小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞

利用免疫组化技术和甲苯胺蓝(TB)染色技术,对小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性细胞(5-HT+细胞)、肥大细胞(MC)和5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞(5-HT+MC)进行了研究.结果表明:小鼠胃肠中5-HT+细胞多分布于黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间和固有层内;MC多分布于黏膜层和黏膜下层结缔组织之中;小鼠胃和小肠中分别有49%和47%的MC与免疫组化染色的邻片中5-HT+细胞在位置上相对应,该部分MC为5-HT+MC;小鼠胃和小肠中分别有24%和20%的5-HT+细胞为MC.本文从形态学的角度证明了小鼠胃肠道MC可分泌5-HT,MC是消化道5-HT的来源之一.     

分娩前后小鼠子宫肥大细胞的数量变化

采用甲苯胺蓝染色 (TB)和阿尔新蓝 -番红花红 (AB -S)染色法研究了孕 17d ,18d ,19d ,2 0d和娩后0 .5d ,1d ,2d ,3d时子宫内肥大细胞的数量变化 .结果表明肥大细胞的数目于分娩前剧增、分娩后 (0 .5d)急剧减少、以后 (1～ 3d)又快速回升 ;娩后 0 .5d小鼠子宫肥大细胞数目与分娩前相比差异极其显著 (P <0 .0 1) .提示子宫肥大细胞可能参与了分娩过程以及分娩后子宫内膜的修复 .     

Genome sequence variation analysis of two SARS coronavirus isolates after passage in Vero cell culture

SARS coronavirus is an RNA virus whose replication is error-prone, which provides possibility for escape of host defenses, and even leads to evolution of new viral strains during the passage or the transmission. Lots of variations have been detected among different SARS-CoV strains. And a study on these variations is helpful for development of efficient vaccine. Moreover, the test of nucleic acid characterization and genetic stability of SARS-CoV is important in the research of inactivated vaccine. The whole genome sequences of two SARS coronavirus strains after passage in Vero cell culture were determined and were compared with those of early passages, respectively. Results showed that both SAPS coronavirus strains have high genetic stability, although nearly 10 generations were passed. Four nucleotide variations were observed between the second passage and the llth passage of Sinol strain for identification of SARS inactivated vaccine. Moreover, only one nucleotide was different between the third passage and the 10th passage of Sino3 strain for SARS inactivated vaccine. Therefore, this study suggested it was possible to develop inactivated vaccine against SARS-CoV in the future.     

成年小鼠成纤维细胞体外培养

成年小鼠皮肤成纤维细胞可从尾部取材用组织块培养法进行原代培养,添加血清的M 199(E arle′s)和低糖的DM EM均能较好的满足原代细胞的生长.两种培养液中细胞增殖的速度无明显差异.用0.25%胰蛋白酶消化小鼠尾尖原代培养物,上皮细胞与成纤维细胞有明显的敏感度差别.经控温控时消化传代,可将上皮细胞与成纤维细胞分离纯化.     

小鼠精原干细胞的分离、分选、移植和培养

精原干细胞具有自我增殖和分化为精子的能力。精原干细胞的培养、移植和体外诱导分化等研究将使我们最终阐明精原干细胞的自我更新机制和精子发生机理。经过一年多的研究,我们不仅建立了用含血清培养基对分离的乳鼠睾丸细胞进行差异贴壁分选来富集生殖细胞的简单方法,而且成功地对分选出的精原干细胞进行了近一个月的无血清培养。流式分析结果表明,差异贴壁分选能将精原干细胞富集11倍以上。移植分析表明,分选出的精原干细胞具有在受体鼠的曲精小管中产生克隆的能力和正常生精作用。免疫细胞化学和RT-PCR检测表明,培养的细胞表达精原干细胞标志基因。该研究为体外长期培养小鼠或其它哺乳动物的精原干细胞提供了一个范例,也为利用基因修饰的精原干细胞通过移植产生转基因动物奠定了基础。     

用大孔明胶微载体培养Vero细胞

用自制在孔明胶微载体与实心微载体ＣＴ－３在转瓶中培养Ｖｅｒｏ细胞，在培养后期许多细胞从ＣＴ－３上胶落下来，细胞密度降低，而大孔微载体上的细胞密度一直保护在较高水平（８×１０＾８ｃｅｌｌｓ／Ｌ以上），表明大孔微载体能够延长细胞活性期，用大孔明胶微载全反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞，最大活细胞密度达５．６×１０＾９ｃｅｌｌｓ／Ｌ。     

小鼠胚芽干细胞同种移植治疗慢性肝脏损伤的实验研究

将分离和体外扩增的小鼠胚芽干细胞,用BrdU标记后,经尾静脉同种移植于CCL4制备慢性肝损伤小鼠体内。分别于移植后2w、4w取出肝脏,进行连续冰冻切片,用免疫组织化学和免疫荧光双重染色检测移植细胞在受体小鼠肝内的存活、分布和肝细胞特异性白蛋白的表达;用PAS染色检测移植细胞的糖原代谢;HE染色观察移植动物肝组织的结构变化。探索胚芽干细胞在慢性损伤肝脏中的存活、分化和治疗作用。实验结果表明:胚芽干细胞经静脉移植后可以进入损伤肝脏中,并分化为肝样细胞和肝小叶内的其他细胞,并明显改善损伤肝脏的组织结构,具有较好的治疗作用。     

Nicotinamide-Induced Apoptosis Can Be Enhanced by Melatonin in Mouse Myeloma Cells

Introduction Apoptosis is a genetically controlled cell death process which is indispensable to embryogenesis, organ devel- opment, homeostasis, and pathological processes in the life cycle of living things. Apoptosis is characterized by a series of typic…     

接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响

研究了接种密度对Ｖｅｒｏ细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于１．０×１０＾５ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Ｖｅｒｏ细胞培养过程,适宜的表面接种密度为３×１０＾－４－７×１０＾４ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。     

磁场对哺乳动物脑组织、脑细胞及其超微结构影响的研究

用均匀交变磁场作用于小鼠后，对其进行了脑组织，脑细胞及其超微结构的形态学分析，结果表明，该磁场条件无损伤作用。