人乳头瘤病毒基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变的分布规律及临床意义

为探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变中的分布规律及其与宫颈鳞癌发生发展的关系,应用PCR-反向点杂交技术对109例宫颈病变患者(宫颈鳞癌40例、CIN69例)进行HPV感染基因分型测定.结果显示,109例标本中HPV阳性检出率为100%,最常见HPV基因型为HPV16型;随着病变程度增加HPV单一感染比例逐渐升高,多重感染比例逐渐下降,单一感染以高危型HPV16型感染为主;HPV16型在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC中阳性率分别为30.77%(8/26)、59.09%(13/22)、90.48%(19/21)、90%(36/40),阳性率呈依次上升趋势.宫颈鳞癌及癌前病变与HPV感染直接相关,宫颈癌癌前病变是高、低危HPV共同作用的结果;高危型HPV持续感染是高级别子宫病变及癌变发生的必要条件;HPV16型病毒感染是国人子宫颈鳞癌形成的主要原因.     

德宏州人乳头瘤病毒感染与TCT检测相关性分析

目的:探讨人乳头瘤病毒感染(HPV)与液基薄层细胞学(TCT)检测的相关性。方法:对就诊的1 608例有宫颈疾患的妇女,采用HPV分型检测技术进行人乳头瘤病毒分型检测和TCT检测,以病理学2004年TBS分级系统为判断标准。结果:1 608例做了人乳头瘤病毒检测样本中,阳性645例,阳性率为40.11%;在645例人乳头瘤病毒阳性中有483例同时做了TCT检测,其中ASCUS者118例,高度病变36例,低度病变24例,炎症154例,正常125例,其它病变26例。结论:HPV检测对宫颈病变可进行早期追踪治疗,提高宫颈液基薄层细胞检测的敏感性,早期预防宫颈癌或发现癌前病变。     

子宫颈癌致病因子人乳头瘤病毒的发现——2008年度诺贝尔生理学或医学奖成果简介

瑞典卡罗林斯卡(Karolinska)学院诺贝尔奖评审委员会宣布德国科学家哈拉尔德·楚尔豪森(Harald zur Hausen)因发现人乳头瘤病毒(HPV)导致子宫颈癌,与另外两位法国科学家弗朗索瓦丝·巴尔-西诺西(Franoise Barré-Sinoussi)和吕克·蒙塔尼(Luc Montagnier)共享2008年度的诺贝尔生理学或医学奖。楚尔豪森以科学创新的精神和严格的科学实验向当时盛行的"单纯疱疹二型病毒(HSV-2)是子宫颈癌的致病因子"假说发起挑战,经过10多年的研究,于1983、1984年先后在人子宫颈癌活检标本中检测到HPV16、HPV18的基因序列,并成功克隆了HPV16型、HPV18型基因组,揭示HPV16、HPV18是子宫颈癌发病的重要病因。相继又鉴定了多种型别的HPV,提出了HPV家族具有"异质性"。发现HPV16、18的早期基因E6和E7整合于子宫颈癌宿主细胞的基因组内,提出E6和E7基因是诱发子宫颈癌的关键基因。这些重大发现极大推进了HPV研究领域的发展,也为今日HPV预防性疫苗的问世以及新HPV检测技术的不断发展奠定了科学基础。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染基因型的检测

目的探讨吉林地区尖锐湿疣患者感染人乳头瘤病毒的基因类型和分布.方法收集临床病理学诊断为尖锐湿疣的疣体142例,采用DNA扩增技术检测疣体HPV基因类型.结果在142例标本中,127例(89.3%)基因型为HPV6/11和12例(8.5%)为HPV16/18.结论本地区尖锐湿疣患者感染低危型HPV6和HPV11型为主,少数为高危型HPV16和HPV18型.     

人乳头瘤病毒疫苗的研究策略及最新进展

人乳头瘤病毒（HPV）的持续感染与多种皮肤粘膜肿瘤密切相关，研制有效的病毒疫苗成为研究者的共同目标。本文系统综述了人乳头瘤病毒疫苗在预防和治疗两方面的研究策略以及动物和临床试验的新进展，主要包括旨在预防高危型病毒感染的二价疫苗，临床试验，交叉中和表位的研究，增强治疗性疫苗免疫原性的新尝试以及树突状细胞在病毒感染局部免疫作用中的新发现。     

通辽地区179例妇科门诊患者人乳头瘤病毒感染检测分析

目的：以通辽地区妇科门诊患者为对象,检测其生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染情况.方法：采用HPV21型凯普导流杂交法,对179例妇科就诊患者宫颈标本进行HPV基因分型检测.结果：HPV基因检测总阳性率为17.31%,其中以单一感染率为主,比例为74.19%,多重感染率为25.81%;共检出16种HPV亚型,包括高危型12型,低危型4型,其中以HPV16、31、18三种亚型最多见.结论：通辽地区HPV感染以单一感染为主,又包含一定比例的多重感染,常见感染亚型分布总体符合亚洲人群规律,但又具有独特的地域分布特点.     

人乳头瘤病毒感染的宫颈癌组织的病理形态学观察

应用核酸杂交技术结合组织病理学的光镜和电镜观察、检测８０例子宫颈癌、４２例正常宫颈组织、３３例宫颈非典型增生组织和１０例宫颈尖锐湿疣组织中的ＨＰＶｓ基因组相关序列。结果表明：（１）４２例正常宫颈组织ＤＮＡ无一例检出ＨＰＶ，而在宫颈癌组织、宫颈非典型增生组织和宫颈尖锐湿疣组织中，ＨＰＶ检出率分别达４３．７５％、４５．４５％和８０％；（２）宫颈癌组织中阳性３５例，阳性率为４３．７５％；ＨＰＶ型别分布主要为ＨＰＶ１６型（１８例，５１．４３％）和ＨＰＶＲ型（８例，２２．８６％）；（３）１８例ＨＰＶ１６型和３例ＨＰＶ１１／６型均为鳞癌，８例ＨＰＶＲ型中有６例也为鳞癌。ＨＰＶ１６型的１８例中有１２例为低分化癌，ＨＰＶＲ型的８例中有５例也为低分化癌；（４）不同型别ＨＰＶ感染的宫颈癌组织，其病理形态学特征有所不同。研究表明，广西地区相当部分宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染有关，其感染的宫颈癌组织具有一定的病理形态学特征。     

海口地区人乳头瘤病毒感染的分子流行病学研究

利用PCR扩增和Southen杂交技术,对海口地区人乳头瘤病毒（HPV）型别进行了调查,结果显示,在所抽取的1045份样本中,有436份检出HPV-DNA,总阳性率为41．72％（436／1045）,其中有337份只检出1种型别感染（单侵染）,65份检出2种型别感染（二重侵染）,34份检出3种或3种以上型别感染（三重或三重以上侵染）,分别占感染样本的77．29％,14．91％和7．80％;在单侵染中,高危型所占比例为74．78％（252／337）,不同型别的检出率从高到低分别是HPV16（22．25％）,HPV58（17．89％）,HPV43（16．74％）,HPV52（16．06）和HPV6（8．94％）．其中HPV16,HPV58和HPV43为高危型,其检出率较高,具有一定的区域性．     

成都地区人乳头瘤病毒型别分布研究

应用反向膜杂交技术对1668例标本进行型别鉴定和统计分析.在1668例标本中,共检出阳性标本673例,感染率为40.3%;其中单重感染512例,占阳性标本的76.1%,双重感染96例,占阳性标本的14.3%;单重感染中的高危型感染318例,占阳性标本的47.3%,低危型感染194例,占阳性标本的28.8%.结果表明成都地区HPV感染率较高,且以单一基因型感染为主,其中HPV-16感染率最高,其次是HPV-18,低危型HPV感染以HPV-6和HPV-11为主.     

人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化

人乳头瘤病毒假病毒可广泛应用于中和抗体鉴定和疫苗免疫性评估等研究.本研究对多质粒共转染293FT细胞生产HPV假病毒的方法进行了深入优化,结果显示不同的HPV结构蛋白表达质粒转染比例对于假病毒生产效率有显著的影响,HPV主要结构蛋白L1的表达水平是影响生产效率的主要因素,L2表达质粒的用量过高或过低均不利于假病毒的生产,而报告质粒的用量对假病毒生产效率的影响相对较小.综合比较显示,在该体系中L1和L2表达质粒和报告质粒以合适比例(如1:1/10:1/2)进行共转染可获得更为理想的生产效率.本研究同时也在293FT细胞中对磷酸钙转染方法进行了优化,通过磷酸钙与质粒用量的交叉配比试验获得了较优的转染条件.通过优化,建立了更为高效的HPV假病毒大量制备方法,在HPV16、HPV18、HPV6、HPV11假病毒生产中的应用结果显示较原方法可显著提高生产效率.本研究为HPV假病毒中和实验的规模化应用提供了有利条件.     

宫颈上皮内瘤变锥切术后 高危型人乳头瘤病毒感染消除情况研究

目的研究宫颈锥形切除术治疗宫颈上皮内瘤变(CIN,不包括原位癌)伴高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者术后HPV感染消除情况,探讨影响术后HR-HPV转阴因素及宫颈环行电圈切除术(LEEP术)在治疗CIN的同时治疗HR-HPV感染的疗效.方法采用HCⅡ法检测120例CIN伴HR-HPV阳性患者LEEP锥切术后3,6,9,12个月HR-HPV感染情况,观察术后HR-HPV持续感染及清除率的变化情况,同时评价及分析可能影响术后HR-HPV持续感染的因素.结果术前存在HR-HPV感染的CIN患者宫颈LEEP术治疗后,术后3,6,9,12个月HR-HPV持续感染率为35.83%,34.17%,29.17%及11.67%;HR-HPV的持续感染,术后清除率与术前HRHPV病毒的高负荷量(500 RLU/CO)呈正相关,与患者的病变级别无相关性,术前HR-HPV负荷量500 RLU/CO者术后HPV持续感染率明显高于术前HR-HPV负荷量500 RLU/CO者(P0.05),且术前HR-HPV负荷量500 RLU/CO者术后HPV清除速率明显低于术前HR-HPV负荷量500 RLU/CO者(P0.05).结论 LEEP术是清除伴有CIN改变的HR-HPV感染的有效方法,对HR-HPV病毒负荷量的降低有一定作用.     

高危型人乳头瘤病毒在宫颈病变筛查中的临床价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒（HPV）在宫颈病变筛查中的临床价值。方法利用宫颈液基细胞学（TCT）检测4类宫颈病变病人,包括ASC-US,LSIL,ASC-H和HSIL,运用DNA基因捕获技术（HC2）检测上述4类病人的HPV值,并分析HPV值与各类宫颈病变病人的关系。结果4类宫颈病变病人中,HPV阳性检出率平均为38％,其中HSIL病人中,HPV阳性检出率最高,同时HPV阳性值最高。结论宫颈液基细胞学联合HPV—DNA检测在宫颈癌癌前病变筛查中具有重要的临床应用价值。     

人乳头瘤病毒11型E7 DNA疫苗质粒的构建和鉴定

目的 构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7 DNA疫苗质粒．方法 从尖锐湿疣病变组织中提取DNA制备模板，采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HPV11-E7基因，将E7基因经双酶切后定向克隆到pcDNA3．1( )中，测序鉴定．结果从病变组织中扩增出了全长HPV11-E7基因，并正向插入载体pcDNA3．1( )中，经酶切和测序鉴定无误．结论 HPV11-E7 DNA疫苗质粒构建成功，为今后进行防治尖锐湿疣的动物实验和临床实验奠定了基础．     

人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)广泛感染人类,能够导致宫颈癌等恶性肿瘤的发生,严重危害人类的健康.HPV疫苗能够有效阻止HPV感染及其导致的疾病,世界卫生组织正在实施全球消除宫颈癌的计划.本文结合厦门大学在HPV疫苗研发中取得的研究成果,综述了HPV及其疫苗研究领域的进展,包括HPV的生...     

人16型乳头瘤病毒"假病毒"的制备

利用杆状病毒表达体系,在sf9细胞中表达人16型乳头瘤病毒(Human Papillomavirus type 16, HPV16)的晚期表达蛋白L1,通过超速离心的方法得到HPV16病毒样颗粒(virus like particles, VLPs).VLPs经过DTT和EDTA处理解聚成L1蛋白,将构建好的真核表达载体E6E7-pcDNA3.1 与解聚的L1蛋白混合,透析除去DTT和EDTA并逐渐升高Ca2 的浓度,解聚的L1能够重新聚集成VLPs,其中一部分VLPs包裹了真核表达载体,和天然的人乳头瘤病毒的构成很相似,作者称之为"假病毒".     

液相芯片技术在人乳头瘤病毒检测和分型中的应用

从50例疑似感染人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus, HPV）患者的标本中提取DNA,运用液相芯片技术对提取的DNA进行7种低危型和19种高危型检测,并与反向点杂交检测结果进行比较.50例标本中,液相芯片检出阳性26例,阳性率为52%,其中单一亚型感染20例占40%,多重感染6例占12%,比反向点杂交的多重感染阳性检出率高4%.     

上皮内瘤样病变高危型人乳头状瘤病毒DNA检测研究

目的分析子宫颈癌前病变高危型人乳头状瘤病毒（HPV）DNA检查结果.方法应用第二代杂交捕获试验（HC-2）检测高危型HPVDNA联合细胞学检查,同时进行阴道镜检查,以宫颈活检组织病理为确诊.结果高危型HPVDAN检测CINⅡ、Ⅲ的敏感度92.43%,阳性预测值5.18%,阴性预测值99.87%.宫颈细胞学检查不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）敏感度、阳性预测值及阴性预测值,分别为90.02%、11.59%、99.68%;低度鳞状上皮内病变（LSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是70.21%、11.16%和99.59%;高度鳞状上皮内病变（HSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别为49.01%、31.82%和99.29%.高危型HPVDNA检测联合细胞学检查CINⅡ、Ⅲ的敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是98.89%、5.27%和100%.结论高危型HPVDNA检测在宫颈癌前病变中有很高的敏感度,高危型HPVDNA检测联合细胞学检查,具有较强的敏感度及阴性预测值.     

人乳头瘤病毒16L1抗血清的制备和鉴定

人乳头瘤病毒16型是导致宫颈癌发生的主要因素,其晚期蛋白L1在体内或体外可自组装形成VLP颗粒.作者构建了DNA疫苗载体pDRVI1.0-16L1,大提质粒后免疫BalB/C小鼠制备抗体,并对抗体进行了特异性鉴定,为HPV16L1预防性疫苗的进一步研究和应用奠定了基础.     

液基薄层细胞学技术与HPV检测在宫颈癌筛查中的应用

目的:综述宫颈癌早期诊断方法的新进展.方法:检索近年国内外文献,综合归纳.结果:液基薄层细胞学技术是早期发现宫颈癌的新技术,结合细胞病理诊断系统以及人乳头状瘤病毒检测可有效发现宫颈癌.结论:这些方法的结合是目前提高宫颈癌早期诊断的最佳组合.