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1.
用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和N-乙基丁二酰亚胺(NEM)分别对A.4041α-淀粉酶的主要组分α-Ⅲ的色氨酸(TrP)残基和巯基进行修饰.结果表明,50%的Trp残基被NBS修饰,可使酶活力完全丧失;Ca2+和底物可减少修饰酶的失活;加Ca2+或底物后修饰酶的荧光强度较对照修饰酶有显著提高.表明Trp是催化必需基团,并与结合底物和Ca2+有关.用过量NEM修饰巯基,酶活力改变不大,表明巯基不是酶的催化必需基因,并对酶的热稳定性基本无影响. 相似文献
2.
用PCMB、NBS、PMSF、TNBS、SUAN、DTT、BrAc、IAc等在一定条件下选择性修饰家蚕碱性磷酸酶的部分氨基酸残基,对酶活力的变化进行测定.结果表明:PMSF、SUAN、BrAc、IAc和TNBS的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;PMSF、DTT和NBT的修饰对酶的影响较小.初步认为,巯基和组氨酸的咪唑基可能是家蚕碱性磷酸酶的必需功能基团,赖氨酸残基和二硫键对保护酶的催化能力是必需的. 相似文献
3.
烟草叶片蔗糖酶的化学修饰 总被引:1,自引:0,他引:1
采用PMSF、NBS、IAc、BrAc、SUAN、TNBS、PCMB、DTT等8种化学修饰剂在一定的条件下选择性修饰蔗糖酶,研究烟草蔗糖酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系.结果表明:PMSF、NBS、PCMB等3种化学修饰剂能显著地抑制酶的活力,而BrAc、IAc、TNBS、SUAN、DTT等对酶的活力影响不大.说明对丝氨酸残基、色氨酸残基和巯基的化学修饰后对酶的活力影响很大,而酶分子中的组氨酸残基及赖氨酸残基不在酶的活性中心,修饰后对酶的活力没有直接影响. 相似文献
4.
菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性必需基团的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从菜青虫表皮分离纯化N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase),获得电泳单一纯的酶制剂,通过化学修饰法研究该酶的活性必需基团.分别以碳化二亚胺(EDC)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、对-氯汞苯甲酸(pCMB)、二硫苏糖醇(DTT)、澳代乙酸(BrAc)和乙酰丙酮在特定条件下对该酶进行特异的化学修饰,结果表明酸性氨基酸的侧链羧基、半胱氨酸巯基、色氨酸的吲哚基、组氨酸的咪唑基、二硫键被修饰后,酶活性均显著下降,因此这些氨基酸残基是酶活性的必需基团,而精氨酸残基及赖氨酸ε-氨基被修饰后对酶活力没有影响,不是酶的必需基团. 相似文献
5.
福寿螺β-葡萄糖苷酶催化功能基团 总被引:2,自引:0,他引:2
应用化学修饰法研究福寿螺β-葡萄糖苷酶活性功能基团的性质.用5,5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸)和对-氯汞苯甲酸为修饰剂修饰酶分子中的巯基,酶活力基本不受影响,说明该酶不是“巯基酶”.用N-溴代琥珀酰亚胺在pH6.0下修饰酶后,可使酶活力完全丧失,被修饰后的酶分子在278nm处的紫外吸收峰逐渐下降至完全消失,338nm处的荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭,说明色氨酸残基是酶活性必需基团之一.用碳二亚胺、溴代乙酸或甲醛修饰酶,可以使酶活力完全丧失,说明羧基、组氨酸的咪唑基及赖氨酸的氨基也与酶活性有密切的关系.用乙酰丙酮、苯甲磺酰氟修饰酶,酶活力不受影响,表明精氨酸残基和羟基与酶活性无关. 相似文献
6.
中华猕猴桃蛋白酶催化功能基团的研究 总被引:2,自引:2,他引:0
从野生中华猕猴桃分离提纯得SDS电泳单一纯酶制剂,酶蛋白的总巯基数为7,其中游离巯基数为1.3×10~(-5)MpCMB使酶活力丧失100%,酶修饰失活呈一级反应,表明酶分子的唯一游离巯基为该酶催化活性的必需功能基团.酶在2×10~(-4)M PMSF,活力仍不受影响,提示Ser残基与酶的催化功能无关.以Na_2S_4O_6保护游离巯基,用NBS修饰Trp残基,并辅以紫外光谱和萤光光谱分析.结果表明Trp残基为酶催化功能所必需.初步的CDC化学修饰结果亦表明,羧基似与酶催化活性有关. 相似文献
7.
长毛对虾碱性磷酸酶功能基团的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
用对-氯汞苯甲酸修饰该酶分子中的巯基,酶活力不受影响,说明该酶不是“巯基酶”.用N溴代琥珀酰亚胺修饰酶后,活力完全丧失,修饰后的酶在275nm处的紫外吸收峰完全消失,340nm处荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭,说明色氨酸残基是酶活性必需基因之一.用甲醛、醋酸酐修饰氨基,溴代乙酸修饰咪唑基也可以使酶活力完全丧失,说明赖氨酸残基及组氨酸残基也是酶活性功能基因.用乙酰丙酮修饰精氨酸残基,酶活力下降了50%,精氨酸残基可能与维系酶分子构象有关. 相似文献
8.
文昌鱼酸性磷酸酯酶色氨酸残基的修饰 总被引:2,自引:1,他引:2
从厦门文昌鱼(Branchiostonia belcheri Gary)分离纯化获得聚丙烯酰胺胶电泳单一蛋白区带的酸性磷酸酯酶(EC3.1,3.2)应用化学修饰方法,荧光以及紫外-可见光谱的变化,探讨Trp残基与酶活力的关系,被NBS修饰的Trp基团仅有一个Trp残基被氧化时,酶活力丧失90%,该Trp残基为ACPase表现活力所必需,而且优先被氧化、从光谱扫描(230~600nm)结果表明,经NBS修饰以后的酶构象发生变化,文昌鱼ACPase的Trp残基和酶分子上的铁离子等基团均为酶活力的必需基团,推测两者可能以配位结合,共同维持酶活力中心的构象。 相似文献
9.
有关中华猕猴桃蛋白酶(Actinidin,EC 3,4,22,14)催化功能基团的研究表明一个游离巯基,一个组氨酸残基为酶催化活性中心必需基团;色氨酸残基为酶活力表现所必需;羧基似与催化活性有关。迄今尚未见到有关赖氨酸残基作用的报道。本文应用TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)修饰动力学方法和光谱分析,进一步探讨了赖氨酸残基与Actinidin催化活性之间的关系。有关酶的分离提纯鉴定及酶活力测定均参照文[4],其它实验条件见图注。 相似文献
10.
修饰剂对青霉菌葡萄糖氧化酶的效应研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了几种修饰剂对青霉菌(Penicillium amagasakiense)葡萄糖氧化酶(GOD,EC 1.1.3.4)活力的影响.结果表明,溴代乙酸、N-溴代丁二酰亚胺(NBS)、乙酰丙酮等对酶的抑制作用较强,随着抑制剂浓度增大,酶活力呈指数下降,酶活力下降50%的抑制浓度分别为40.8,28.5和8.7 mmol/L,认为咪唑基、吲哚基、精氨酸胍基是该酶的活性功能基团,而蛋白质分子中巯基、二硫键、赖氨酸的ε-氨基、丝氨酸残基与酶活力无关.进一步研究了NBS的抑制动力学,结果显示:NBS对酶的抑制作用为非竞争性可逆抑制,抑制常数(KI)为19.2 μmol/L.该研究对青霉菌GOD在生产上的应用具有一定的理论指导意义. 相似文献
11.
徐仲建 《浙江万里学院学报》2002,15(4):90-93
《海牙规则》确立了海运承运人对航海过失造成的货损免责,航海过失可分为驾船过失和管船过失。但承运人对管货过失造成的货损应承担赔偿责任。区分航海过失,尤其是管船过失与管货过失,成为一项极其重要的任务。近百的来,有关于此的争议不同涌现,国际上要求废除航海过失免责的呼声日益高涨,《汉堡规则》虽废除了航海过失免责,但亦未被国际社会所接受。文章探讨了航海过失与管货过失的区分标准,并尝试建立一种新的承运人责任制度。 相似文献
12.
党内关系的和谐状态不仅是衡量党的自身建设成效的重要标准,更是提高党的执政能力建设和永葆党的先进性的内在要求。党内和谐是党群和谐的根本,对党群关系和谐与社会和谐起着重要的示范和带动作用。要以党内和谐促进社会和谐,以优良的党风促政风带民风,必须通过党群关系的良性互动来实现。 相似文献
13.
建设以公众为中心的电子政府 总被引:4,自引:0,他引:4
从我国电子政府的发展现状出发,以上海市各级政府的电子政务为例,对我国各级电子政府建设在迅速发展的同时所呈现出的一些问题及面临的障碍进行分析,并提出以满足公众需求为基点,建设以公众为中心的电子政府,最后提出相应对策与建议,以利真正提高政府的绩效,让公众从中获得真正的收益. 相似文献
14.
陈刚勇 《科技情报开发与经济》2005,15(16):110-112
农民收入问题影响到农民的生活水平,影响到农业生产能力,是“三农”的根本问题。从农民、农村、农业三个角度提出了增加农民收入的对策建议。 相似文献
15.
浅谈语言在馆员与读者沟通中的运用 总被引:4,自引:0,他引:4
张天宇 《科技情报开发与经济》2007,17(11):85-86
阐述了正确运用符号语言与体态语言对改善馆员服务态度、提高馆员服务质量的重要作用。 相似文献
16.
陈晓 《萍乡高等专科学校学报》2010,27(2):74-76
新闻语言是通过新闻媒介,向人们报道新近发生的事实、传播新闻信息的载体之一。它作为媒体传递信息的工具,是一种对社会影响颇大的公共语言行为。时下新闻语言却出现了一系列的问题,已经严重的影响到新闻媒体的自身发展和社会用语的纯净。为了使新闻语言沿着科学、健康的方向发展,本文主要具体阐述了新闻语言弊病的表现形式和原因,希望能给新闻语言的规范提供帮助。 相似文献
17.
白保平 《科技情报开发与经济》2006,16(7):102-104
基于山西能源重化工项目大都为高物耗、高能耗、高污染、低效率的现状,提出了发展循环经济、节约资源、改善环境,开发研究高科技项目,把煤炭工业产业这一重要能源产业发展成资源节约型、环境友好型产业的可持续发展模式。 相似文献
18.
谷留锋 《科技情报开发与经济》2006,16(13):106-108
通过对政府从国有银行退出的艰巨性和国有银行和国有企业之间建立真正债关系的艰巨性的角度,对国家通过注资的方式改造国有商业银行的有效性进行了深入的分析,结果表明:我国国有商业银行的改革决不是简单通过注资就可以一蹴而就的。根据分析的结果提出了对国有商业银行改革的意见和建议。 相似文献
19.
作为二十世纪五六十年代国内最权威的诗歌刊物《,诗刊》无疑代表了当时的文学潮流,并引领着文学的走向。研究自1957年1月到1965年停刊的《诗刊》,可以清晰地把握当时的诗坛动态和文学环境,不失为五六十年代中国文学的一份生动史料。本文着重考察的是《诗刊》如何以对“五四”以来新诗人的重估和对新诗史的重构,完成了新诗在五六十年代的历史叙述。 相似文献
20.
彭代军 《渝西学院学报(自然科学版)》2003,2(4):87-88,93
本文主要论述了智能化电能表及自动抄表系统的组成、特点,以及目前市场上使用的几种主要智能化电能表和自动抄表系统的方式及其发展趋势. 相似文献