淡水涡虫繁殖及再生的研究进展

本文综述了淡水涡虫的生殖方式和发生异常无性生殖的诱因,并探讨了涡虫再生的细胞来源,生化机理及再生的极性之谜.     

陕北淡水涡虫的初步调查

调查陕北淡水涡虫，不仅对于深入研究陕北地区涡虫的分类区系及其它内容具有重要作用，而且对本地区大、中、小学动物实验也很有益处。本文通过对陕北淡水涡虫分类和区系的初步调查，发现有两科两属，且通过分析，认为这种动物资源在陕北有一定数量的分布，但有减少的趋势。同时提出对涡虫生境冷涌泉的保护意见。     

中国淡水三角涡虫种群间的亲缘关系分析

利用RAPD分子标记技术对中国8个产地淡水三角涡虫种群进行亲缘关系分析．筛选出13个合适的随机引物对8产地涡虫种群基因组进行PCR扩增,共产生137个扩增片段,平均每个引物扩增出10．5个片段,片段大小在3002000bp之间．不同涡虫种群间遗传距离变化较大,种群间最大遗传距离为0．4818,最小遗传距离为0．0876,平均遗传距离为0．3845;UPGMA法聚类分析表明：8产地涡虫种群可聚为3个聚类群,其中贵州遵义凤凰山和江苏太湖东山岛的涡虫种群间亲缘关系最近,安徽合肥龙泉山的涡虫种群与其他产地种群的亲缘关系最远．本研究表明上述8产地三角涡虫种群有明显的遗传分化,且种群间的亲缘关系与地理距离没有显著相关性．     

小冠花高效体细胞胚胎发生与植株再生的研究

目的建立小冠花稳定高效体细胞胚胎植株再生体系。方法采用植物离体组织培养技术,通过优化外植体,基本培养基及其激素组合,提高体细胞胚发生和植株再生频率。结果子叶外植体在附加1.0mg/L 2,4-D,1.0mg/L NAA,0.5mg/L KT和100mg/L脯氨酸的MSB培养基上35d100%形成体细胞胚,产生体细胞胚数量达625个/g,在MS KT 1.0mg/L IBA 0.1mg/L 脯氨酸300 mg/L培养基上转换成完整植株的平均数为21棵/g。再生植株移栽成活率为80%,其形态特征和生长习性未见变异。外源激素是体细胞胚胎诱导所必需的,2,4-D是其中最关键的一种。结论建立了小冠花高频稳定高效体细胞胚胎发生和植株再生体系。     

涡虫头部再生的细胞和分子机制研究

涡虫因其拥有非凡的再生能力,成为实验室再生研究的一种常见模式动物.涡虫身体被切割后残存的任意部分都能再生出缺失组织,即使是小到虫体1/279的片段也能够在很短时间内再生出一个完整的个体,其中头部再生的研究更是备受关注.涡虫头部再生不仅是普通的组织再生,还包括一个功能完整的中枢神经系统再生.本文主要综述了涡虫头部再生的最新研究进展,阐明了涡虫在身体中线区域通过构建新的组织中心-前极,引导干细胞迁移,完成头部再生的细胞和分子机制.同时详细介绍了涡虫体内全能干细胞和功能干细胞的区别及它们分别在再生过程中的作用.     

太白山淡水涡虫的初步调查及其冷涌泉的保护

１９９５年６月１１—２６日，作者通过对太白山国家森林公园淡水涡虫的初步调查，认为这种动物资源在太白山有一定数量的分布，现已发现两科两属。同时对我国冷涌泉的现状进行分析，为涡虫的生境冷涌泉以及太白山这一自然景观和旅游胜地的保护提出了初步的意见。     

DjRock2参与东亚三角涡虫再生调节

利用体外转录的方法合成DjRock2基因的RNA探针,检测RNA探针效率后,对成体及再生过程中的涡虫进行原位杂交试验;将DjRock2基因插入到L4440载体中,构建L4440-DjRock2干扰载体,合成dsRNA并微注射涡虫,利用RT-PCR和Western blot技术检测干扰后再生过程中DjRock2 mRNA和蛋白表达的下调作用。结果表明:DjRock2基因在成熟涡虫中枢神经系统中特异性表达,再生过程中伤口处胚基位置有阳性信号;干扰成体涡虫在再生第3天,头部、中部、尾部都有胚基的形成,但是第5天开始伤口处细胞凋亡,成体干细胞没有完成正常的分化,头部、中部、尾部再生都受到抑制,不能正常完成再生,甚至死亡。RT-PCR技术检测到RNA干扰后DjRock2mRNA的表达显著下降。Western blot检测到干扰后DjRock2蛋白的表达下调。所构建的L4440-DjRock2干扰载体干扰效率高,表型变化明显,从基因和蛋白方面进行分析,为进一步研究Rock2基因的功能奠定了基础。     

河南太行山脉3产地淡水三角涡虫染色体数目及核型多样性分析

利用空气干燥法对采自河南境内太行山脉十字岭、张沟、八里沟3产地淡水三角涡虫(Dugesiasp)的染色体和核型进行了研究.结果表明:十字岭淡水三角涡虫(Dugesia sp)体细胞中染色体数目以24条为主(2n=3x=24=24m),占84.56%,少数为16条(2n=2x=16=16m),占8.98%,染色体基数为8,为二倍体和三倍体的混合倍体;张沟淡水三角涡虫(Dugesiasp)体细胞中染色体数目以25条为主(2n=3x+1=24+1SB=21m+3sm+1SB),占80.84%,含有一条小B染色体,少数为24条(2n=3x=24=21m+3sm),占15.99%,极少数为32条,占3.17%,染色体基数为8,为三倍体、四倍体和三倍性非整倍体的混合倍体;八里沟淡水三角涡虫(Dugesiasp)的体细胞中染色体数目以24条(2n=3x=24=24m)和32条(2n=4x=32=32m)为主,分别占38.21%和39.77%,染色体基数为8,为三倍体和四倍体的混合倍体,该产地部分三倍体个体体细胞中染色体结构发生变异,个别染色体末端有随体,其核型呈现多型性.     

温度对日本三角涡虫眼点再生速度的影响

将耳突后切割去头的日本三角涡虫(Dugesia japonica)分别置于16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃和28℃条件下培养,在体视显微镜下观察不同温度条件下眼点的再生情况,发现日本三角涡虫眼点再生的最适温度是22℃.通过石蜡切片对22℃培养的涡虫眼点的再生情况进行组织学研究,结果表明:涡虫去头培养第3d新生组织基部分化出视色素细胞团,随着再生进程视杯逐渐变大.     

3种提取淡水涡虫基因组DNA方法比较

分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高,试剂盒法是最适合涡虫基因组DNA制备的方法.相同起始物质量条件下,3种方法从活体涡虫中提取的DNA量和纯度均高于95%酒精固定的涡虫标本,但试剂盒法提取95%酒精固定半年以上的涡虫标本,所得DNA产率较高、质量较好,可满足PCR扩增等分子生物学实验的要求.     

紫花苜蓿高频体细胞胚与次生胚再生体系的建立

通过系统地对紫花苜蓿体细胞胚发生以及次生胚发生途径中若干影响因子的比较研究,建立了紫花苜蓿高频体细胞胚和次生胚再生体系.结果表明,体细胞胚再生体系及次生胚再生体系均具有严格的基因型依赖性,不同的品种间以及同一品种内的不同株系间再生频率存在较大差别;MSO培养基可作为胚状体成苗培养基,但次生胚在MSO培养基中成苗率较低而再次形成新的胚状体;改良无激素SH培养基可有效终止次生胚的发生,并诱导次生胚成苗.此外,从6个紫花苜蓿品种中筛选到3个具有较强胚状体再生能力的品种,6个高胚状体发生能力的株系,2个具有较强的次生胚发生能力的株系,为进一步的遗传转化奠定了基础.     

埃斯基红豆草原生质体培养直接形成体细胞胚与再生植株

埃斯基红豆草花茎愈伤组织的原生质体在修改的ＫＭ８Ｐ和Ｖ－ＫＭ液体培养其中均能高频率地分裂和形成克隆，其分裂率为７１．４％－７６．１９％，在ＫＭ８Ｐ培养其中，原生质体经不等分裂可以直接形成体细胞胚，在Ｖ－ＫＭ培养其中形成的小愈伤组织培养也有体细胞胚的分化。     

柑桔幼胚培养的直接体细胞胚发生与植株再生

将柑桔幼胚分离接种于MS固体诱导培养基上诱导了体细胞胚直接高频发生并再生植株，初步建立了柑桔体细胞胚直接高频发生的实验系统。研究结果表明，柑桔幼胚在附加1mg／LIAA和20mg／LBA的MS培养基上的直接体细胞胚诱导频率最高。     

不同品种红豆草的组织培养与植株再生

对栽培红豆草２个种的８个品种进行了组织培养，均得到了胚性愈伤组织，并有４个品种再生植株。附加２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、ＫＴ ０．５－１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基是诱导细胞胚胎发生和保持胚性所必需的。基因型和外植体的来源在胚性愈伤组织的诱导和保持中起着重要的作用。     

非洲高淀粉甘薯品种Tanzania的再生研究

研究了一个非洲高淀粉甘薯品种Tanzania的胚状体再生途径.将去腋芽的茎段在含有不同生长素浓度(0~2mg/L)MS培养基上置于暗处,经过6~8周诱导出了胚性愈伤组织.Tanzania品种的胚性愈伤组织诱导频率较低,平均为13.4%,而对照Huachano品种为43.3%.Tanzania品种胚性愈伤组织由于生长素种类的不同而呈现不同的质量,形态和颜色特征.当诱导条件优化后,Tanzania品种茎尖在含1mg/L的4-fluorophenoxyacetic acid(4-FA)的培养基上,胚性愈伤组织诱     

多变小冠花的组织培养和植株再生

本试验利用未完全展开的多变小冠花(Coronilla varia L.)子叶诱导成愈伤组织,通过体细胞胚胎发生和器官发生两条途径获得了再生植株。愈伤组织在含6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,2,4-D2.0mg/L,CH400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上培养2—3周后,转移到含6-BA 1.5mg/L,NAA 0.7mg/L,CH 400mg/L,Gln225mg/L的MS培养基上培养4周,再转到6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln 150mg/L的MS培养基上,5周内形成胚状体。在1/2MS培养基上,胚状体萌发长成植株。愈伤组织在附加6-BA 1.0mg/L,NAA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,CH 400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上,形成绿色瘤状组织。后者在含6-BA0.7mg/L,NAA 0.2mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln150mg/L的MS培养基上,诱导产生丛状不定芽,不定芽在生根培养基上诱导成完整植株。     

芥菜（Brassica junceaL．）小孢子胚发生和植株再生

对芥菜(BrozvleajunceaL．)的7种基因型进行游离小孢子培养试验．从供体母株取2～41mm长的花蕾．分离小孢子并将其置于NLN-82液体培养基中薄层培养．先在33℃，后移到25℃继续暗培养，3周后统计形成的球形期至子叶期胚．将成熟的小孢子胚转移到无激索MS琼脂培养基直接或经二次分化得到小孢子植株．7种基因型均观察到细胞分裂，6种基因型获得了小孢子旺，3种基因型得到了再生植株．各基因型小孢子胚胎发生频率差异根大；产量最高的“成都大头菜”，平均每蕾小孢子胚产量为10．O个．     

福建福安的淡水水母

本文记述了福建淡水水母一新亚种——福安桃花水母Craspedacusta sowerbyi fuanensis subsp. nov. 文章还将福安标本与各地标本作了比较,并提出讨论。