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1.
主要介绍大豆β-淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽提得到粗提物,再经过乙醇沉淀,百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化,纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为35.8%;酶的比活为341u/mg蛋白。分子量为5.3万,等电点为5.2;最适pH5-6,最适温度40—50℃. 相似文献
2.
绿色木霉A10纤维素酶的分离纯化及理化性质研究 总被引:7,自引:0,他引:7
绿色木霉A_(10)纤维素酶A_2的C_1酶和Cx酶被分离纯化。C_1酶的分子量为54,49,44.5kd(三个亚基),最适温度为50℃,最适pH为5.0;Cx酶的分子量为17.5kd,最适温度为55℃,最适pH为4.5。两者均为糖蛋白,富含极性氨基酸,水溶性好。 相似文献
3.
黑曲霉(Aspergillusniger728)的粗酶液,经硫酸铵沉淀,SephadexG-25柱凝胶过滤脱盐,DEAE-Toyopearl离子交换柱层析和SephacryS-100凝胶层析纯化,经PAGE鉴定为一条带SDS凝胶电泳测定分子量为70000.金属离子Fe3+对该酶有一定的抑制作用,该酶的等电点为3.7,最适pH为4,最适温度为60℃.E2801%为15.72,Km值为0.112×10-3m. 相似文献
4.
嗜盐菌碱性淀粉酶特性研究 总被引:4,自引:0,他引:4
碱性嗜盐菌HalobacteriumspH-371产生的淀粉酶经超滤、硫酸铵沉淀和DEAE-纤维素纯化后,SDS-PAGE凝胶电泳为一条带,分子量为27000,等电点3.7,最适反应pH9.0,最适反应温度65℃.NaCl是维持酶活性的必需因子,酶解产物为麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖和麦芽五糖 相似文献
5.
张义明 《贵州工业大学学报(自然科学版)》1994,(6)
本文对绿色乳杆菌(L.Viridescens)B175产生的α-羟基戊二酸脱氢酶用硫酸铵盐析;DEAE—纤维素柱层折;超滤浓缩;苯基琼脂糖凝胶(PhenylSepharose)疏水层析等方法纯化,使酶的纯度提高117倍。通过HPLC和等电聚焦测得该酶的分子量约为66,000,等电点为4.2。酶催化作用的最适pH5.5,最适温度为60℃,对α—酮戊二酸和NADH的Km值分别为0.14×10(-3)M和0.03×10(-3)M。 相似文献
6.
地衣芽孢杆菌A.4041(Bacillus,licheniformisA.4041)耐高温α-淀粉酶,经硫铁沉淀和垂直板制备凝胶电泳纯化,得到三种电泳均一的组分,α-Ⅰ,α-Ⅱ和α-Ⅲ.其相对质量分数分别为14.7%,32.2%和52.9%;等电点为5.2,5.4和5.5;相对分子质量为48000,55000和60000.酶作用于可溶性淀粉的米氏常数分别为4.5mg/mL,3.4mg/mL和2.6mg/mL.最适作用温度皆为90℃;最适pH为6.0~6.5;稳定pH范围皆为4~11.5在温度高于70℃,保温30min条件下,三组分的活力开始下降,但α-Ⅱ和α-Ⅲ在100℃,保温30min时仍分别保持15%和20%的残余活力,表明该酶的热稳定性良好.Ca2+,Mg2+,K+对酶明显激活;Cu2+,Fe3+,Zn2+,Al3+,EDTA、甲醛、戊二醛对酶强烈抑制. 相似文献
7.
淀粉微球一次吸附纯化α-淀粉酶,酶比活提高2.3倍,每克干粉酶活力提高16.5倍,蛋白质最大吸附量高达125mg/mL床体积。pH6.0硫酸铵浓度为20%时,淀粉微球对酶的吸附能力量最强。 相似文献
8.
马铃薯酪氨酸酶的部分纯化及理化性质的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
马铃薯酪氨酸经粗提、丙酮沉淀和酸铵分级后,得到了纯化1.8倍,活力回收42.5%,比活力为49.7U/mg蛋白的部分纯化酶,并对其理化性质进行了研究。结果表明,以多巴为底物,酶的Km为5.7mmol/L,Vm为16.2μmol/L?min,最适PH为8.2,最适温度为40℃,HSO^-3F^-、苯甲酸、叠氮化钠、过氧化氢为其抑制剂,Vc、苯肼等对该酶的半抑制浓度为μmol/L水平。Cu^2+在低浓 相似文献
9.
用改进的Kuby等人方法从大熊猫骨骼肌中纯化了肌酸激酶,并对此酶的某些性质进行了研究。纯化倍数为 35.7;收率17.3%;比活力为 55.3U/mg;等电点为 6.60。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为一条带。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其亚基分子量为42 000,总分子量为 84 000,该酶是由两个相同亚基组成的二聚体。酶对肌酸的Km 为 5.26mmol/L;对ATP的 Km为 0.74mmol/L,酶的最适温度是 30~36℃;酶的最适pH大于8.0。 相似文献
10.
通过DEAE-CelluloseDE-52和DEAE-SePhadexA-50离子交换层析等提纯步骤,对解脂假丝酵母胞外脂肪酶进行了纯化,得到了层析纯样品,比活提高27.4倍,得率11%.该酶反应最适温度为40℃;最适PH为7.5;等电点约在PH4.5~5.0之间;8℃以下存放,酶活力损失较少,30℃以上存放,酶活力有明显损失.金属离子Sr2+,Ba2+,Zn2+和Mg2+对该酶的激活作用为Sr2+>Ba2+>Zn2+>Mg2+.Cu2+和Na+对酶活性有抑制作用.NaN3对保持酶活性有重要作用. 相似文献
11.
诺卡氏菌株胞外β-淀粉酶的分离和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
诺卡氏菌株(Nocaridasp.)82除去菌体的发酵液经硫酸镀沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、SephadexG-200凝胶过滤,得到高纯度的β-淀粉酶。用SDS-PAGE测定酶蛋白分子量为53000,不具亚基;酶反应最适pH和温度分别为7.0和60℃,有较高的热稳定性;Fe2十和Zn2+对酶活力有促进作用,而Hg2+对酶活力有抑制作用。 相似文献
12.
地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶的纯化及酶学性质 总被引:3,自引:0,他引:3
地衣芽孢杆菌(Bacillus licheni formis)AS10106α-乙酰乳酸脱酸酶经硫酸沉淀,聚乙二醇沉淀,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换,Gigapite K-100S柱层及SephadexG-100分子凝胶过滤柱等分离纯化步骤,得到SDS-PAGE电泳纯,α-乙酰乳酸脱羧酶的比活提高了53.5倍。对该酶性质的研究表明,酶单亚基分子量为32Kda,等电点为4.5;该酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH为6.0,对热(40℃以上)敏感。在pH5.0-6.5之间稳定。酶活不需要金属阳离子,Cu^2 、Co^2 强烈抑制酶的活性。摇瓶实验表明,纯化的地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶能明显降低双乙酰的形成并缩短其还原时间。 相似文献
13.
丝瓜果实发育过程中4—CL连接酶的特性研究 总被引:8,自引:0,他引:8
以丝瓜果实为材料,分析了4-香豆酸辅酶A连接酶(4-CL)的理化性质及其在木质素合成和导管分子(TE)分化中作用。发现4-CL存在两种同工酶,经柱层析后,酶I纯化15.68倍,含量为22.63%;酶Ⅱ纯化44.23倍,含量为3.91%。酶I对得豆酸和咖啡酸有较大亲和性,对阿魏酸较小;而酶Ⅱ对香豆酸和咖啡酸有一定亲和性,对阿魏酸亲和性极小。酶I有较好的热稳定性,最适温度为40℃,最适pH8.0。发现 相似文献
14.
牛奶黄嘌呤氧化酶的纯化性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文建立从牛奶中分离纯化黄嘌呤氧化的酶的工艺,该工艺采用正丁醇-硫酸铵分级提取、磷酸钙凝胶吸附、SephadexG-150层析纯化获得纯品。从磷酸钙凝胶上解吸到的XOD粗酶化活性达5.096I.U/mg-pr,提纯340倍,产率达74.3%。每单位粗酶的吸附剂用量以6mg为最佳。纯酶的最大紫外吸收在285nm处,酶活性测定的最适pH在8.60~10.15之间,最适温度在25℃~35℃间。1mol/ 相似文献
15.
甲基营养细菌No1甲胺脱氢酶的纯化和性质研究 总被引:3,自引:1,他引:3
甲基营养细菌Nol甲胺脱氢酶是以色所酸-色氨酰醌为辅基的一种特殊氧化还原酶,粗酶液经纯化后,其比活力和收得率分别为5.1nmol.g^-1和28%。该酶的分子量为67000,等电点为8.3和8.5,组成它的大,小两上亚基的分子量分别为37000和15000。甲胺脱氢酶有较好的耐热性,它能催化包括一级甲胺和二胺在内的底物反应,与甲胺反应的Km值为26.6μmol.L^-1,最适pH为8.0。其酶催化 相似文献
16.
以四种抗旱性不同的水、旱稻幼苗的茎、叶为实验材料,应用DNS法测定β-淀粉酶的活性,比较抗旱性不同品种间β-淀粉酶酶学性质(包括酶的最适温度、热稳定性、抑制剂和激动剂对酶活性的影响以及Km值)的差别.结果表明,所有供试品种β-淀粉酶的最适温度为40℃;不抗旱的83-8和82-1β-淀粉酶的热稳定性强于抗旱的秦爱和78-8-10;EDTA和Cu2+,Zn2+,Mg2+,Pb2+和Hg2+等金属离子是β-淀粉酶的抑制剂,Mn2+,Ba2+,Co2+和Ca2+等金属离子β-淀粉酶的激动剂;旱稻品种β-淀粉酶的Km值大于水稻. 相似文献
17.
黑曲霉单宁酶的纯化及部分性质研究 总被引:7,自引:0,他引:7
黑曲霉在五倍子单宁的诱导下产生单宁酶。通过(NH4)2SO4分形沉淀,DEAE-Sepharose离子交换层析,Sephadex G-150凝胶过滤,从黑曲霉的发酵液和菌丝中纯化得到凝胶电泳均一的单宁酶。酶作用的最适温度为30℃,最适pH值为5.5,在温度10-30℃和pH4-6之间保持稳定,金属离子对单宁酶没有的激活作用,Fe^2+和Mn^2+则对酶有抑制作用。 相似文献
18.
通过简便的两步阴离子交换色谱,从遗传工程菌株大肠杆菌JM105中纯化出哺乳动物的谷胱甘肽S-转移酶5-5(GST5-5),GST5-5以二卤甲烷为底物时的动力学常数,热稳定性和最适pH被测定,并与细菌二氯甲烷脱卤素酶的上述性质进行了比较。 相似文献
19.
报道用甘油作溶剂,提取植物β-淀粉酶的优化提取条件;提取液的保存与纯化以及酶粉剂的制备. 相似文献
20.
本研究对Endomycopsisfibuligera(内孢霉酵母)糖化酶发酵进行培养基的选择,并对产酶时间、接种量、装量和初始pH值诸因素进行探讨,获得最佳产酶条件.该糖化酶以可溶性淀粉为底物,最适pH为5.2,最适温度40℃;在50℃以下较稳定,有较宽的pH稳定范围(pH3.0-7.0);米氏常数Km=12.84mg·ml-1. 相似文献