滇紫草愈伤组织辐照和磁场效应研究初报

本文初步研究了Ｈｅ—Ｎｅ激光和磁场对滇紫草愈伤组织生长及色素形成的影响．结果表明：功率密度０．３７ｍｗ／ｃｍ２的Ｈｅ－Ｎｅ激光处理１ｈ刺激愈伤组织生长，而色素含量在２ｈ和３ｈ处理有较大提高，分别达１５．７％和２７．８％．１０ＫＧＳ场强的磁场处理１５ｍｉｎ对愈伤组织生长和色素形成均有促进，当代和第二代色素含量较高９．５％和２７．５％。色素含量提高的稳定正在进一步观察．     

东北红豆杉培养细胞系的建立（Ⅰ）

东北红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为Ｂ５和ＷＨ。维持愈伤组织正常快速生长的培养基为Ｂ５．２．４－Ｄ对东北红豆杉愈伤组织的诱导和形成起关键作用，其浓度为２ｍｇ／Ｌ。嫩茎作外植本的愈伤组织诱导率高于针叶。添加适当浓度的有机物会促进愈伤组织的生长速度。     

茴香原生质体培养研究

以茴香（ＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍｖｕｌｇａｒｅＬ．）幼苗茎切段在ＭＳ附近２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织，经４～５次继代后形成胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转至ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中培养，形成胚性细胞悬浮系。悬浮细胞在含有１．５％纤维素酶、１％果胶酶、０．５％蜗牛酶的混合酶液中酶解得到大量的原生质体，原生质体用修改的ＫＭ８Ｐ培养基中做液体浅层培养。２天后细胞发生一裂，两个月后形成０．５～１ｍｍ大小的小愈伤组织，转入含琼脂糖的固体培养基中３周后形成２～３ｍｍ的愈伤组织     

花毛茛植株再生途径的离体调控

花毛茛的叶接种子ＭＳ＋２，４－Ｄｌｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡｌ＋６－ＢＡ２的培养基上，３－４周后，形成愈伤组织，将愈伤组织分别转移到ＭＳ＋２，４－Ｄ１－２和ＭＳ＋６－ＢＡ１．５－２．５的培养基上，培养４周左右，从愈伤组织表面通过胚状体发生和不定芽发生两条途径形成植株；而将叶接种于ＭＳ＋６－ＢＡ２＋ＮＡＡ０．２－０．５＋ＬＨ５００的培养基上，则可在叶和叶片的过渡区不经过愈伤组织直接分化出芽并形成植株。     

怀地黄离体培养再生植株及其生长调控

本文对怀地黄愈伤组织的诱导、分化和再生植株的生长调控进行了研究．结果表明：（１）６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ（单位下同）＋ＮＡＡ０．１的组合有利于叶片愈伤组织的形成，２，４－Ｄ２＋ＮＡＡ２的组合有利于根茎愈伤组织的形成；（２）诱导愈伤组织产生再生植株的最佳组合为６－ＢＡ１＋ＮＡＡ０．０１；（３）ＰＰ３３３对再生植株的生长调控具有良好的效应，ＰＰ３３３１处理后，再生植株生长健壮，根系发达，叶色浓绿．     

He－Ne激光对地衣芽孢杆菌的诱变效应

用Ｈｅ－Ｎｅ激光处理碱性蛋白酶产生菌──地衣芽孢杆菌Ｆ－３５２３－３．实验结果表明，照射１０分钟，其正变率最高达１６．８％，经处理后获得变株Ｆ－８０１４发酵的酶活性比出发菌株提高３７％，生物学特性发生多方面变异。     

激光培育珍珠母贝的研究

以合浦珠母贝为材料，采用流水诱导加Ｈｅ－Ｎｅ激光方法处理，激光波长为６３２８Ａ，功率５ＭＷ，作用剂量可以调控，结果促进了贝苗、幼贝快速生长。平均单位水体产苗量为３２．７万只／ｍ＾３，收苗期比对照短１７ｄ￣２０ｄ。下海培苗育贝的成贝率比对照高１６％￣２１％，抗逆性较强。     

光棘豆（Oxytropis leptophylla DC）愈伤组织超低温冰冻保存技术的研究

光棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｉｓｌｅｐｔｏｐｈｙｌｌａＤＣ）愈伤组织超低温冰冻保存研究结果表明：适宜的保护剂是必要的，本试验所用复合保护剂中以１０％二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）＋０．５ｍｏｌ蔗糖效果最佳；两步冰冻法（即以０．５℃／ｍｉｎ的速度由０℃降至－４０℃，停留２ｈ，再投入液氮）能获得较高的存活率；自来水流水冲洗是较好的解冻方法；回温后不洗涤，通过更换培养基逐步稀释保护剂对恢复再生长有利；各环节均采用最佳处理方法，可使冰冻回温后再培养的愈伤组织存活率高达９５％以上；再培养分化出的植株形态及生长状态正常．     

薄荷固定化细胞培养产生薄荷醇

薄荷叶片外植体经诱导形成了颗粒状愈伤组织。愈伤组织转人附加８ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ液体培养基以后，逐步成为小而分散的悬浮状态。将悬浮细胞和小愈伤组织用３％海藻酸酸钠固定，然后培养在附加０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ培养液中。     

不同植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发…

以华黄芪为材料，ＭＳ为基本培养基，设计不同浓度的ＮＡＡ、２，４－Ｄ、６－ＢＡ、ＫＴ等单因子试验和不同比值的细胞分裂素／生长素组合试验，探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应。结果表明：在愈伤组织形成过程中，单因子试验以５．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ、０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ、２０ｍｇ／Ｌ ＫＴ诱导效果较好，诱导频率可达１００％，且生长势好。组合试验比单因子试验能     

激光对金霉链霉菌孢子的诱变效应

研究了Ｈｅ－Ｎｅ激光对金霉素（Ｓ．ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ,简称Ｓａ）孢子的诱变效应。结果表明：小剂量Ｈｅ－Ｎｅ激光对Ｓａ孢子的萌发具有促进作用,大剂量Ｈｅ－Ｎｅ激光的照射对Ｓａ的孢子具有致死作用;激光诱变Ｓａ孢子的正变率最高达到６．６％。并且,通过酯酶及过氧化物酶同工酶谱技术对诱变株进行了初步分析。     

荞麦的组织培养及植株再生

荞麦（Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｏｅｎｃｈ．）无菌苗下胚轴切段在含不同激素配比的ＭＳ培养基上进行愈伤组织诱导,发现在 ２． ０ ｍｇ／Ｌ ２． ４－Ｄ与 １． ５ ｍｇ／Ｌ ６ ＢＡ组合时,可１００％地诱导出愈伤组织。愈伤组织在含 １．５ｍｇ／Ｌ ６ＢＡ和１．５ ｍｇ／Ｌ ２．４－Ｄ的激素条件下继代培养１代后转入含２ｍｇ／Ｌ ６ ＢＡ和１ｍｇ／Ｌ ＫＴ的 ＭＳ培养基上,计有８０％以上可分化出苗。转入０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的 １／２ＭＳ培养基上则可诱导出根。研究建立了荞麦离体诱导高频率再生植株的实验体系。     

雷蒙特红豆草下胚轴愈伤组织原生质体再生植株

雷蒙特红豆草１０ｄ龄无菌苗的焉胚轴切段在附加２，４－Ｄ和ＫＴ各１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，取培养３周后形成的愈伤组织进行酶解可获得大量原生质体。原生质体在修改的ＫＭ８Ｐ液体培养基中培养，第１０ｄ开始分裂，２周后形成小细胞团，４周时发育成大细胞团。第７周将小愈伤组织转于含０．５％琼指糖的固体培养基上，它们可以旺盛生长，成为有根、芽分化的胚性愈伤组织，转于分化培养基上发育成苗的小植株。无根苗     

红豆杉愈伤组织的诱导和培养

研究了不同的基本培养基、不同的激素种类和不同的种植体对红豆杉愈伤组织诱导的影响。实验结果表明,在愈伤组织诱导中,２ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的诱导效果优于２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ,枝段的诱导率高于叶片。Ｂ５和ＨＥ培养基利于愈伤组织的诱导,Ｂ５和６,７－Ｖ培养基利于愈伤组织的生长,其平均生长速率分别为０．９９ｇ／（Ｌ·ｄ）和０．６０ｇ／（Ｌ·ｄ）。     

不同色光、温度、pH对草珊瑚愈伤组织的培养效应

报道了草瑚珊愈伤组织生长和次生代谢物与光、温度、ｐＨ不同的物理因子培养条件的关系。结果表明，暗培养的愈伤组织生长和代谢物含量较高，而蓝光在草珊瑚愈伤组织培养中，表现了蓝光效应，诱导出一个优良的愈伤组织系，其相对增长率和总黄酮月产率分别为７５９％，１．８６８ｇ／Ｌ。最佳培养温度为２６℃恒温，最适愈伤组织生长的培养基ｐＨ值为５．５；而最适愈伤组织代谢次级产物的生产培养基ｐＨ值为６．０。     

苜蓿组织培养体细胞胚发生的细胞学观察

苜蓿无菌苗下胚轴在含２ｍｇ／Ｌ２．４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养其中诱导出愈伤组织，愈伤组织在含有３ｍｇ／ＬＮＡＡ和１．５ｍｇ／ＬＫＴ的ＳＨ培养基中形胚性愈伤组织，并伴随有体细胞胚的发生。     

剑麻组织培养诱导产蛋白酶研究

以剑麻株芽或幼叶为外植体,研究了不同培养基、不同培养温度和光照条件下,剑麻愈伤组织的诱导和生长特性．结果证明,Ｎ６培养基诱导剑麻愈伤组织启动最快;ＭＳ、ＬＳ培养基无论对愈伤组织的诱导还是继代培养都具有良好的效果;Ｂ５培养基不适于剑麻组织培养．剑麻愈伤组织诱导和生长最适宜的温度为（２５±２）℃、光照为１２ｈ．剑麻愈伤组织细胞可诱导产生蛋白酶．     

微弹射击将大麦黄矮病毒外壳蛋白基因转入小麦获可育植株

以小麦品种济南１７７、３８４、４７１的幼胚和济南１７７的胚性愈伤组织为材料，质粒为ｐＰＰＩ２［含大麦黄矮病毒外壳蛋白（ＣＰ）基因和ＧＵＳ（β－葡萄糖苷酸酶）基因］；ｐＰＰＩ５（含ＣＰ基因）＋ｐＥｍｕＧＮ（含ＧＵＳ基因），用高速基因枪轰击钨粉质粒进入幼胚和胚性愈伤组织细胞．ＧＵＳ基因的瞬间表达平均频率幼胚约为４２％，愈伤组织为１８．５％．转化处理后用ＰＣＲ扩增技术检测植株中ＣＰ基因是否存在并稳定遗传．检测结果表明，来源于幼胚的Ｔ０代转化频率为２～９％（１９９３～１９９４年），并获得Ｔ１、Ｔ２和Ｔ３代稳定表达的转化植株．用愈伤组织转化，其转化频率３月龄者为０．４％；２年龄者为零．潮霉素（Ｈｍ）用于对转化幼胚和愈伤组织的筛选，低浓度时不能抑制非转化细胞的生长，高浓度则使细胞受伤害，不能再生正常健壮的植株     

雪兔子叶的组织培养及植株再生

以雪兔子无菌苗的幼叶为外植体,接种到ＭＳ补加ＮＡＡ（１．０－２．０）ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ（０．１－１．０）ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导愈伤组织,其中以ＭＳ＋ＮＡＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的诱导效果最好,经６周培养即可形成大量的黄绿色愈伤组织,诱导率可达１００％,经２－３次继代培养后,将生长发良好的愈伤组织转接到ＭＳ附加６－ＢＡ（０．５－２．０）ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ（０．０５－０．１）ｍｇ／Ｌ、Ｎ     

正交设计法在白三叶组织培养中的应用

以白三叶的叶片为外植体,采用正交设计法,对愈伤组织生长和细胞悬浮培养的培养基进行了优化筛选。实验结果表明,白三叶叶片愈伤组织生长的最佳培养基配方为ＭＢ＋０．５ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／Ｌ甘氨酸＋１００ｍｇ／Ｌ肌醇＋３％蔗糖＋０．７％琼脂;细胞悬浮培养的最佳培养基的配方为ＭＢ＋４ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／