响应面法优选泽兰多糖的大孔吸附树脂纯化工艺

目的:考察8种大孔吸附树脂D3520、H103、HPD-100、HPD-700、AB-8、HPD722、S-8、HPD-600对泽兰多糖的纯化效果,以Box-Behnken法优化最佳大孔吸附树脂的最优纯化工艺.方法:以多糖保留率、脱色率、脱蛋白率的加权综合评分为指标,考察大孔树脂、洗脱流速、上样浓度、洗脱剂用量对纯化结果的影响,通过Box-Behnken设计建立响应面模型来优选大孔树脂泽兰多糖的工艺参数.结果:优选的泽兰多糖的大孔树脂纯化工艺为:取HPD-100大孔吸附树脂,泽兰多糖的上样质量浓度为0.03 g/mL,洗脱流速为1.1 mL/min,洗脱体积为40 mL,以此优选工艺纯化后,多糖保留率69.21%,脱色率60.24%,蛋白脱除率75.67%.结论:泽兰多糖的纯化工艺稳定可靠,HPD-100大孔吸附树脂纯化工艺效果良好,适合工业化生产.     

西洋参多糖提取与纯化工艺优化

目的:筛选西洋参多糖的最佳提取及纯化工艺.方法:以西洋参多糖为指标,采用正交实验对料液比、煎煮时间与次数进行优化.以吸附率为指标,对上样液质量浓度、上样液pH、上样流速、径高比进行正交实验优选;以解吸率为指标,对乙醇体积分数、洗脱剂pH、洗脱流速采用正交实验进行优化.结果:料液比、提取次数是西洋参多糖提取的关键影响因素,西洋参多糖最佳提取工艺为料液比1:10,加水提取3次,每次1.5h.上样液质量浓度、上样液pH、上样流速、径高比为多糖纯化的关键影响因素,多糖的纯化工艺为上样质量浓度2.74 mg/mL,上样液pH 8.0,上样流速2.0 mL/min,径高比1:8,最大上样量3.0 mL,洗脱剂为体积分数30%乙醇,洗脱剂pH 8.0,洗脱流速1.0 mL/min,洗脱剂用量3.0 mL;得到西洋参多糖纯度为47.94%.结论:建立的方法稳定、可靠,为开发利用西洋参资源提供基础.     

凝胶层析分离桔梗皂苷方法的研究

以桔梗为原料对桔梗总皂苷的分离方法进行了研究.采用超声波-水提法提取总皂苷,并采用凝胶层析法进行分离.通过单因素分析,确定了洗脱剂体积分数、上样量、流速、洗脱剂用量为影响凝胶层析的显著因素.通过凝胶层析分离实验确定了桔梗总皂苷的最佳分离工艺参数为:洗脱剂体积分数为70%,凝胶体积与上样量比为1∶4,流速为1 mL/min,洗脱剂用量与上样量为1∶1.     

鲜三七根茎中提取三七总皂苷的纯化及脱色工艺研究

目的:研究影响分离、纯化、脱色三七总皂苷的主要影响因素,确立三七总皂苷纯化脱色工艺.方法:鲜三七提取液,按醇沉1次,时间为12h,醇沉浓度为70%的乙醇,醇沉浓度与样液比例为1:1,加絮凝剂浓度为4%的工艺进行处理,采用D101大孔吸附树脂富集纯化和D941离子交换树脂脱色三七总皂苷.结果:70%的乙醇为洗脱剂,上柱液浓度为0.2g生药/mL,上柱液的量为200mL,上柱后先用蒸馏水快速冲柱的倍量为1.5,洗脱剂的倍量为3倍,洗脱时的速度(滴速)为60滴/min.结论:D101大孔吸附树脂富集纯化和D941离子交换树脂脱色三七总皂苷,效果较好.     

山楂果胶低聚糖的诱导生成和分离纯化

以山楂果胶多糖为原料,经果胶酶降解获得山楂果胶多糖酶解液.分别选用不同的上样量、洗脱流速和洗脱体积经DEAE Sephadex A-25柱层析对酶解液进行分离纯化方案的优化.结果表明,当最初山楂果胶浓度为10 mg/mL,上样量为50 mL、洗脱流速为1 mL/min以及洗脱体积为3倍柱床体积时,分离纯化效果最好,山楂果胶多糖酶解产物分离纯化得到11个单独的洗脱峰.该实验为后续山楂果胶低聚糖的应用以及构效关系的研究奠定了基础.     

鼠李糖乳杆菌胞外多糖提取与硒纳米粒制备

利用鼠李糖乳杆菌发酵,在优化工艺下从发酵液中提取胞外多糖(EPS),并制备胞外多糖-硒纳米粒(EPS-SeNPs),分析其表征、结构特性与抗氧化活性.结果表明,最优除蛋白条件为:聚酰胺(PA)添加量120 g/L、搅拌时间4 h;最优醇沉条件为:浓缩至原体积的20%、调pH至7、添加4倍体积95%乙醇、醇沉时间12 h,在此条件下测得EPS最大提取量为15.5 g/L,蛋白质含量为(1.19±0.45)%.制备出的EPS-SeNPs平均粒径为18.52 nm,1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH)清除率较EPS有所提升.研究旨在提高鼠李糖乳杆菌EPS提取量,为EPS及其相关产品的研究与开发提供新的方向.     

假酸浆多糖的酶法提取及纯化工艺的研究

采用正交设计法进行试验,以多糖的提取率作为评价指标,用木瓜蛋白酶法从假酸浆籽中提取假酸浆多糖.确定了木瓜蛋白酶的最佳提取工艺为:酶用量3%,p H=7.5温度55℃,提取时间50min.多糖提取率为6.02%.再将提取的粗多糖经脱蛋白、脱色等一系列工艺进行纯化,确定了假酸浆多糖的最佳纯化工艺,在此条件下测得多糖的含量为80.6%,脱蛋白率为77.33%,脱色率为70.2%.     

红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺研究

为了优化红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺,在单因素实验的基础上,选择过氧化氢加入量、脱色时间和脱色温度为自变量、多糖脱色率为响应值,应用DesignExpert软件,采用响应曲面法,研究了各自变量及其交互作用对多糖脱色率的影响．利用响应面分析方法拟合得到了二次多项式回归方程的预测模型,并确定了红曲多糖过氧化氢法脱色的最佳条件：4mL多糖（8mg／mL）溶液中3％过氧化氢溶液的加入量为3．9mL,脱色时间为127min,脱色温度为65．6℃．该条件下红曲多糖脱色率为86．24％．     

一种淡红侧耳多糖的制备工艺

研究了淡红侧耳多糖的提取工艺条件,并对其进行脱色脱蛋白处理。以单因素实验为基础,采用响应曲面法优化多糖的提取条件；选用大孔阴离子交换树脂D315脱色、Sevage法脱蛋白。建立的淡红侧耳多糖较佳提取工艺条件为提取温度95℃,提取时间3.9h,固液比(g∶mL)1∶30.6,在此条件下淡红侧耳多糖的平均得率为13.44%；D315的脱色率为81.37%,多糖保留率为82.21%；Sevage法蛋白脱除率为61.39%,多糖保留率为93.29%。经响应面优化及脱色脱蛋白处理,可获得得率高且色素蛋白含量低的淡红侧耳多糖。     

钝顶螺旋藻中蛋白质结合硒的研究

目的：研究富硒培养的印顶螺旋藻干藻（含硒：462.6μg.g^-1）中蛋白质含硒量及差异。方法：采用硫酸铵分经,DEAE-52纤维素及SephadexG-100柱层分离纯化蛋白质,经紫外吸收光谱和SDS梯度凝胶电泳检测白质纯度及基组成,以2,3－二氨基萘（DAN）荧光分光光度法测定含硒量。结果：蛋白质结合的硒占藻体总硒的58．7％,不同饱和度（25％,50％,100％）硫酸铵分级沉淀蛋白质中的硒占总硒情况分别为4．6％,18．7％,6．5％,DEAE－52柱层析蛋白洗脱峰蛋白含硒量依次为258,431,204,484μg.g^-1,分离纯化的含硒藻蓝蛋白有较高的含硒量（267μg.g^-1）,两个亚基相对分子质量为α＝19500,β＝21500,两亚基含硒量相对之比为1．65。结论：藻体蛋白及藻蓝蛋中结合硒并有明显差异。     

恩施续断中含硒化合物体外抗氧化活性分析

以恩施续断为原料,用蒸馏水、0.5 mol/L Na Cl、75%乙醇、0.1 mol/L Nao H四种溶剂对续断中不同种类硒蛋白进行提取.用热水浸提法提取硒多糖,用原子荧光法测定不同提取物中硒元素的含量,分析了续断中硒的赋存形态.并采用邻苯三酚自氧化法测定续断不同提取物清除超氧阴离子(O2-·)的能力,用Fenton法测定其清除羟自由基(·OH)的能力,探究了含硒化合物的抗氧化活性.结果表明:续断中硒的总含量为1.538μg/g,蛋白质、多糖中都赋存一定量的硒;蛋白硒是续断中硒的主要赋存形态.四种溶剂提取物中碱溶性硒蛋白的含量最高,它的含量可达总可溶性蛋白的57.28%.按照相同质量样品中结合硒量的多少,可以得出含硒量:总蛋白硒多糖硒;醇溶性硒蛋白盐溶性硒蛋白碱溶性硒蛋白水溶性硒蛋白.恩施续断中各种含硒化合物都有一定的清除超氧阴离子和羟自由基的能力,且不同溶剂提取物的清除率都不同.其中醇溶性提取物清除超氧自由基的能力最好,碱溶性提取物清除超氧自由基的能力最弱;硒多糖清除羟自由基的能力最强.     

沙葱多糖Sevage法除蛋白工艺的研究

研究了沙葱多糖Sevage法除蛋白的工艺.采用单因素试验确定Sevage试剂添加量、氯仿与正丁醇体积比、蛋白脱除次数及脱蛋白时间对沙葱多糖除蛋白效果的影响.并在单因素试验的基础上,采用正交试验确定了沙葱多糖Sevage法除蛋白的工艺条件.结果表明振摇时间和Sevage试剂添加量对除蛋白效果影响较大.Sevage法去除沙葱多糖蛋白的工艺条件为:Sevage试剂添加量为1/4,氯仿正丁醇体积比为3∶1,除蛋白时间为30 min.     

滁菊多酚的大孔树脂纯化工艺研究

对5种树脂进行筛选,结果AB-8树脂有较好的吸附和解吸性能,可作为滁菊多酚的纯化树脂.AB-8树脂对滁菊多酚的吸附时间在2.5 h达到平衡,解吸时间在1 h达到解吸平衡.优化A8-8树脂纯化条件,得出最佳纯化工艺为滁菊多酚上样液浓度2.8 mg/mL、pH值5,70％乙醇洗脱,上样速率1 mL/min,洗脱体积110 ...     

DM-18型大孔树脂分离纯化新疆沙枣果肉中多糖的工艺

本文研究了DM-18型大孔树脂分离纯化沙枣多糖的工艺条件,考察了各因素对分离、纯化沙枣多糖效果的影响,确定了分离沙枣多糖的最佳分离条件。结果表明:在沙枣多糖样品溶液2.0 mg/mL,上样速率为1.5 BV/h,上样液pH值为7.0,上样量为3.0 BV、洗脱剂乙醇浓度为35%、洗脱剂用量为4.0 BV、洗脱速率为1.0 BV/h时,DM-18型大孔树脂对沙枣多糖的动态吸附率和解吸率分别达到90.13%和92.17%,表明该大孔树脂是一种较好的分离纯化沙枣多糖的材料。     

聚酰胺纯化刺玫果总黄酮的工艺研究

探索聚酰胺动态吸附-解吸纯化刺玫果总黄酮的工艺条件.以总黄酮的比吸附量、吸附率及比解吸量、解吸率为考察指标,通过单因素实验对刺玫果总黄酮的纯化工艺进行优化.结果表明聚酰胺纯化刺玫果总黄酮的最佳工艺条件：上样液总黄酮的质量浓度为0.9 mg/mL、上样量为19.5 mL/g(上样液体积/聚酰胺质量)、上样液的pH值为2～4、吸附流速为1.5～2.0 mL/min、解吸液为70%乙醇水溶液、解吸流速为1.0～1.5 mL/min、解吸液的pH值为8～9、解吸液用量为12 mL/g(解吸液体积/聚酰胺质量).在上述纯化条件下,聚酰胺对刺玫果总黄酮的比吸附量平均为11.16 mg/g、比解吸量平均为10.20 mg/g、解吸率平均为91.40%,干浸膏中总黄酮含量由26.32%提高到75%以上.研究结果为刺玫果的深入开发提供了依据.     

芦笋多糖活性炭法脱色工艺

为优化芦笋多糖活性炭法脱色工艺条件,以综合吸附效应指数为考察目标,利用活性炭法进行芦笋多糖脱色,在单因素试验基础上,进行了均匀设计试验。结果表明,芦笋多糖活性炭法脱色的最佳工艺条件为脱色温度80℃,脱色时间60 min,活性炭的质量浓度25 g/L,溶液pH值7.0,该条件下综合吸附效应指数为68.24%,脱色率为67%,脱蛋白率为89%,多糖保留率为56%。     

UPLC-TOF-MS联用快速测定硒蛋氨酸和硒胱氨酸

采用超高压液相色谱-飞行时间质谱联用方法同时测定硒蛋氨酸(SeMet)和硒胱氨酸(SeCys)含量,分析柱为ZORBAX 2.1×50mm1.8Micron C-18柱,流动相为甲醇-0.1%(甲酸∶水),采用梯度洗脱,飞行时间质谱作为检测器,提取离子流色谱进行定性和定量分析.测定结果表明,SeMet和SeCys的线性范围分别为18.304~45.76ng,14.562~38.832 ng,相关系数为0.999 0和0.999 6,相对标准偏差小于1.5%;该方法能够在3 min内实现SeCys和SeMet的快速准确定量检测.     

铁皮石斛原球茎多糖提取及脱蛋白工艺研究

研究了铁皮石斛原球茎培养物中多糖提取工艺并进行了不同脱蛋白方法的比较?以提取温度?提取时间和料液比三因素进行正交实验,得到多糖最佳提取工艺为提取温度90℃?提取时间60 min?料液比1∶40(g/mL),多糖提取率78.51%?通过一系列单因素实验和正交优化实验,分析比较Sevage法?盐酸法?三氯乙酸法和木瓜蛋白酶法脱蛋白工艺?结果显示,Sevage法第5次洗脱效果最好,多糖质量分数43.81%,蛋白质质量分数9.67%;盐酸在体积分数25%时效果最好,多糖质量分数52.17%,蛋白质质量分数为4.82%;三氯乙酸质量浓度为0.03 g/mL时,多糖质量分数最高35.50%,蛋白质质量分数7.34%;木瓜蛋白酶法反应时间90 min?温度70℃?酶含量30U时,多糖质量分数85.01%,蛋白质质量分数为5.89%,效果最为理想?     

雪樱子粗多糖提取、纯化工艺及抗氧化活性研究

以雪樱子为原料,优化雪樱子粗多糖水提醇沉提取法及AB-8型树脂纯化工艺。并以维生素C作为对比,以羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力作为指标,对雪樱子粗多糖进行了体外抗氧化活性的测定。结果表明,雪樱子粗多糖的优化提取工艺为:醇沉乙醇体积分数80%、料液比(g/mL)1∶20、提取温度95℃、提取时间6h,粗多糖得率为(1.421±0.081)mg/g。雪樱子多糖优化纯化工艺为:上样液质量浓度1.00mg/mL,上样液pH值5,吸附速率2BV/h,乙醇洗脱剂体积分数25%,洗脱速率2BV/h,回收率为44.99%±1.23%。雪樱子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性。研究结果为雪樱子多糖活性分析和功能性产品开发提供了技术支持。     

大孔树脂纯化天麻多糖的工艺研究

本研究以炮制的干天麻为原料,水提醇沉法提取多糖,大孔吸附树脂纯化,比较了八种大孔树脂(AB-8、D101、LX-17、D301、NKA-9、S-8、LSD-001、ADS-7)对天麻多糖静态吸附-解析效果,筛选出最佳纯化树脂,再研究最佳树脂纯化天麻多糖工艺参数.结果为:八种大孔吸附树脂中D101对天麻多糖的纯化效果最好.样品液浓度、温度、上样速度,洗脱用乙醇浓度、洗脱流速及洗脱体积等因素均对D101树脂吸附分离天麻多糖有影响.所得的最佳纯化工艺为:20℃是较适宜的吸附温度,上样速度1BV/h,上样浓度4mg/mL,进行吸附;吸附饱和平衡后,用解析液浓度60%乙醇,解析速率2BV/h,解析液体积3BV进行动态洗脱.通过该工艺天麻多糖的纯度提高到了65.7%,表明了大孔树脂D101对天麻多糖具有较好的纯化效果.