人甲状腺组织中bFGFs的定位研究

目的：研究bFGFs在人甲状腺及其肿瘤组织中的组织学定位。方法：采用组织化学方法。结果：bFGFs存在于甲状腺滤泡上皮细胞中,同正常甲状腺相比较,甲状腺癌组织中存在大量bFGFs。结论：在甲状腺肿瘤（特别是恶性肿瘤）的发生、展过程中,bFGFs起重要作用。     

SDS-PAGE法检测人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs条件的选择

目的：探讨SDS－PAGE法检测人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs（basicFibroblastGrowthFactors）的条件。方法：采用SDS-PAGE电泳法检测人甲状腺及其肿瘤组织中的bFGFs．结果：分离胶浓度为12．5％,胶厚为0．5cm,电流强度为30mA,样品量为5－6ul,标准bFGFs上样量为20ul较适全人甲状腺及其肿瘤组织中各种分子量的bFGFs的分离及鉴定。结论：人甲状腺及其肿瘤组织中各种分子量的bFGFs的分离及鉴定与SDS－PAGE电泳时条件的选择密切相关。     

Western-blot方法分析人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs

目的：研究人甲状腺瘤的发生分期ｂＦＧＦｓ（ｂａｓｃ Ｆａｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ）基因异常表达的关系。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ方法对人甲状腺及其肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ进行分析研究。结果：人正常甲状腺组织来源的ｂＦＧＦｓ分子量为１７ＫＤ和１８ＫＤ,而人甲状腺肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ为１４ＫＤ、１７ＫＤ和１８ＫＤ。结论：１４ＫＤｂＦＧＦｓ的出现提示人甲状腺肿瘤的发生和发展可能与ｂＦＧＦｓ的基因异常表达有关。     

金属亲和层析法分离纯化醇脱氢酶

报道了用金属亲和层析法分离纯化酵母细胞中醇脱氢酶(ADH).以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,乙二胺为螯合配基,制备了金属螯合亲和吸附剂.通过溶胀法从酵母细胞中抽提胞内酶,粗抽提液再经过硫酸铵盐析以及亲和柱层析.收得率为16.9%,纯化倍数达11.5.     

单克隆抗体亲和层析法纯化人尿激酶

含抗人尿激酶单克隆抗体的腹水经ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ４Ｂ柱纯化得到ＩｇＧ纯品,分子量为１５０ｋＤ（重链５５ｋＤ,轻链２０ｋＤ）,与ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制成抗人尿激酶单克隆抗－体－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析介质。尿激酶粗品经单抗－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱纯化后,所得尿激酶制品比活为９×１０－４～１．７×１０－３ｍｏｌ／ｓ·ｍｇ－１,纯化倍数为１５～３０倍,酶活性回收率在５０％以上。     

亲和层析法分离牛脾二肽酶

牛脾二肽酶(Dipeptidyl Aminopeptidase Ⅰ,简称DAP-Ⅰ)是一种蛋白酶,它能从多肽链的自由N-末端连续切下二肽,直到遇到精氨酸、赖氨酸或脯氨酸为止,故可用于多肽的结构测定。但是,至今DAP-Ⅰ制剂仍是不均一的并且不能长期保存。 本文报导了用亲和层析法从DAP-Ⅰ中除去其它两个二肽酶——组织羧肽酶C(Cathe-ptic Carboxypeptidase C)和丝氨酰蛋氨酸二肽酶(Ser-Met Dipeptidase)等杂蛋白,并报导了将DAP-Ⅰ制成汞盐,在低温下长期保存的方法。     

比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG

优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明:从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法...     

亲和层析法制备人血浆白蛋白

低温乙醇法FIV沉淀中含有白蛋白96．00±13．52g／kg．15倍生理盐水磷酸缓冲液可溶解其中的87．44％(约83．94±11．119／kg)．通过DEAE Affi-Gel Blue 亲和层析及DEAESepharose FF 离子交换层析两步分离的纯化工艺，可从FIV溶解液中回收白蛋白48．18±1.118／kg FIV，回收率为57．40±1.94％．白蛋白溶液呈淡黄色，澄清透明，纯度为98．28±1．68％，单体含量97．00±2．19％，吸收度为0．028±0．006．白蛋白试制品能耐受57℃50h热稳定性试验．各检测指标显示，通过亲和层析综合阴离子交换层析回收纯化的白蛋白制品各主要生化指标符合质检要求．     

用Blue一Sepharose·CL·6B亲和层析法分离纯化甲鱼和北京鸭LDH＿1、LDH＿5A亚基

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ．６Ｂ亲和层析方法分离纯化的甲鱼ＬＤＨ＿５、甲鱼ＬＤＨ＿１和北京鸭ＬＤＨ＿５，进行比较研究。从分子量、等电点、氨基酸组成、平均摩尔差异百分比及在ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ·６Ｂ层析柱上洗脱特性几方面进行比较，结果表明，两个不同纲的动物（甲鱼和北京鸭）的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基之间的差异大于同一种动物的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基和Ｂ亚基之间的差异，并说明不同纲的动物ＬＤＨ＿５之间具有同源性。     

42例甲状腺肿瘤的免疫组化研究

本文应用免疫组化法对甲状腺肿瘤组织中TG的合成多少及分布特点进行了观察和探讨,另外还选抗癌胚抗原多克隆抗体和抗S—100蛋白抗体作对比观察,计有甲状腺腺瘤23例,乳头状癌12例,滤泡性癌3例,未分化癌3例,及鳞癌1例,共42例。用ABC免疫组化标记法其结果显示:①抗TG多克隆抗体对良、恶性甲状腺肿瘤的标记有明显的差异。②抗CEA多克隆抗体对良、恶性甲状腺肿瘤的标记阳性率较低。前者为8.7％,后者为15.8％。③抗S—100蛋白抗体对良、恶性甲状腺肿瘤的标记阳性率较高于CEA的标记阳性率。分别为30％和42.1％。     

新型亲和技术的研究进展

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术,综述了该技术与其它分离纯化方法相结合产生的新型亲和技术及其应用。     

采用染料亲和层析的方法纯化卵泡刺激素

采用染料亲和层析、QAE离子交换层析等纯化步骤,从绝经期妇女尿促性腺激素(HMG)粗品中分离纯化获得高纯度卵泡刺激素(FSH)产品,其中FSH的生物活性达到268.1IU／mg,卵泡刺激素与黄体生长素(LH)的活性比值达到259,产品超过欧洲药典对高纯度卵泡刺激素的要求。此工艺FSH的活性回收率高达65％,而且分离纯化步骤少,简单易行,适合于大规模生产。     

联苯胺亲和层析纯化尿激酶

利用甲基丙烯酸缩水甘油酯与乙二醇甲基丙烯酸酯经悬浮聚合反应合成亲水性亲和载体骨架,骨架上的不环氧基与氨水反应,继之与丁二酸酐反应,最后与配基联苯胺偶联制备亲和载体,配基密度为５４μｍｏｌ／ｇ湿胶。亲和载体吸附激酶的最佳条件为ＰＨ４．６和２．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ;测定了吸附等温线,算得离常数Ｋｄ为３１６ＩＵ／ｍｌ,了大吸附量ｑｍ为２．３８３×１０＾４Ｕ／ｍＬ湿胶,洗脱条件为含０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ     

补骨脂胰蛋白酶抑制剂的亲和层析分离纯化和部分性质

本文介绍牛胰蛋白酶—对氨基苯砜乙基(ABSE)—Sepharose—4B的制备,及用此亲和吸附剂分离提纯补骨脂胰蛋白酶抑制剂的过程。用该方法对补骨脂胰蛋白酶抑制剂粗提物进行分离,可获得电泳单点纯样品。经SDS—PAGE电泳测定,该抑制剂的分子量为55000。等电聚焦电泳测定其等电点为pⅠ6.6,Chiff试剂染色为阴性。氨基酸组成分析結果表明含12种氨基酸,其中Gly、Glu含量最高。     

锥形床亲和层析过程的场协同分析

为了对亲和层析过程的强化提供理论依据,应用非平衡热力学唯象理论,分析了该过程中温度场、化学势场及重力场等各种场之间的协同关系,以及各自场内不同分量之间的协同关系.得到了亲和层析过程的总熵变表达式,多场协同条件下质量通量和热量通量的唯象表达式以及相应的传质和传热系数.分析结果表明:重力场的存在,维持了体系的非平衡状态、保证了锥形床的稳定操作,避免了柱子堵塞及压密化.上流锥形床亲和层析在多场协同下,其传质、传热以及吸附反应相互影响,过程的最终传递方向将取决于各场之间综合作用的结果.     

反应气相色谱法测定聚醚中的甲氧基含量

本文叙述并讨论了采用改进的Zeisel反应——气相色谱法测定聚醚中的甲氧基含量.实验表明:以磷酸-碘化钾为Zeisel反应试剂,以饱和水的苯溶剂为萃取剂,乙烯基甲基硅橡胶为固定液来分离碘代烷烃,可以获得较宽的检测范围及良好的定量结果.标准偏差<0.5％,本方法还可适用于多种高聚物中C_1～C_4的烷氧基官能团分析.     

棉花不同腺体类型的棉酚高效液相色谱测定及其生物特性表征

运用高效液相(HPLC)方法对新近育成的特殊和普通的无腺体陆地棉及特殊和普通的有腺体陆地棉及海岛棉等多种遗传类型品种材料的棉酚含量进行了比较研究.实验以一反向C18色谱柱为固定相,甲醇 0.5%的醋酸90∶10为流动相,流速为0.8mL·min-1,建立了分离度好、准确而快速的棉酚HPLC测定方法:其最低检测限量3×10-6g/mL-1,精密度(RSD)和准确度(RME)均小于10%,回收率为100.4%～103.2%.分析表明,不同遗传类型品种材料种子的棉酚含量差异极大.通过准确的高效液相分析展示出各种遗传类型尤其是特殊腺体类等珍贵资源.