人转铁蛋白修饰海藻酸钠载阿霉素纳米微球的制备与表征

通过人转铁蛋白修饰海藻酸钠载阿霉素纳米微球制备一种药物载体,拟解决抗肿瘤药物靶向治疗和肿瘤细胞多药耐药产生的问题.用优化的微乳化-离子交联方法制备包覆阿霉素的海藻酸钠复合纳米微球,以水溶性碳二亚胺为交联剂,将载药微球与人转铁蛋白连接,制备出了人转铁蛋白Tf修饰海藻酸钠载阿霉素纳米微球.结果显示其平均粒径为(170±5.12)nm,外观为圆球型,阿霉素包裹量为11.9%,人转铁蛋白的连接量为42.3%的纳米微球,为解决乳腺癌细胞的多药耐药性提供重要的体外实验基础和科学依据.     

OLA1通过抑制细胞凋亡影响乳腺癌细胞耐药性机制探讨

乳腺癌是世界上发病率最高的癌症之一,在临床治疗中以手术为主,化学药物治疗为辅．为解决化疗进行中,病患身上出现的对药物的耐受性问题,通过构建乳腺癌耐药细胞株研究OLA1变化对乳腺癌耐药性影响,依靠siRNA转染改变OLA1在细胞内的表达情况,接着使用流式细胞仪检测OLA1变化对细胞凋亡影响．最终发现OLA1通过影响细胞凋亡相关蛋白表达,降低紫杉醇对乳腺癌细胞的杀伤效果,由此提高乳腺癌细胞对药物的耐受性．     

横纹肌肉瘤多药耐药细胞系RD/VCR的建立

横纹肌肉瘤是一种高度恶性的软组织肿瘤，化疗是最主要的辅助治疗手段．然而，肿瘤细胞对药物产生多药耐药常常导致治疗失败．本实验以长春新碱为诱导剂，在体外成功建立了耐药细胞系DD／VCR，为进一步研究横纹肌肉瘤的耐药机理制作了模型．耐药前后细胞超微结构发生显变化，mdr1及mrp基因，P-糖蛋白及多药相关蛋白的表达与横纹肌肉瘤多药耐药的发生有关。     

多药耐药及相关蛋白质的研究进展

多药耐药 (MDR)是某些肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药的现象 ,也是目前肿瘤化疗失败的重要原因。研究发现 ,肿瘤细胞内的P -糖蛋白 (P -gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (LRP)、乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)等蛋白质与MDR密切相关 ,其共同特点是上述蛋白质在MDR细胞中均有过度表达 ,并通过多种途经降低化疗药物在肿瘤细胞内的浓度及改变其在细胞内的分布。此外 ,MDR细胞还常伴随有酶蛋白 (如蛋白激酶C -PKC ,谷胱甘肽S转移酶π -GST -π ,拓扑导构酶Ⅱ -TOPOⅡ等 )活性的改变。因此 ,肿瘤细胞的MDR是一个相当复杂的细胞生理、生化过程 ,是多因素共同作用的结果。     

A549／CDDP多药耐药细胞系的建立

以顺铂(CDDP)为诱导物,采用间歇逐步增加剂量法建立了人肺腺癌多药耐药细胞系A549/CDDP;MTT法测定A549/CDDP对顺铂、丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素及紫杉醇等的耐药指数.A549/CDDP细胞较亲本细胞略小,核质比增加,倍增时间没有明显变化;MTT法测定A549/CDDP的药物敏感性,对顺铂的耐药指数是20.29,对丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素及紫杉醇等药物有不同程度的耐药性,但对卡氮芥和羟基喜树碱无耐药性;A549/CDDP对顺铂的敏感性降低,其顺铂的含量较亲本细胞下降.     

CSB1-Lipo-DOX-miR101靶向治疗乳腺癌及抗耐药效应的体外研究

通过薄膜超声分散技术、硫酸铵主动载药技术构建了靶向乳腺癌(breast cancer, BC)细胞的具有抑制化疗药物多药耐药性(multidrug resistance, MDR)特征的阿霉素(doxorubicin, DOX)脂质体载药体系CSB1-Lipo-DOX-miR101。应用MTT法、损伤修复法、Transwell、细胞核染色、扫描电镜等技术对药物疗效和细胞行为变化进行研究。利用网络数据库分析miRNA101潜在靶向的MDR相关靶基因及BC恶性表征相关基因,以Western blot验证分析miRNA101靶基因的表达及潜在的抗MDR机制。结果表明,CSB1-Lipo-DOX-miR101对BC细胞MCF-7靶向性良好,特别是对耐药性BC细胞MCF-7/ADR具有明显杀伤力,同时对药物的MDR形成具有显著抑制作用,使药物可以持续发挥杀伤作用。结果提示CSB1-Lipo-DOX-miR101可以提高DOX对BC的临床治疗效应、降低毒副作用及复发率,其对BC的治疗效应及对MDR的抑制机理可能是通过抑制ABCC5、EZH2、APEX1、ITGB1、Snail1、MMP2基因表达实...     

白花蛇舌草体外对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402抗肿瘤活性的研究

目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛选出药物的安全剂量范围;集落形成实验观察体外抗癌药物的敏感性.结果白花蛇舌草提取物对肝癌多药耐药细胞Bel-7402的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系.结论白花蛇舌草提取物在体外对人肝癌多药耐药细胞Be1-7402有抑制作用.     

A549／TaxR多药耐药细胞系的建立

采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合,通过210 d建立了人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TaxR.MTT法测定A549/TaxR的药物敏感性,对紫杉醇的耐药指数是24.79,对丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素、足叶乙甙、顺铂及卡铂等药物有不同程度的耐药性,但对卡氮芥和吉西他滨无耐药性.本研究建立了稳定的人肺腺癌细胞系(A549/TaxR),可用于下游的实验研究.     

聚L-谷氨酸-γ-苄酯纳米粒子提高耐药细胞药物累积的研究

研究PGG载体在耐药肿瘤细胞中的作用.通过诱导A549细胞产生多药耐药性,评估在耐药肿瘤细胞中PGG对抗癌药物多柔比星胞内累积和驻留的影响.证明PGG药物输送系统能够增加耐药细胞株中的药物累积.利用内吞抑制试验和透射电镜试验阐明细胞通过胞饮方式摄取PGG载体药物,该方式提高了药物的细胞摄取,增加了药物的细胞累积.并利用激光共聚焦显微术确认了药物的细胞累积.PGG-Dox同游离Dox相比,通过胞饮作用进入细胞后,可以显著增加药物处理细胞内的Dox累积和驻留.Dox与PGG药物输送系统连接后,具有显著的抗耐药效果.PGG药物输送系统具备应用于耐药型肿瘤治疗的潜力.     

细胞穿透肽增强抗肿瘤效果的研究进展

细胞穿透肽(CPPs)是一种能够穿透细胞膜的多肽,可携带多种物质进入细胞内,并产生生理活性.现有一些抗肿瘤药物由于其本身的水溶性差、活性低、毒性大和易产生耐药性等缺陷,影响了肿瘤治疗效果.综述了近几年来细胞穿透肽增强抗肿瘤效果的研究进展,为更好地寻求治疗肿瘤药物的给药途径提供新思路.     

纳微多药给药系统的设计与研究

化疗是肿瘤等重大疾病的主要治疗手段,但由于肿瘤复杂的发病机制以及耐药性的产生极大地限制了传统单一化疗药物的临床应用.基于联合给药策略的多药给药系统,具有同时装载多种药物和药物释放行为的可控性等特点.主要就纳微多药给药系统的背景以及设计研究现状展开综述,希望为后来的研究给以启发.     

Hiwi基因在耐药MCF-7/ADM乳腺癌细胞株中的表达

目的探讨Hiwi基因在耐阿霉素人乳腺癌MCF-7/ADM细胞和非耐药MCF-7细胞的表达.方法应用实时定量PCR与Western blot技术进行Hiwi基因在耐阿霉素人乳腺癌MCF-7/ADM细胞和非耐药MCF-7细胞株表达水平检测.结果 Hiwi基因在耐阿霉素人乳腺癌MCF-7/ADM细胞中的表达明显高于正常乳腺细胞(P0.01)及非耐药MCF-7细胞(P0.05).结论 Hiwi基因在耐阿霉素人乳腺癌MCF-7/ADM细胞株的高表达为耐药乳腺癌细胞的靶向治疗指出新的研究方向,对乳腺癌治疗预后评估具有临床指导性.     

mdr1介导的获得性多药耐药性在胃癌细胞SGC7901的自然逆转

目的:探讨mdr1介导的获得性多药耐药在胃癌细胞SGC7901的自然逆转情况.方法:将培养细胞分为SGC7901、加长春新碱(VCR)的SGC7901/VCR和停VCR 6个月的SGC7901/VCR(设为SGC7901/VCR-)3组,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1 mRNA的表达,免疫印迹和免疫组化检测P-gp的表达,流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积和潴留,MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性.结果:SGC7901/VCR-组mdr1 mRNA和P-gp表达水平介于SGC7901和SGC7901/VCR之间.SGC7901/VCR-阿霉素蓄积和潴留均高于SGC7901/VCR,低于SGC7901(P<0.05).SGC7901/VCR-对化疗药物的IC50小于SGC7901/VCR,大于SGC7901(P<0.01);对DDP和ADR的耐药指数低于SGC7901/VCR(P<0.05).结论:停化疗药物6个月后,胃癌耐药细胞亚系SGC7901/VCR的多药耐药性降低,但未降到亲本SGC7901水平.     

抗鸡球虫病药物及其耐药性现状

鸡球虫病是严重危害养禽业的重要寄生虫病之一,目前鸡球虫病的防治主要依靠抗球虫药。因抗球虫药的长期应用极易导致球虫耐药性,使药物的防治效果大大降低甚至失效。本研究对抗鸡球虫病药物的种类及耐药性现状进行了综述,并对球虫耐药性产生机理进行了探讨。     

山奈酚诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中乳腺癌耐药蛋白的表达并下调抗肿瘤药物对MDA-MB-231细胞的杀伤作用

为确定三叶青活性物质山奈酚对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的影响及其作用的分子机制,通过定量PCR的方法检测TNBC临床标本及MDA-MB-231细胞中孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)的表达情况;通过荧光素酶报告基因活性检测确定山奈酚对MDA-MB-231细胞中PXR转录因子活性的影响;通过MTT(四唑盐)方法、裸鼠皮下成瘤方法研究了山奈酚以及抗肿瘤药物卡铂、维利帕尼以及拉帕替尼等对MDA-MB-231细胞的抗肿瘤作用。结果表明:PXR在TNBC临床标本以及MDA-MB-231细胞中有明确表达;山奈酚能够诱导MDA-MB-231细胞对抗肿瘤药物卡铂、维利帕尼以及拉帕替尼等对MDA-MB-231细胞的杀伤作用;山奈酚能够诱导MDA-MB-231中PXR的转录因子活性以及PXR下游基因乳腺癌的表达;使用小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)抑制乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)的表达能够逆转山奈酚诱导的抗肿瘤药物耐药。可见,山奈酚诱导TNBC细胞MDA-MB-231中乳腺癌耐药蛋白的表达并下调抗肿瘤药物对MDA-MB-231细胞的杀伤作用。     

δEF1与雌激素受体-α和他莫昔芬耐药关系的研究

乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,抗雌激素耐药是成功治疗的一大障碍,雌激素受体(ER)-α的减少或消失是产生抗药性的首要机制.δ晶体蛋白增强因子1(δ-crystallin enhancer factor1,δEF1)是锌指同源结构域转录因子家族中的一员,在乳腺癌等诸多肿瘤中均证实有δEF1的异常表达.采用RT-PCR、Western blotting和细胞免疫荧光技术,分析了在δ晶体蛋白增强因子1(δEF1)功能缺失情况下雌激素受体阳性乳腺癌细胞中雌激素受体(ER)-α表达的变化及组蛋白乙酰化对ER-α的影响.同时采用细胞活力实验证实δEF1通过调控ER-α的表达影响乳腺癌细胞对抗雌激素药物他莫西芬(tamoxifen,TAM)的敏感性.结果表明:δEF1被抑制后,乳腺癌细胞中ER-α的表达水平明显升高(p0.01),细胞对他莫西芬(TAM)的反应增强,存活率降低(p0.01);而组蛋白乙酰化可以显著恢复细胞中ER-α的表达(p0.01).     

中药代谢化学研究方法

随着中药现代化研究的新进展,越来越多的研究表明许多中药中的化学成分只有经代谢后才具有生物活性.因此,对中药单体成分及复方的代谢化学研究引起了越来越多的研究人员的重视.近年来对代谢化学的研究逐步深入,中药代谢化学研究方法也随之深入,为中药化学成分及其产生生物活性的有效成分的研究提供依据.概述了有关代谢化学研究方法的新进展,为中药新药研究、中药药效物质研究、以中药有效成分为先导的药物研究及中药质量评价提供了依据.     

超声给药:逆转肿瘤多药耐药研究取得新进展

正国际学术期刊《控释杂志》(Journal of Controlled Release(IF:7.633))于近期发布了中科院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程所的最新超声给药成果:脂质体-微泡复合物携载化疗药物阿霉素在超声激励下对多药耐药型乳腺癌的逆转作用及机制探讨。医学超声近年来逐步从过去利用声波散射特性的成像诊断功能为主,拓展到利用声波力的特性的超声给药治疗等具有重大潜力的新功能。载药超声微泡的出现,使得微     

用于盐酸阿霉素增敏的双给药水凝胶体系制备

多药耐药型乳腺癌细胞对抗癌药物盐酸阿霉素(DOX·HCl)敏感性下降,需要设计和制备一种实现抗癌药物增敏的给药体系.提出一种同时负载DOX·HCl和齐墩果酸(OA)的双给药聚乙二醇水凝胶体系.该体系基于具有亲水和疏水性的聚乙二醇水凝胶,实现DOX·HCl和OA的共包封和共释放.两种药物的释放通过氧-迈克尔加成反应和醇修...     

耐多药结核病治疗的研究进展

尽管过去几年在结核病的全面控制方面取得了进展,但结核病仍然是全球公共卫生一大威胁。其控制仍然是国际、国家和社区各级的一项重大挑战。特别是耐药结核病的治疗一直是令人关切的问题。全球2/3的结核病人处于发生耐多药结核病的状态,一些国家的耐多药结核病正处于上升趋势。因为不足够的或不恰当的治疗导致结核病患者体内的耐药突变菌成为优势菌。因此异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇等常规治疗方案已经不能满足耐多药结核病的治疗。通常,当结核分枝杆菌对其中一种一线药物产生耐药性时,则需要更换药物。目前,特别是较新的,具有良好杀菌活性的氟喹诺酮类药物,如左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星,成为了治疗肺结核的诱人药物。除此之外,还有其他一些新的治疗方案对耐多药结核病也有一定的治疗效果。本文主要针对治疗耐多药结核病进行综述如下。