茶毛虫核型多角体病毒DNA性质的研究

本文报道了对茶毛虫核型多角体病毒蒙山株系(EpNPV-M)核酸性质研究的结果。EpNPV-M含双链DNA分子,含量为6.85μgDNA/mgPIB,提纯的DNA具典型的紫外线吸收特性,琼脂糖凝胶电泳证明DNA分子是大小均一的。DNA的(G+C)％为36.6,限制性片段积加法测得该DNA分子量为75.61×10~6道尔顿,109.57Kb,电镜法测得DNA分子长度为35.8μm,相当于分子量为74.1×10~6道尔顿,107.4Kb.电镜观察证实该病毒含有一些超螺旋环状DNA分子。建立了三种限制性内切酶对该DNA的酶切图谱。三种酶的酶解片断数为:EcoRI,27个;BglⅡ,15个;BamHI,9个。     

新疆辣椒上一种球状病毒的鉴定

1990年,从辣椒上分离到一个病毒分离物,代号P—9003。人工接种可侵染6科14种植物,回接辣椒产生轻微花叶,不被蚜虫传播,可通过汁液摩擦传染。致死温度80—85℃,稀释限点为10~(-7),体外保活期18天左右。病毒粒体球状,密集时呈多角形,直径33—34nm。该病毒在寄主体内浓度较大,通过差速离心和蔗糖梯度离心容易获得较高浓度的纯化病毒,病毒衣壳蛋白分子量为一个组份,约为27500道尔顿。核酸分子量为三组份,分子量分别为1.24,0.55和0.37×10~6道尔顿。与黄瓜花叶病毒(CMV),蚕豆萎蔫病毒(BBWV),烟草坏死病毒(TNV),烟草环斑病毒(TRSV),香石竹环斑病毒(CRSV)的抗血清不发生反应。与番茄黑环病毒(TBRV)抗血清产生微弱的沉淀线。衣壳蛋白分子由211个氨基酸组成。根据多项测定结果认为,虽P—9003与TBRV抗血清有微弱反应,但其它各项特性与TBRV相差甚远,为非特异反应。P—9003的核酸和蛋白分子量与已知的几个球状病毒组的数据均不相符,因此认为P9003为一种木报导过的球状病毒,暂定名为辣椒轻花叶病毒(PepperMild Mosaic Virus,PMMV)。     

应用电子计算机帮助建立蓖麻蚕核型多角体病毒DNA的物理图谱

蓖麻蚕核型多角体病毒(ArNPV)核酸为双股环状DNA,分子量约81×10~6道尔顿。用BamHI,BglⅡ.EcoRI三种限制性内切酶对ArNPV-DNA进行了酶切研究,采用三酶切法通过电子计算机的分析,建立了ArNPV-DNA的三种限制酶的物理图谱     

新疆甜菜上两个病毒分离物的研究

在新疆甜菜的根部和叶片分离到两种病毒分离物。回接到甜菜上均产生环斑和沿脉线纹。最后形成坏死斑。病毒粒体为20面体,平均直径28nm。除侵染甜菜外还侵染苋色藜,昆诺阿藜、番杏、菠菜等,引起局部坏死斑,在普通烟、心叶烟、菜豆、黄瓜、番茄上无症状侵染,病毒致死温度为70℃,10分钟,体外存活期13天以上,冻干病叶三年后仍有侵染力。通过PEG沉淀。差速离心,琼脂糖柱层折及蔗糖梯度离心,可得到较高浓度的纯化病毒,病毒的紫外吸收最低值在245nm,最高值在260nm。病毒外壳蛋白的分子量为54000道尔顿,病毒基因组核酸为两个组份。在琼脂双扩散实验中,能与番茄黑环病毒(TBRV)抗血清产生较弱的沉淀线,与黄瓜花叶病毒(CMV),烟草坏死病毒(TMV)。烟草环斑病毒(TRSV)不发生反应,从上述结果可以初步认为这两种分离物为番茄黑环病毒侵染甜菜的一个株系。     

银纹夜蛾核型多角体病毒DNA的分离及电镜观察

银纹夜蛾核型多角体病毒,经不同密度的蔗糖溶液离心提纯后,用碱解处理分离净化病毒粒子,再经十二烷基硫酸钠——氯仿——正丁醇抽提,乙醇沉淀获得DNA.电镜观察DNA分子大多缠绕曲卷呈线状,少数为扭曲的环状分子。线状和环状分子周长平均为5.34μ,其分子量约为1.6×10~7道尔频。     

黄鳝超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

黄鳝超氧化物歧化酶粗酶液，经过正丁醇脱脂，丙酮分级沉淀，DEAE-琼脂糖离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤，从黄鳝中分离纯化获得铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)，并对其性质进行研究，最终该酶的比活力为1500U／mg，提纯倍数为368．5．回收率为24．7％．该酶对KCN不敏感．而对H2O2敏感，对热较稳定，对酸碱有较强的耐受性，抗胃蛋白酶的破坏，聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦电泳结果表明：纯化酶蛋白呈一条带，酶分子量约为85kD，亚基分子量约为16．5kD，等电点为7．15。     

B组轮状病毒的新成员——大鼠新轮状病毒

<正> 轮状病毒(Rotavirus,RV)是导致许多种幼龄动物发生非菌性腹泻(non—bacterial diarrhea)的主要病原之一。如人、绵羊、山羊、小鼠、羊、羚羊、幼驹、鹿、犊牛、兔、猴、猪、犬、鸡、火鸡、鸭、豚鼠等都有关于RV病原的报道。典型RV的基因组为双链RNA,共有11个分子量范围在2×10~5—2.2×10~6道尔顿片段。这11个片段的分子量总共约10×10~6—14×10~6道尔顿。所有的典型轮状病毒都有相似的RNA电泳型,其基因电泳型呈4—2—3—     

牛冠状病毒的增殖与提纯

以犊牛肺继代细胞增殖牛冠状病毒(BCV),用聚乙二醇(PEG6000)浓缩、超速离心和蔗糖梯度离心纯化病毒,并以小鼠红细胞测定提纯过程中每一步骤离心上清液及沉淀悬浮液中BCV的血凝(HA)滴度。发现浓缩条件不同(浓缩过程中加入NaCl和PEG6000的浓度不同),对病毒的回收率有影响,而以用2.10％NaCl的沉淀效果最好,可使上清液中残留HA滴度降至0;PEG6000的浓度对BCV沉淀效果也有影响,7.0％的PEG6000(在NaCl为2.1％时)可使离心后上清液中的HA滴度降至0。PEG6000浓度低于6.0％或离子7.5％时,沉淀效果都不佳。     

谷氨酸生产菌噬菌体理化特性的初步研究

从味精厂废发酵液中分离得到２株谷氨酸生产菌噬菌体３Ｃ１３和３Ｃ４１，提纯的噬菌体经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析：３Ｃ１３由１条主带、至少８条次带组成，多肽分子量在２８８４０￣９５０００道尔顿之间；３Ｃ４１呈３条主带、３条次带，多肽分子量在１７３７８￣７９４３３道尔顿之间。对提纯的核酸进行酶解消化、分子展层等生化分析以及限制性内切酶试验，证明２株噬菌体的核酸均为线状双链ＤＮＡ。３Ｃ１３核酸分子量为２７．８１     

斜纹夜蛾(Prodenia litura)幼虫核多角体病毒核酸(DNA)的分离和电镜观察

Bergold(1963)综合地报导了昆虫核型多角体病毒的性质;对家蚕核型多角体病毒核酸也陆续进行了研究;我国沈思祥等对家蚕核多角体病毒核酸(DNA)进行了研究,并报导其分子量为1.6×10~7。我们对农作物的主要害虫斜纹夜蛾的核型多角体病毒核酸进行分离和电子显微镜观察。     

侵染波斯毛莨的蚕豆萎蔫病毒的鉴定与提纯

从波斯毛莨花卉上分离到一株病毒分离物R89—1,浸染波斯毛莨叶片表现为不规则的黄斑和坏死斑,易经汁液摩擦接种.可经桃蚜以非持久性方式传播.能侵染测试的11科40种植物中的7科23种.病毒粒体为正20面体,直径约25nm.在琼脂双扩散试验中与蚕豆萎蔫病毒(B—BWV)的抗血清发生沉淀反应.根据上述特征,K89—1分离物鉴定为蚕豆萎蔫病毒.蚕豆萎蔫病毒用感染的昆诺阿藜叶片通过丁醇澄清及聚乙二醇沉淀容易提纯,每100g叶组织可获22mg病毒.提纯的病毒制剂具有典型的核蛋白紫外吸收曲线,最大吸收波长为259nm,最小吸收波长为241nm,A260/A280为1.67.在蔗糖密度梯度离心中含有上、中、下三条沉淀带.利用提纯的病毒制备的抗血清经微量沉淀试验效价达1/2048.     

假单胞菌中抗汞质粒pBH33的分离与鉴定

从污染环境中分离出一株抗100μM HgCl_2的假单胞菌B-33.经试验证实,假单胞菌B-33具有汞盐抗性质粒,定名为pBH33质粒,其分子量约为7.24×10~6道尔顿.     

中国油菜芜菁花叶病毒1号株系的生化性质研究

对中国油菜芜菁花叶病毒１号株系进行了生化性质分析，中国油菜芜菁花叶病毒１号株系的病毒粒子平均大小为７９０×１３ｎｍ；纯化的病责制剂对紫外线呈典型的核蛋白吸收，Ａ＿（２６０）／Ａ＿（２８０）＝１．２２。核酸含量为５％＝０．１５％；衣壳蛋白经Ｎ－末端分析和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳表明为单一组分，Ｎ－末端氨基酸为丝氨酸，分子量为２１０００Ｄ；衣壳蛋白由１８８个氨基酸残基组成     

枸杞果实铜,锌超氧物歧化酶的纯化及其性质的研究

枸杞果实粗提液中具有Mn-SOD、Fe-SOD和Cu·Zn-SOD三种类型。经氯仿-乙醇处理、丙酮分级沉淀、sepbadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素柱层析纯化,获得对CN~-敏感的Cu·Zn-SOD。在凝胶电泳染色图谱上,DEAE-纤维素柱层析纯化,获得对CN~-敏感的Cu·Zn-SOD。在凝胶电泳染色图谱上,DEAE-纤堆素柱线性梯度洗脱下来的两个活性组分与酶粗提液同工酶谱上两条Cu·Zn-SOD主区带分别相对应,而且酶活性染色带与蛋白染色带位置对应,说明上述活性组分都已纯化到均一的程度。该酶分子量约为33900道尔顿,亚基分子量约为16700道尔顿。酶的两个活性组分在紫外光区的吸收曲线略有差异,但吸收峰都在255nm。该酶在55℃的温度范围内对热稳定。纯化后的酶平均为4436units/mg protein,纯化了177.6倍,活力回收为12.3%。上述酶没有过氧化氢酶活性。     

茶卷蛾质型多角体病毒基因组特性的研究

茶卷蛾质型多角体病毒核酸（ＨｍＣＰＶＲＮＡ）用热酚法从提纯的病毒多角体中提取。紫外吸收光谱测定最高最低的吸收值分别在２６０ｎｍ和２３０ｎｍ处。经测定其Ｔｍ值为７９℃，在３％聚丙烯酰胺凝胶中，经电泳ＨｍＣＰＶＲＮＡ可分离得到１０条基因片段，各片段大小为０．３４×１０６～２．５５×１０６，总分子量为１５．１５×１０６，其ＰＡＧＥ图型与ＣＰＶ属代表种ＢｍＣＰＶＲＮＡ有较大差异，试验表明ＨｍＣＰＶ与ＢｍＣＰＶ属不同ＰＡＧＥ型。     

斜纹夜蛾NPV-DNA限制性内切酶分析及多角体蛋白的某些理化性质

斜纹夜蛾NPV-DNA经限翩性内切酶EooRI和BamHI完全消化,分别产生22条和15条片断,测得DNA平均分子量为75.26×10~5道尔顿。多角体蛋白经超离心,Sepharose 6B柱层析纯化,PAGE为一条均匀带;高碘酸-schiff反应阳性,多角体蛋白含有多糖;多角体蛋经显示酸性类脂的Niles兰染色呈阴性。     

象鼻南星(Arisaema elephas S.Buchet)凝集素的分离纯化及部分性质研究

本文用Sepharose 4B交联鸡卵类粘蛋白亲和层析柱,从天南星科植物象鼻南星(Arisaema elephas S.Buchet)中,纯化出一种具有凝集红细胞活性的糖蛋白.分子量约13,500道尔顿;等电点pH4.5;含糖量约10％.测得肽链N-末端为L-丙氨酸,并对其氨基酸组成进行了分析.象鼻南星凝集素(AEL)能选择性地凝集人的O型红细胞,及鸽、兔、小鼠、马和熊猫等动物的红细胞,但不凝集人的其它血型及鱼、蛙、龟等动物的红细胞.AEL具有光淋巴细胞转化的功能.能凝集人和某些动物的精子.通过FITC荧促标记,初步观察了AEL受体性精子表面的分布.     

拟厚膜藻胶多糖成份的分离及纯化的研究

本文论述一种红藻胶(拟厚膜藻)水溶性多糖的分离、纯化和结构分析。粗胶经 DEAE—Sephadex A-25柱层析,在55％—60％及76％—80％的乙醇溶液分部沉淀得到T_A 和 T_B 两部分。T_B 经 Sepharose—6B LKB 层析系统柱层析,分得 T_(m1)、T_(m2)、T_(m3)三个峰,经冷冻干燥得到三个白色絮状固体;T_(m1)、T_(m2)和 T_(m3)分别经酸完全水解,水解物经薄层层析以及还原后的乙酰化产纫用气相色谱分析。T_(m1)、T_(m2)和 T_(m3)经 LKB 凝胶过滤测得分子量分别为:6×10~3,1×10~4和4×10~3。对 T_(m1、T_(m2)和 T_(m3)单糖构成及其摩尔比进行分析,并对 T_(m1)作红外分析。     

小麦线粒体DNA理化特性的初步研究

对小麦(冀麦七号)线粒体DNA(mtDNA)理化特性的初步研究实验表明,小麦mtDNA由主带(大分子)和小分子群两部分组成。在1×SSC溶液中,对小麦mtDNA的热变性特性进行了分析,其Tm值为86℃,(G+C)％含量为40.8。本实验制备的小麦mtDNA大分子都是线状分子;mtDNA小分子中,主要是线状分子,也有少量的环状分子。mtDNA大分子的分子量为58.02—103.09×10~6道尔顿,线状和环状mtDNA小分子量分别为2.4—11.6×10~6道尔顿和0.4—9.1×10~6道尔顿。     

大豆β－淀粉酶的纯化和性质研究

主要介绍大豆β－淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽提得到粗提物，再经过乙醇沉淀，百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化，纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为３５．８％；酶的比活为３４１ｕ／ｍｇ蛋白。分子量为５．３万，等电点为５．２；最适ｐＨ５－６，最适温度４０—５０℃．