热处理对HeLa细胞微管影响的研究

目的:用HeLa细胞作模型,研究热处理对肿瘤细胞微管的影响.方法:用不同温度(37°C、、40°C43°C和45°C)经不同时间(1h和2h)水浴处理培养的HeLa细胞后,分别即时用SABC法显示其微管.结果:与37°C相比,40°C处理后的HeLa细胞微管变化不大,43°C处理后,微管开始解聚,并随着作用时间的延长而加剧,45°C处理2h,微管组织中心消失.结论:高温能引起HeLa细胞微管呈现渐进式的解聚变化,微管组织中心具有较强的保护作用.     

钙调素拮抗剂TFP对Hela细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响

利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）及微管的不同聚合状态对Ｈｅｌａ细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响进行了研究。Ｈｅｌａ细胞微丝明显解聚，而波形纤维蛋白则密集分布在细胞核一侧。细胞经ＴＦＰ处理２ｄ后，可见微丝分布的恢复，而波形纤维蛋白分布则变得分散，并向质膜延伸。但对ＴＦＰ处理２ｄ后的细胞用低温（２～４℃）处理，使微管解聚，或以紫杉酚（ｔａｘｏｌ）处理２４ｈ，使微管高度聚集以破坏其微管网络系统时，微丝则随之发生明显的解聚现象，而波形纤维蛋白又恢复为密集分布于细胞核一侧的状态。若在低温处理前加ｔａｘｏｌ预处理１．５ｈ，以稳定微管时，此时在细胞周边仍可见微丝存在，波形纤维蛋白仍保持其分散分布状态。结果表明经ＴＦＰ处理的Ｈｅｌａ细胞微丝及波形纤维蛋白分布的变化可能与微管分布的改变具有一定的联系。     

钙调素拮抗剂TFP对Hela细胞微丝及波形纤维蛋…

利用钙调素拮抗剂三氟拉素（ＴＦＰ）及微管的不同聚合状态对Ｈｅｌａ细胞微细及波形纤维白分布的影响进行了。Ｈｅｌａ细胞微丝明显解聚，而波形纤维蛋白则密集分布在细胞一侧。细胞经ＴＦＰ处理２ｄ后，可见微丝分布的恢复，而波形纤维蛋白分布则变得分散，并向质膜延伸，但对ＴＦＰ处理２ｄ后的细胞用低温（２－４℃）处理，使微管解聚，或以紫杉酚处理２４ｈ，使微管高度聚集以破坏其微客网络系统时，微丝则随之发生明显的解聚现     

葡萄糖饥饿对HeLa细胞形态与结构的影响

为了探究葡萄糖饥饿对HeLa细胞形态与结构的影响,采用噻唑蓝法检测了细胞活力;用倒置显微镜、荧光显微镜和电子显微镜观察了细胞形态与结构的变化;采用激光共聚焦免疫荧光技术观察了细胞微丝与微管的分布.结果表明:葡萄糖饥饿能够抑制HeLa细胞增殖,破坏细胞骨架,改变细胞形态;使细胞皱缩、染色质凝集,出现凋亡小体,微丝微管解聚,表现出典型的凋亡特征,且细胞凋亡程度呈葡萄糖浓度依赖性和处理时间依赖性.总之,葡萄糖饥饿能抑制HeLa细胞活性,改变细胞形态,诱导细胞凋亡.     

空间微重力环境对人牙髓间充质细胞的影响初探

通过实际空间搭载实验,研究空间环境对人牙髓间充质细胞的影响。将人牙髓间充质细胞无源(细胞保存于密闭环境条件中,没有细胞培养所需的5%CO2、37℃、饱和湿度标准条件的适宜环境)搭载长征2号飞船进入空间环境,空间飞行时间为17d,返回地面后,继续培养成活并传代,观察其细胞骨架的改变。激光共聚焦显微镜观察显示:空间实验组细胞骨架出现弥散性的变化,局部微丝解聚。实验结果表明:人牙髓间充质细胞经历空间飞行后可以继续成活,并且细胞骨架发生了明显改变。     

细胞转化过程中微丝解聚的研究

ＮＩＨ３Ｔ３细胞以劳氏肉瘤病毒（ＲＳＶ）经温度敏感突变株转染形成的细胞株ｔｓＬＡ９０，细胞在允许温度（４０℃）时为正常表型，在允许温度（３３℃）下为转化表型。４０℃时，微丝分布发达，从４０℃移至３３℃１ｈ，微丝完全解聚，同时，其外基质成分纤粘蛋白（ＦＮ）亦相伴解聚。若在４０℃以外源性ＦＮ或对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）具有抑制作用的三氟拉嗪进行预处理后，再转入３３℃时便能抑制微丝的解聚。结果提示，除ＲＳＶ     

加拿大蓬挥发油对Hela细胞的体外抗肿瘤活性初探

为了探讨加拿大蓬挥发油的体外抗肿瘤活性,采用MTT比色法探究挥发油对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并采用AO/EB染色法观察Hela细胞在挥发油作用下的形态变化.结果表明:加拿大蓬挥发油对Hela细胞生长具有抑制作用,细胞活力随着处理浓度的升高和处理时间的延长而降低,其中处理8、24和48 h的IC50分别是22.72、18.06和6.78 mg/L,在加入泛caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)后,这种抑制作用得到缓解,24 h的IC50上升至29.9 mg/L,表明该挥发油可能激活了Hela细胞中的caspase蛋白酶活性.AO/EB染色观察发现,加拿大蓬挥发油处理Hela细胞后使其呈现典型凋亡形态的特征.由此推断,加拿大蓬挥发油可能是通过诱导Hela细胞的凋亡来抑制细胞增殖.     

微丝解聚对DNA合成的影响

G_0期细胞在10％血清培养液刺激后向S期行进的早期出现微丝解聚的变化.细胞松弛素B(CB)0.5mg·L~_(-1)使微丝发生部分解聚能加强血清对DNA合成的刺激作用.但随着CB剂量的加大,微丝解聚的加强,便逐步增强对DNA合成的抑制作用.发现用5,10mg·L~(-1)的CB短时间处理G_0期细胞可强烈刺激蛋白激酶C(PKC)活性,虽使微丝暂时完全解聚,但不影响向S期的过渡及DNA的合成.促癌剂TPA(12-tetradecanoyl phorbol-13-acetate)可刺激G_0期细胞PKC活性,并能促进血清对DNA合成的刺激作用,但小剂量CB和TPA促进DNA的合成均依赖于血清的存在。     

DMSO诱导烟草BY-2悬浮细胞的凋亡

烟草BY-2悬浮细胞经不同浓度的DMSO处理后发现,2％DMSO处理可导致细胞核染色质凝集或核结构解体,琼脂糖凝胶电泳显示基因组DNA降解成明显的梯状条带,从而表现出典型的细胞凋亡特征．对微丝骨架的进一步观察发现,2％DMSO处理引起细胞内微丝骨架分布异常,造成微丝骨架不同程度地断裂．这些结果为进一步研究微丝骨架在植物细胞凋亡中的功能奠定了基础．     

文蛤多肽对体外培养宫颈癌Hela细胞的抑制作用

采用蒸馏水抽提,有机溶剂沉淀大分子蛋白,Sephadex G-25分子筛柱层析等技术从文蛤肉分离纯化,得到一种低分子量的蛋白多肽,命名为Mer2.实验结果表明,Mer2对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制效应,Mer2对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用呈量效与时效关系.经40 μg/mL Mer2处理,体外培养宫颈癌Hela细胞生长缓慢,细胞形态发生明显改变,细胞生长抑制率达78.1%,并出现明显的凋亡峰,凋亡率为25.5%.     

不同高温对HepA细胞的杀伤作用

目的 :研究不同温度对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 :将肝癌腹水型瘤株HepA细胞分为 37℃、4 0℃、4 5℃和 5 0℃ 4个温度组 ,每组又分为 15min、30min、1h和 2h 4个时间亚组。经相应的温度和时间处理后 ,以MTT比色法检测细胞活性。结果 :不同温度对HepA细胞的杀伤作用有所不同。在一定的温度下 ,伴随作用时间的延长 ,细胞死亡率也随之增加。结论 :随着温度的增高和作用时间的延长 ,其对HepA细胞的杀伤作用逐渐增强。4 0℃作用较长时间后 ,细胞的死亡率明显升高     

EVn-50抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的探讨EVn-50对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,台盼蓝拒染法检测EVn-50对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;平皿克隆形成法、软琼脂克隆形成法测定EV-n50对人宫颈癌Hela细胞锚定依赖性生长和锚定非依赖性生长作用的影响;AO／EB染色荧光显微镜观察EVn-50诱导Hela细胞凋亡的形态学改变;DNA凝胶电泳确证EVn-50诱导Hela细胞凋亡作用。结果EVn-50对体外培养人宫颈癌Hela细胞的增殖具有显著抑制作用,呈浓度依赖性。EVn-50可诱导Hela细胞凋亡,AO／EB染色可见典型凋亡小体;DNA凝胶电泳在EVn-50浓度100μg／mL作用48h出现典型“梯形”DNA条带。结论EVn-50具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导细胞凋亡作用。     

高温和姜黄素联合作用诱导HeLa细胞周期阻滞和凋亡

目的:研究不同高温和姜黄素联合作用对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法:37~43℃与0~40mol/L姜黄素联合作用4~16h后,MTT比色法检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化.结果:高温作用后主要引起细胞凋亡和G0/G1期阻滞,姜黄素能抑制HeLa细胞的体外生长,呈时间与剂量依赖性,细胞周期阻滞于G0/G1期.联合作用后表现出了两者作用的双重特点.结论:应用高温和中药联合治疗可能是提高肿瘤治愈率、减少对正常组织细胞损害的有效方式之一.     

Thermal ablation versus conventional regional hyperthermia has greater anti-tumor activity against melanoma in mice by upregulating CD4~+ cells and enhancing IL-2 secretion

To determine whether conventional hyperthermia (42-45℃) or ablation therapy (＞50℃) achieves better synergistic effects on direct cytotoxicity and anti-tumor immunity,we compared the therapeutic effects of two hyperthermia temperatures,43 and 55℃,in terms of cytotoxicity and upregulation of immune functions in a mouse malignant melanoma model.Melanoma-bearing mice were treated by directly applying regional hyperthermia to the tumor nodule with a heating light at a temperature of 43℃ for 30 min or 55℃ for 10 min.The tumor growth curve and mice survival rate were observed.To investigate the hyperthermia-induced immunological response,peripheral blood CD4~+ and CD8~+ T cells and the serum IL-2 level were determined.Our results indicated that application of regional hyperthermia at the ablation temperature (such as 55℃) achieved better synergistic anti-tumor effects than did conventional hyperthermia (43℃).Significant increases in the number of peripheral blood CD4~+ T cells and the serum IL-2 level likely contributed to the underlying mechanism.     

流式细胞仪法检测4HPR诱导Hela细胞凋亡的百分率

目的：实验结果表明4HPR抑制Hela细胞生长的机理之一是诱导该细胞凋亡。本文用流式细胞仪检测不同浓度的4HPR作用不同时间Hela细胞凋亡的百分比及细胞周期变化。方法：体外细胞培养及流式细胞仪检测法。结果：2μg／m的4HPR作用24、48、72h后,Hela细胞的凋亡百分比分别为4.1％、6．6％、26％;4μg／ml的4HPR分别为5．1％、8．3％、28％、8μg／ml的4HPR分别为5．9％、6．2％、34％。细胞周期分布图中,G1细胞明显减少。结论：上述结果提示Hela细胞凋亡的百分比与4HPR的作用时间、作用浓度呈正相关。     

枸杞多糖硫酸酯化修饰及其对Hela细胞的体外抑制作用

通过L_9(3)~4正交设计对氯磺酸-吡啶法制备枸杞多糖硫酸酯(SLBP)的修饰条件进行优选,最佳条件为V(氯磺酸):V(吡啶)=1:4,反应温度80 ℃,反应时间2 h.枸杞多糖硫酸酯中硫的质量分数可达17.23%,硫酸基取代度可达1.935.以紫外和红外光谱对产物加以表征,并用MTT法测定了对Hela细胞体外生长的抑制作用.在25～200 mg/L内,枸杞多糖(LBP)对人宫颈癌(Hela)细胞生长几乎没有抑制作用,而枸杞多糖硫酸酯对Hela细胞的抑制率可达31.71%.用本方法所制备的枸杞多糖硫酸酯具有较高的含硫量和硫酸基取代度,对Hela细胞生长具有明显的抑制作用,其抑制率与硫酸基取代度和用药剂量呈正相关.     

紫杉醇与褪黑素联合使用对HeLa细胞的生长影响研究

目的：研究紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响。方法：通过生长曲线、集落形成试验观察二者联合应用对HeLa的影响作用。结果：单独应用紫杉醇和褪黑素与二者联合应用其生长曲线、集落形成试验的结果无明显差别。结论：紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响与单独应用二者无明显差别。     

一株来源于酒曲的纤溶酶产生菌的鉴定及其酶学性质

从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉(Rhizopus microsporus var.tuberosus).酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37,℃,最适作用pH为7.0.在37,℃保温4,h酶活力仍保存95%,57,℃下保温4,h后仍有一定酶活.该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH<3.4时仍残留部分活性;最稳定的pH范围是6～8.Zn2+、Cu2+对酶活有抑制作用,Na+、Ca2+、Mn2+对酶活具有明显的促进作用.该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4 h后残余酶活仍然保持在80%以上,有望制成注射剂应用于临床.     

4HPR对Hela细胞的抑制作用

目的：国外文献报道４ＨＰＲ对乳腺癌具有显著的化学预防及治疗作用。本文拟探讨４ＨＰＲ对Ｈｅｌａ细胞的抑制作用。方法：运用荧光显微镜、电子显微镜、动物致癌试验及流式细胞仪分析等方法。结果：通过荧光显微镜、电子显微镜观察发现Ｈｅｌａ细胞发生明显的形态学改变；流式细胞仪检测，Ｈｅｌａ细胞ＤＮＡ出现显著改变；裸鼠致癌试验也提示４ＨＰＲ抑制Ｈｅｌａ细胞生长。结论：上述结果提示４ＨＰＲ在体内外对Ｈｅｌａ细胞均具有较强的抑制作用。