行分离、纯化等工作,对其生物学特性也作了些研究。至今已成功地从三角帆蚌瘟蚌的组织中提取到了病毒,并获得了一些电镜照片,现将有关的试验结果报道如下:     

文昌鱼酸性磷酸酶的分离提纯及其性质的初步研究

从厦门文昌鱼Branchiostoma belcheri(Gray)体内部分提纯一种酸性磷酸酶制剂。酶液比活力6.467μmole/mg prot/30min,提纯47倍,以等电聚焦法测其等电点为pH4.05。该酶在醋酸盐缓冲系统(37℃)中,以苯磷酸二钠为底物,测得最适pH4.5,K_m值为1.25×10~(-3)M(以对硝基苯磷酸二纳为底物测得最适pH4.5,K_m值为2.08×10~(-4)M)。pH影响K_m值而不影响V_(max),表现为竞争性类型。在不同温度条件下,测其活化能为9.15千卡/克分子。F~-,Hg~(2+),Mo~(6+)表现不同的抑制,PCMB终浓度为5×10~4M时酶活力下降70％。     

牙鲆贫血症病毒分离株的特性

用CHSE－214细胞，从患贫血症的牙鲆肾脏组织分离出一株病毒。电镜揭示为无囊膜、6面体、粒子直径约60nm；理化特性表明：病毒复制不受IUdR、BVdU的影响，对氯仿、乙醚不敏感性，热（60℃，30min）、酸（pH3．0，3h）中稳定；可被抗IPNV－Sp、Ab和VR－299株血清中和，其中抗Sp株血清的ND50为1:2560;病毒能在5～30℃增殖，最适为15～25℃；在盐度0．8～2．0％的培养液中，生长无明显差别；在16种鲑科和非鲑科鱼类细胞上，15℃培养1～4d出现CPE；感染细胞丫啶橙染色显示为黄绿色；用BirnavirusYAV株引物，PCR检出该病毒。结果提示该病毒株应属dsRNA的Birnavirus。     

有机物的分离与提纯

文章简要论述有机物的分离与提纯中一般应遵循的原则。     

活性碳纤维法分离提纯戊二酸研究

通过活性碳纤维(ACF)处理柱来分离混合二元酸(DBA)中有色物质,然后重结晶提纯分离戊二酸.研究系统分析了吸附剂用量、温度、流速以及可再生性能对吸附效果的影响,并确定了最佳工艺参数.结果表明,采用活性碳纤维吸附能很好地去除混合二元酸中的有色物质,最后分离提纯得到质量分数为99%的戊二酸,收率可达到80.5%;确定最佳工艺条件:温度为35℃,流速为48 mL/h,活性碳用量为1 g,用于再生蒸汽温度为200℃,再生时间为10 min.     

黑曲霉糖化酶的分离提纯及性质研究

采用硫铵分级、DEAE-纤维素离子交换层析、Sephadex G-150凝胶过滤等方法,从黑曲霉A.S.3.4309变异菌B-11的发酵液中,分离出三种电泳均一的糖化酶(G I.GⅡ和GⅢ)。收率分别为0.8％,50％和18.6％。性质研究表明,G I,GⅡ和GⅢ均由一条多肽链组成。     

果胶酶的分离提纯及某些性质研究

本文报导了一种制备高纯度果胶酶的方法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量为32000,用等电聚焦电泳法测得其等电点为pH8.0～8.2,用圆二色谱测得此酶呈无规则卷曲构象。     

产酸克雷伯氏菌氢酶分离提纯与特性的初步研究

采用硫酸铵沉淀和柱层析 (DEAE-Sepharose F.F., Sephacryl S-200, TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃,催化放氢的最适pH值为7.5,甲基紫晶(MV)是氢酶催化放氢的最适人工电子载体,氧对氢酶催化活性有较大的抑制作用.