治疗肿瘤的新方法—光动力疗法

光动力疗法(PDT)又称光敏疗法、光化学疗法,是现代肿瘤微创或无创治疗的最新技术,1996年被美国FDA批准用于临床,1997年FDA将其列入肿瘤治疗的五类基本方法(手术、放疗、化疗、光动力、生化免疫)之一。此方法对癌细胞有高度选择性和强大杀伤力,对正常机体无毒副作用,不抑制血细胞、免疫系统。近年来针对PDT作用机制和临床应用的研究正日益成为治疗肿瘤(如皮肤癌、肺癌等)疾病的热点研究课题。     

血管内皮生长因子表达及微血管密度与头颈肿瘤发展和转移的关系

研究血管内皮细胞生因子(VBGV)的表达及微血管密度(MVD)与头颈肿瘤发展及转移的关系.应用免疫组织化学S-P法,检测32例头颈恶性肿瘤、20例头颈良性肿瘤、16例头颈部无瘤组织石蜡标本组织中的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达、微血管密度(MVD).头颈恶性肿瘤组织VEGF的表达及MVD明显高于头颈良性肿瘤及头颈无瘤组织(P<0.05),转移组比较非转移组高(P<0.05).此外,在头颈肿瘤的发展及转移中VEGF的表达及MVD具有显著的正相关关系(r=0.398,<0.05).VEGF与头颈肿瘤血管生成有密切关系;VEGF的表达和MVD的增高对头颈肿瘤发展及转移有促进作用,其检测有可能作为头颈肿瘤预后的指标.     

光动力疗法中不同激光条件癌肿杀伤效果的比较

本文报告应用两种不同波长激光为PDT(光动疗法)的激光源,对小鼠移植肿瘤进行杀伤实验。结果表明:在相同光剂量下,HPD—氩离子泵浦的染料激光(波长6300A)对肿瘤杀伤的效果强于HPD—氩离子激光(波长5145A)(P<0.01);同一波长激光在光剂量相同时,采用不同的瞬间功率,对肿瘤杀伤的效果相同(P>0.20)。     

兔肝胆汁中微量元素的含量及刺激兔耳“肝胆穴”对其含量的影响

用电感耦合等离子直读光谱仪测定正常家兔肝胆汁中微量元素含量,结果发现兔肝胆汁中含有23种元素,其中14种元素浓度高于检出下限,大多为金属元素,亦有少量非金属元素。这结果与黑色胆石成分基本一致。在刺激兔耳肝胆穴后,观察到肝胆汁中一些必需金属元素如铜、铁、镁等的含量都有所下降,尤以钠浓度下降明显。以上结果为进一步探讨耳压法预防结石症产生提供了依据。     

二氢卟吩e6光动力学疗法对食管癌Eca—109细胞增殖迁移的影响

研究了二氢卟吩e6(Ce6)介导的光动力学疗法(PDT)对体外食管癌Eca—109细胞增殖迁移的影响.通过MTT法检测了Ce6-PDT对食管癌Eca—109细胞增殖的作用,采用划痕实验探究了Ce6-PDT对Eca—109迁移的影响.结果表明:无光照条件下,低浓度Ce6各组与对照组相比无显著性差异(P>0.05),但Ce6质量浓度为1.0μg/mL时与对照组相比有显著性差异(P<0.05);Ce6-PDT对Eca—109细胞增殖的抑制作用在一定范围内与Ce6浓度、光照剂量、作用时间和孵育时间成正相关(P<0.05);Ce6-PDT对Eca—109细胞迁移能力的影响与未经处理的对照组比较作用不显著.可见Ce6-PDT能有效抑制Eca—109细胞的增殖,但Ce6-PDT对Eca—109迁移的作用不明显.     

莪术醇联合顺铂对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用及对Bcl-2表达的影响

探讨莪术醇联合化疗药物顺铂对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用。构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为4组:即模型对照组、顺铂组、莪术醇组、联合用药组;每组8只,模型对照组予腹腔注射生理盐水(0.1 m L/10 g),顺铂组予2 mg·kg~(-1)顺铂腹腔注射给药,莪术醇组腹腔注射100 mg·kg~(-1),联合用药组腹腔注射顺铂2 mg·kg~(-1)和莪术醇100 mg·kg~(-1)。每3 d ip 1次,连续给药7次。TUNEL法观察其对Hep G2细胞的原位诱导凋亡作用,ELISA法检测其对Bcl-2的影响。与模型对照组比较,顺铂组、莪术醇组、联合用药组平均瘤重、平均瘤体积、Bcl-2蛋白含量均降低,凋亡指数升高(P0.05或P0.01);其中以联合用药组作用最为显著。与顺铂组相比,具有显著性差异(P0.05)。说明莪术醇联合顺铂可抑制人肝癌裸鼠原位移植瘤生长,诱导人肝癌细胞Hep G2凋亡,这可能与下调Bcl-2的表达有关。     

光动力学疗法（PDT）中热疗辅助效果的探索

光动力学疗法(PDT)是一种正在发展中的激光医学技术,它在治疗人体的局部病变,特别是肿瘤方面,有着较为理想的效果.而在光动力治疗的同时,光纤头产生的热量又会对病变组织形成热疗的效果.研究了光纤头放置的位置对热疗辅助效果的影响,并给出了定量计算.     

R—藻红蛋白色基多肽对肿瘤细胞光动力杀伤作用的实验研究

首次用胃酶降解及CM Sephedex C-50柱层析法获得了6种藻红蛋白的色基多肽,并用藻红蛋白及其色基多肽对两种肿瘤细胞作体外激光疗法增敏作用实验,S180小鼠腹水癌细胞株培养后分别用浓度为10,25,50,100ug/mL的藻红蛋白及其色基多肽处理,经波长为488nm的氩离子激光辐照（照射剂量为28．8J/cm2),用MTT法检测,其细胞的生存率最佳效果分别棕达45％及16％,显示出良好的剂量效应,在激光处理藻红蛋白及其色基多肽对HL60人白血病细胞所做的细胞生长曲线图的比较中可看出,色基多肽的激光增敏作用要优于藻红蛋白多聚体。     

组织间和表面光动力治疗恶性肿瘤疗效分析

运用激光-血卟啉光动力效应治疗恶性肿瘤49例,总有效率达87.8％。其中运用组织间照射方法治疗的显效率达100％,完全效应者占 92.3％。应用表面照射方法治疗的显效率为 47. 8％,完全效应者仅占 17.4％。说明不同照光方法直接影响治疗效果。     

肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因启动子P3甲基化的检测及意义

目的：建立检测肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法：培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2)，选取正常肝组织3例；提取基因组DNA，亚硫酸氢钠修饰，巢式聚合酶链反应(nested PCR)加甲基化特异性PCR(MSP)检测IGF-Ⅱ基因启动子P3的甲基化状态，PCR产物经克隆、测序验证。结果：三株肝癌细胞系IGF-Ⅱ基因启动子P3去甲基化，正常肝组织IGF-Ⅱ基因启动子P3甲基化，目的片段无突变，甲基化修饰完全。结论：巢式PCR加甲基化特异性PCR可准确检测IGF-Ⅱ基因启动子P3的甲基化状态。     

碱性成纤维细胞生长因子在乳腺良恶性病变细胞中的分布特征及其微血管密度的关系

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在乳腺癌细胞中的表达特征 ,寻找有助于诊断乳腺癌的生物学标记 .方法 :收集乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌等的手术切除标本各 2 2例 ,常规石蜡包埋切片 (4μm) ,分别做HE染色和用ABC法进行bFGF(1∶2 0 0 )、血管标记抗体CD34(1∶10 0 )免疫组织化学染色 ,参考Weidner和Maeda方法进行微血管密度 (MVD)测定 .结果 :在乳腺腺病和乳腺纤维腺瘤中的肌上皮细胞、导管上皮细胞、血管内皮细胞、血管壁平滑肌细胞和纤维母细胞等均表达bFGF ,其阳性产物主要位于胞浆 ,肌上皮细胞和导管上皮细胞的阳性产物部分见于胞核 ,但乳腺癌细胞的阳性产物主要位于胞膜 ,少数位于胞浆 ;胞核阴性 ,与良性增生性病变形成鲜明的对照 .2 2例乳腺癌bFGF膜阳性者 17例 (占 77 3% ) ,其MVD =90 5 6± 2 3 6 2 .肿瘤直径 4cm(10 /2 2例 )时 ,MVD增高达 93 19± 2 0 75 .乳腺腺病MVD =4 2 0 5± 12 2 6 ,乳腺纤维腺瘤MVD =4 3 14± 18 2 1,与乳腺癌相比有显著差异 (P <0 0 1) .结论 :1)bFGF免疫染色阳性产物在乳腺癌细胞中主要分布在胞膜 ,在良性增生性病变细胞中主要位于胞浆和胞核 .乳腺癌的MVD明显高于良性增生性病变 .2 )质量好的免疫染色、bFGF反应产物的分布特征 ,结合MVD有助于     

Effects of vascular endothelial growth factor on angiogenesis of the endothelial cells isolated from cavernous malformations

Human cerebral cavernous malformation （CM） is a common vascular malformation of the central nervous system. We have investigated the biological characteristics of CM endothelial cells and the cellular and molecular mechanisms of CM angiogenesis to offer new insights into exploring effective measures for treatment of this disease. The endothelial cells were isolated from CM tissue masses dissected during operation and expanded in vitro. Expression of VEGFR-1 and VEGFR-2 was examined with immunocytochemical staining. Proliferation, migration and tube formation of CM endothelial cells were determined using MTT, wounding and transmigration assays, and three-dimensional collagen type I gel respectively. The endothelial cells were successfully isolated from the tissue specimens of 25 CMs dissected without dipolar electrocoagulation. The cells show the general characteristics of the vascular endothelial cells. Expression of VEGFR-1 and VEGFR-2 on the cells is higher than that on the normal cerebral microvascular endothelial cells. After treatment with VEGF, numbers of the proliferated and migrated cells, the maximal distance of cell migration and the length and area of capillary-like structures formed in the three-dimensional collagen gel increase significantly. These results demonstrate that expression of VEGFR-1 and VEGFR-2 on CM endothelial cells is up-regulated. By binding to receptors, VEGF may activate the downstream signaling pathways and promote proliferation, migration and tube formation of CM endothelial cells. VEGF/VEGFR signaling pathways play important regulating roles in CM angiogenesis.     

肿瘤治理新方法的研究现状与未来（Ⅱ）：声动力化学在肿瘤治疗中的应用

详细介绍了声动力化学（SDCT）疗法的发展历史及肿瘤治疗的声动务化学原理,并介绍了肿瘤声动力化学疗法这一领域的最新动态。     

Assessment of alternated cooling and heating treatment by US combined CEUS in the VX2 rabbit liver tumor model

Inoperable liver tumors are often treated by thermal ablation that destroys the tumor in situ and spares the adjacent hepatic tissue.Thermal–physical treatment has many advantages,but treatment by freezing or heating alone has some limitations.By taking the advantages and disadvantages of cryosurgery and thermotherapy into consideration,a new thermal technique that combines cryosurgery and radio frequency ablation has been proposed,thereby overcoming the disadvantages of each treatment strategy and improving therapeutic outcomes.This new approach remains to be systematically studied in the liver;therefore,this study was performed to estimate survival after alternated cooling and heating ablation therapy in a VX2 rabbit liver tumor model.Sixteen days after VX2 carcinoma implantation into the rabbit liver,tumors were treated with alternated cooling and heating ablation therapy.Rabbits were monitored for 6 months after treatment and assessed with ultrasound(US)and computed tomography at 1,7,14,and 30 days posttreatment.Untreated tumor-bearing animals served as the control group.Our results show that alternate freezing and heating ablation therapy resulted in a good recovery of VX2 rabbits.Compared with the control group,treated rabbits lived significantly longer(P\0.05),with 70%of treated animals surviving to 196 days posttreatment without metastasis or recurrence,while none of the controls did so.There was no local recurrence in the treatment group.All rabbits in the control group developed metastasis,while metastasis was only observed in 30% of treated rabbits.These results suggest that alternate cooling and heating ablation therapy can prolong the survival time of rabbits with VX2 liver tumors and is an effective method for tumor therapy.Furthermore,we also showed in this model that contrast enhanced US is a valid follow-up approach to assess treatment effectiveness.     

重组人血管内皮细胞生长因子的表达及活性研究

目的 :用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达人血管内皮生长因子 (VEGF) ,分离纯化并检测其生物学活性 ,以研究其在药学领域潜在的药用价值。方法 :利用PCR技术扩增VEGF基因片段 ,克隆到pQE30表达载体中 ,转化E .coliM15菌株后用IPTG进行诱导表达。经裂解细胞、变性、复性和Ni-NTAagarose金属螯合柱层析等方法纯化得到VEGF。用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)血管生成实验检测VEGF的生物活性。结果 :重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了相对分子质量为 2 0 6 0 0的融合蛋白 ,它以不溶性的包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 30 %左右。经分离纯化融合蛋白SDS -PAGE显示为单一区带。CAM结果表明给药组血管生成数 (2 1 7± 3 1、39 3± 2 8)与对照组 (15 4± 1 9、2 9 2± 4 2 )相比有明显增加 (P <0 0 5 )。结论 :利用原核表达系统得到血管内皮生长因子具有天然VEGF生物学活性 ,为进一步的应用研究奠定了基础。