梨胶锈菌生活史核行为研究

梨胶锈菌（Gymnospornngium haraeanum Syd．）冬孢子细胞为双核,萌发产生的担孢子双核。担孢子有4种萌发方式。直接萌发形成芽管和附着胞,间接萌发产生次生担孢子。产生次生担孢子的途径有：（1）姊妹核先衰退,另一核流入次生担孢子原基中经一次有丝分裂后形成双核次生担孢子。（2）姊妹核先衰退,另一核在担孢子母细胞中行一次有丝分裂后流入次生担孢子原基中。（3）姊妹核并存,其中一核在担孢子母细胞中行一次有丝分裂,母细胞3核,在流入次生担孢子原基前未分裂的姊妹核消失。次生担孢子对海棠具有更强的侵染力。次生担孢子梗有荧光现象,表明有细胞核残留物。性孢子单核,锈孢子双核,两个锈孢子间有一个双核的菌丝体细胞,锈孢子双壁,向基性成熟。性子器底部有一隔离层,菌丝体穿透隔离层后才能在叶背形成锈子器。在此基础上,提出了梨胶锈菌生活史中核循环规律。     

利用ITS-RFLP标记辅助筛选白灵侧耳与杏鲍菇杂交菌株

为提高白灵侧耳菌株、杏鲍菇菌株及其杂交菌株筛选效率及鉴定的准确性,利用ITS-RFLP标记辅助单核杂交技术对白灵侧耳与杏鲍菇的杂交菌株进行了筛选.对5份白灵菇菌株和4份杏鲍菇菌株进行了种间配对杂交,根据亲本菌株交配型将其分成7个组合进行杂交.结果表明:9份亲本材料共具有6个A因子和7个B因子.利用该技术对杂交处理后的菌株样品进行筛选,获得了3份杂交菌株11D、53D、70D,其中杂交菌株11D与53D的菌丝生长速度与亲本菌株相比较差异显著;杂交菌株70D的菌丝生长速度与亲本菌株XB130DB相比较差异显著,而与亲本菌株BL130DB在菌丝生长速度上差异不显著.     

茯苓交配型的初步研究

以茯苓栽培种“大泡引”为研究材料，茯苓菌丝为无锁状联合的多核菌丝，担孢子中双核孢子占75.3%、单核孢子2.4%、无核孢子22.3%。30个单孢株进行单孢配对结果为拮抗现象（不亲和）占总数的26.7%。茯苓菌株具有单孢结实现象，占单孢株总数的18％。由以上结果可初步得出茯苓菌为同宗结合真菌。     

香菇担孢子杂交

测定了担孢子存活率及萌发率,比较了单双核茵丝的培养特征、生长速度,并进行了单核茵丝的配对杂交、杂交菌株的初筛试验。结果表明,香菇担孢子的存活率与萌发率随冰箱(0～4℃)保存时间延长而明显降低;单双核茵丝的培养特征与生长速度有明显差别,两者较易区分。单核茵丝的配对杂交得到了一株具优良性状的菌株。此菌株的菇产量较其双亲高28.5%。     

不同品种香菇交配型基因的鉴定

利用原生质法单核体亲本交配型极性标记法,成功地鉴定出香菇－栽培株（Ｓ）与２野生株 （Ｑ＆Ｈ）的 ４种孢子单核体标准交配型基因,并以具有交配型基因的香菇栽培株的 ４种孢子单核体 与香菇２野生株４种孢子单核体轮配,而鉴定出香菇２野生株的４种孢子单核体相对交配型基因, 为香菇的遗传研究提供了可靠的遗传标记．结果显示栽培株Ｓ的４种孢子单核体的交配型分别为 Ａ１Ｂ１、 Ａ２Ｂ２、 Ａ１Ｂ２与 Ａ２Ｂ１,野生株 Ｑ的 ４种孢子单核体的交配型为 Ａ３Ｂ３、 Ａ４Ｂ４、 Ａ３Ｂ４与 Ａ４Ｂ３,野生株 Ｈ４４种孢子单核体的交配型为Ａ５Ｂ５、Ａ６Ｂ６、Ａ５Ｂ６与Ａ６Ｂ５．     

使用营养突变体进行的平菇种内原生质体融合

平菇的杂交菌株是通过单核菌株营养突变体的种内原生质体融合而产生的。营养突变体则是用N——甲基——N′——硝基——N——亚硝酸(月爪)处理捣碎了的菌丝体而得到的。它们中的一个来自241 ss8菌株,它在基础营养基中生长需要尿嘧啶;另一个来自235 PSA菌株,它在基础营养基中生长需要甲硫氨酸。用聚乙烯乙二醇使这两个营养突变体的混合原生质体融合之后,在含有琼脂的基础培养基平板里形成许多菌落。分离那些菌落可得到若干双核菌株,将它们培养在温度为25℃的锯末屑——米糠培养基中,然后转移到温度与光照周期性变化的条件下,子实体就形成了。子实体为灰色,与其亲本之一FMC241相似,而子实体原基形成的温度则与另一亲本FMC235相似。这样,杂种菌株就具有双亲的特性,酯酶同功酶谱的分析也显示了杂种的这种本性。     

重庆温光型小麦雄性核不育系C49s小孢子发生和发育的细胞学研究

作者对重庆温光型小麦雄性核不育系“C4 9s”、普通小麦“6 9”及不育系“C4 9s 87”与普通小麦“94 6 4”的杂种F1代雄性器官进行切片观察 ,发现其雄配子发育从花粉母细胞减数分裂间期到二分孢子时期绒毡层差异不大 .在减数分裂前期Ⅱ到中期Ⅱ ,不育系绒毡层细胞部分呈双核、三核增大细胞 ,部分出现核解体 ,而普通小麦“6 9”与“C4 9s 87/94 6 4”的杂种F1代中没有出现该现象 .不育系绒毡层细胞比可育系迟解体 .从单核早期开始 ,不育系小孢子发育不正常 ,表现为小孢子收缩变形 ,无核或有核细胞质稀薄 ,细胞核不能定向移动到萌发孔的对侧 .“C4 9s”败育的原因可能与绒毡层发育及液泡的动态性有关 .败育的高峰为单核期 .     

香菇完全亲和双单杂交初步研究

选用香菇的野生株（Ｑ）与栽培株苏香的４种孢子单核体进行完全亲和双单杂交。运用拮抗试验并辅以液体出菇试验初步鉴定出１２个杂交后代,且对杂交后代酯酶同工酶进行了检测。显著性检验研究表明,大多数杂交后代在菌丝生长速率与ＣＭＣ酶活方面表现了明显的杂种优势,４个代表菌株可产生正常的子实体。酯酶同工酶聚类分析与农艺性状分析表明杂交后代及其与亲本之间都显示了不同程度差异,表明１～１２号菌株是真正的双单杂交后代,认为菌株间酯酶同工酶酶相似系数值可以作为香菇遗传育种选择亲本的辅助的遗传标记。     

桃红平菇的交配基因型确定及与其它平菇品种的单双交配反应

对桃红平菇Pleurotus salmoneo-stramineus Vassil. 单孢分离菌株全机率交配研究表明该种为双因子控制的四极性异宗配合真菌。其4种单核交配型菌株与其自身双核菌株间具有明显的亲和性,而与其它11个平菇品种的双核菌株呈拮抗性反应,无亲和性,因而表明桃红平菇是一个与其它平菇品种存在生殖隔离的独立的生物种。     

水稻雄性不育系及其保持系花粉形成和发育的细胞形态学研究

一、不育系的小孢子母细胞减数分裂异常,其异常现象有: 1、在小孢子母细胞减数分裂的任何时期,均出现其细胞质液泡化及染色体全部或部份缠绕胶合成不规则的团块。 2、小孢子母细胞减数分裂前期Ⅰ,有的染色体不能正常配对,出现单价体或三价体;有的小孢子母细胞的胼胝质壁溶解,细胞质粘连形成多核原生质团;有的在粘连的大块细胞质中仅有许多核仁。 3、小孢子母细胞减数分裂形成二核或四核后,胼胝质横隔壁仅在其中央形成或从中央仅向一边周围廷伸,其外围的细胞质仍互相通连。以后胼胝质壁溶解,就从其细胞质相连的地方似非有丝分裂一样,拉开形成两个或四个裸孢子。这种胞质分裂的方式很特别。还未见有所报导。 二、不育系花粉的败育,在小孢子发育的各个时期(单核、双核、三核),均观察到各种败育现象,小孢子出现各种畸形。很特别的是,有很少数小孢子是孳生的。这些孳生小孢子,有的在一端是相通连的,形似非有丝分裂劈裂状;有的在中部相连通,似非有丝分裂的横缢状。这是小孢子的两种新的败育形态。可能是二分体的横隔壁形成不正常所致。 三、不育系的绒毡层提早在花粉母细胞减数分裂时就开始解体。 四、保持系小孢子母细胞减数分裂正常,减数分裂为顺序型。四分孢子为二轴对称式。花粉粒为三孢型。     

香菇的正反双单杂交育种

选用香菇的杂交菌株农１（Ｎ１）与野生株（Ｑ）孢子单核体及其自交后代进行正反双单杂交,以拮抗试验辅以液体出菇试验进行鉴定,得到６个杂交后代,选用１号与４号菌株进行栽培,它们都长出了正常的子实体,栽培结果表明：１号菌株产量明显高于４号菌株、Ｑ及Ｎ１,其生物转化率为１３４３％,产量优势为２４７４％,其杂种优势十分显著,同时也表明以Ｑ的孢子单核自交后代同Ｎ１正交（ＱＱ×Ｎｍ）育种优越于以Ｎ１的孢子单核体自交后代同Ｑ（ＮＮ×Ｑｍ）的反交育种     

白刺(NitrariasibiricaPall.)胚胎学的研究 1.小孢子和雄配子体的发育

花药药壁发育为基本型.成熟绒毡层细胞具双核,属分泌型,小孢子母细胞减数分裂为同时型,小孢子四分体排列为四面体形,单核小孢子第一次有丝分裂时,纺锤体始终与小孢子细胞长轴平行.生殖核先于营养核形成,胞质分裂极不对称,营养细胞与生殖细胞间具明显的、非肼胝质性质的壁.散粉时花粉粒为2细胞,细胞内贮藏丰富淀粉粒.花药各部分组织中始终富合淀粉粒,在小孢子及雄配子体发育过程中,淀粉的消长显示一定的功能相关规律.小孢子母细胞在减数分裂前期时开始积累肼胝质壁;刚释放的小孢子肼胝质荧光弱,液泡期小孢子具较强的肼胝质荧光.     

番薯_Sweetpotato_大_小孢子_胚与胚乳发育和结构的观察

对番薯大、小孢子、胚与胚乳的发育和结构的观察结果如下:1.胚囊的发育属蓼型;胚乳的发育属核型;小孢子的发育属同时型.2.用孚尔根核染色反应处理DNA的变化:小孢子母细胞的核是鲜紫红色,细胞质无色;当发育至四分体时,其核无色或为淡紫红色;及至成熟时,小孢子的核为紫红色,其细胞质为无色;大孢子母细胞及大孢子的核均呈紫红色,围于各核的四周有一白亮圈.3.胚珠倒生,具单层珠被.4.小孢子的发育比大孢子为早.     

狭叶锦鸡儿(Caragana stenophylla Pojark)绒毡层变化的亚显微结构研究

本文报道小孢子发育和雄配子体形成过程中绒毡层的变化.有下列四个主要特点:1)小孢子母细胞时期,绒毡层细胞质中质体和小泡丰富,并出现前乌氏体;2)四分饱子时期,绒毡层细胞质中产生大量粗糙内质网;3)单核花粉粒时期,绒毡层细胞质中内质网消失,出现大量多泡体,并在多泡体中的小泡内沉积电子致密物;4)解体的绒毡层细胞质中含有脂体、脂滴、乌氏体、微粒体等细胞器.处于单核花粉粒时期的雄配子体,在细胞中央的细胞质中含有高尔基体、线粒体等细胞器,而在靠近细胞壁的细胞质中粗糙内质网发达,同时还有丰富的质体和线粒体.     

Penicillium种间杂种的选育

1、用100—200r/ml的NTG处理P.Chysogenum 8519和P.Patuzuol B—53的分生孢子,分别获得不同类型的营养缺陷型菌株47株。 2、用CM、MM平板和LM液体杂交法,从具有亲合力的组合里分别获得189个异核体菌落。从扇形角变中获得N-1-2-3和N-1-2-5两个原养型杂交菌株。 3、此两菌株的共同特点是:分生抱子黄色,椭圆型,体权明显大于两亲本的分生孢子,孢子中DNA舍量是两亲本的两倍以上,两亲株的营养标记皆为稳性,代谢产物中既有青霉素,也有灰黄霉素。可以认为该两杂交菌株是种间杂种。     

Aspergillus oryzae与Aspergillus niger原生质体的制备、再生与非对称灭活工艺研究

为提高菌丝原生质体的释放量和活力,分别考查了培养基碳源、菌龄、酶浓度、酶解时间及再生培养基种类对Aspergillus oryzae和Aspergillus niger 原生质体释放和再生的影响,并研究了两亲本原生质体的非对称灭活参数。结果表明:（1）以MPY液体培养基为菌丝培养基,按105个孢子/ml培养基的接种量接入新鲜孢子悬液,30 ℃/100 rpm分别振荡培养18和21 h,总浓度15 mg/ml的复合酶液（溶壁酶：蜗牛酶：纤维素酶＝1:1:1）按1 g湿菌丝球/10 mL酶液的比例,于30 ℃/70 rpm条件下酶解2.5 h,然后以高渗豆汁固体培养基为再生培养基,在上述制备工艺参数下两亲本原生质体的释放量和再生率均可达到107个/ml和30％以上;（2）通过灭活曲线确定A. oryzae HN3042原生质体于15 W紫光灯垂直距离13 cm处照射15 min,A. niger CICC2377原生质体于65 ℃水浴10 min,此灭活剂量可使99％以上双亲原生质体非对称失活。     

侧耳单孢杂交育种—“宁杂一号”的选育

利用侧耳单核菌丝杂交,选育出“佛罗里达侧耳-1×褐平菇-17”优良杂交异核体——“宁杂一号”,较亲本出菇早,产量高,品质优良,杂种优势显著,在生产上具有一定的经济价值。侧耳(PLeurotus)通称平菇,是一种营养丰富、味道鲜美,栽培广泛的食用菌。侧耳有性生殖为异宗配合,四极性类型,即单孢形成的单核菌丝自体不育,不同单核菌丝在两对不亲和性(Imcompetibility)基因皆为杂结合方能双棱化形成子实体。因此,利用不同性状侧耳类型的单核菌丝杂交,选育优良杂交异核体是侧耳育种的一项途径。Egar,G.曾指出侧耳单孢杂交育种原理与途径,并以“F_(44×11)”选育无孢粉侧耳新品种,但侧耳属种间杂交育种尚有待研究,国内侧耳单孢杂交育种未见报导。为了选育本地优良侧耳品种,提高产量,特进行以下研究。     

紫菜苔Ogura细胞质雄性不育系花药发育的细胞形态学研究

通过甘蓝型油菜Ogura细胞质雄性不育材料与紫菜苔的种间杂交和连续回交,获得了稳定的紫菜苔Ogura细胞质雄性不育系,细胞形态学研究表明,该不育系的花药发育兼有无花粉囊型和单核败育型的特征,由于没有造孢细胞的形成或造孢细胞退化,不育系最多只有1－2个花粉囊,而可育系都是4个花粉囊,发育起来的不育系花粉囊里面的小孢子到单核期后不再向前继续发育,而是迅速退化以至解体,开花前彻底败育,在减数分裂前期,不育系绒毡层细胞中已经出现液泡,有肥大趋势,在单核小孢子退化以后绒毡层还很发达,而正常花药绒毡层的发育在减数分裂过程中达到高峰,四分体时出现退化迹象,开花前已完全解体。     

双孢蘑菇担孢子60Co-γ射线诱变效应初步研究

本文研究了放射性同位素60 Co-γ不同辐照剂量对双孢菇担孢子的诱变效应,结果表明,试验设定的6个辐照剂量下,孢子致死率在50.6%~90.63%,,辐照处理后萌发孢子菌丝生长速度与对照有差异,且菌落出现一种新类型.辐照处理后分离出的66个异核单孢菌株,酯酶同工酶、过氧化物同工酶和多酚氧化酶同工酶都出现新条带.同工酶聚类结果,70个单孢试验菌株在0.87的相似水平上聚成18个群,在0.95相似水平下聚类成25个群,3个对照菌株在一个群.研究结果显示,经放射性同位素~(60)Co-γ辐照处理的双孢菇担孢子,萌发后出现较大变异,有可能创制出双孢菇新的育种材料乃至选育出双孢菇新品种.     

漏斗状侧耳纤维素酶高活性变株的选育与产酶条件和酶特性研究

以漏斗状侧耳5·01为出发菌株,用NTG和UV依次对孢子、单核菌丝和双核菌丝进行处理,获得了微晶纤维素酶活和羧甲基纤维素酶活分别是出发菌株2.86倍和2.51倍的突变株HCA15。正交试验结果表明:该变株在含有棉籽壳粉、尿素、麸皮、纤维二糖的培养基中酶活高。产酶的最适pH为5.6,最适温度为28℃。酶作用的最适pH为4.6,最适温度为40℃。酶在pH5.0时最稳定,在50℃以上不稳定。