用响应面分析法优化胞外多糖的发酵工艺

采用响应面分析方法对发酵培养的蔗糖质量分数、接种量和pH等条件进行优化.优选得到较佳的发酵工艺条件:蔗糖4%～5%,pH6 5～8,接种量10%左右.摇瓶发酵胞外多糖的产量22 6g/L,蔗糖转化率45%,产品黏度2 01Pa·s.30L生物反应器放大发酵的实验结果产胶30g/L,产品黏度4 6Pa·s.     

乳酸菌胞外多糖的提取与纯化

对乳酸茼胞外多糖的提取纯化进行了较为深入的研究,分别从保加利亚乳杆菌和嗜热乳链球菌的牛乳培养物中提取胞外多糖并进行了纯化．为进一步研究乳酸菌胞外多糖奠定了基础。     

蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究

从蜜环菌发酵液提取粗多糖,经分离纯化得到多糖-A和多糖-B两个组分,快速纯化系统(FPLC)和电泳法鉴定各自为均一的组分。FPLC法测定A组分的分子量分别为2.0×105,苯酚-硫酸法测得其总糖含量为86.6%,考马斯亮蓝法测其蛋白含量为12.92%,硫酸-咔唑法测其酸性多糖含量为28%,红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β-消去反应初步证明所提取的多糖-A存在O-糖肽键。     

深层发酵香菇水溶性胞外多糖的分离纯化及性质分析

香菇（Lentinusedodes）CL－2深层发酵上清液经乙醇沉淀、除蛋白、透析、DEAE－纤维素（DE－32）和SephadexG－200凝胶柱层析得到纯的水溶性胞外多糖（HEP）．DNS法检测和IR分析证实,HEP为多糖类物质,且在200～400um近紫外区不吸收．经PC、GC、IR和甲基化分析,确定其基本结构是以β－1,4键连接为主链并具有β－1,6键支链的甘露葡聚糖．同时还具有少量的β－1,2和β－1,3键．葡萄糖和甘露糖的摩尔比为1：0．0852．     

海洋细菌1202菌株产胞外多糖的适宜条件

应用响应面法(ResponseSurfaceMethod,RSM)对海洋细菌1202菌株胞外多糖发酵培养基进行优化.结果表明,适宜的发酵培养基组成为:蔗糖4%,酵母膏0.05%,玉米浆1.5%,CaCO30.15%,KH2PO40.08%,MgSO4·7H2O0.05%,FeSO4·7H2O0.01%,NaCl0.1%,pH7.5.在装液量为50mL(500mL三角瓶),接种量5%时,于28℃摇瓶培养7d,胞外多糖的产量可达到8.3mg/mL,转化率为20.75%.     

尖顶羊肚菌菌丝体胞外多糖的分离纯化及结构研究

用乙醇沉淀、Sevag法除蛋白等方法得到羊肚菌菌丝体胞外粗多糖,并进一步通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行分离纯化,得到单一多糖组分MEP3A.经外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法等仪器分析方法确定该多糖组分结构为直链→6)-α-D-Man p-(1→,分子量81.2 kDa,不含蛋白质、多肽和氨基酸.采用MTT法检测表明,该多糖组分可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有免疫调节活性.     

茯苓菌丝体胞外多糖硫酸酯化工艺的研究

在单因素试验的基础上,采用响应面法试验,优化了胞外多糖硫酸酯化的工艺条件．结果表明,优化的硫酸酯化条件为氯磺酸与吡啶摩尔比1：3．85,反应温度73℃,反应时间3．34h．在此条件下,硫酸基团取代度为1．02．     

NF－1菌胞外多糖的制备及其结构初步分析

报道了ＮＦ－１菌胞外多糖的分离纯化工艺，并对其结构做了初步分析。即反复用水溶、乙醇沉淀法得到粗多糖，然后经两根ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ凝胶层析柱分离纯化，所得多糖纯度用蒽酮比色法测定，红外光谱分析表明，该多糖呈β－糖苷键连接．     

植物乳杆菌YW11生产胞外多糖的发酵条件研究

对实验室从西藏灵菇中筛选出的一株植物乳杆菌YW11发酵产胞外多糖的条件进行优化。首先通过单因素实验对发酵条件进行初步优化,然后利用二水平正交试验直观分析确定影响因素的主次顺序。以胞外多糖产量作为响应值,采用3因素3水平的响应面分析法,建立二次多项式回归方程的预测模型,从而确定植物乳杆菌YW11产胞外多糖的最优条件。单因素实验结果表明,发酵时间为18h、碳源为乳糖(质量浓度为15g/L)、氮源为大豆蛋白胨(质量浓度为15g/L)、发酵温度为32℃、接种量为3%、pH值为6.0。直观分析确定影响植物乳杆菌YW11产胞外多糖主要发酵因素为大豆蛋白胨质量浓度、pH值、接种量,响应面法优化其较佳值为:大豆蛋白胨质量浓度为13.50g/L,接种量为2.70%,pH值为6.27。验证实验表明,在优化的发酵条件下得到植物乳杆菌YW11胞外多糖产量为131.26mg/L,与理论预测值(129.915mg/L)相接近。     

应用响应面法优化铆钉菇菌丝体胞外多糖提取工艺

采用响应面法对铆钉菇菌丝体胞外多糖的提取工艺进行优化,以提取液中多糖含量为响应值。结果表明,影响铆钉菇菌丝体胞外多糖提取的主要因素依次为:提取温度、料液比、提取时间;获得的各因素最佳水平为:提取温度6℃,提取时间5 h,料液体积比1∶4.4。在此优化条件下,所得胞外多糖的质量浓度为278.86 mg.L-1,比优化前提高了20.40%。     

壳聚糖固定化云芝漆酶的制备及特性

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂制备固定化漆酶,测定了不同戊二醛浓度、交联时间、给酶量以及固定化时间对固定化漆酶活性的影响。结果表明,固定化反应的最佳条件为戊二醛浓度5%,交联时间8h,给酶量20mg/g载体,固定化时间6h,在此条件下制备的固定化漆酶酶活性保持率为52.2%。此固定化漆酶具有最大活性时的溶液pH值在4.5,相比于自由漆酶的最佳pH值5.0,其向酸性偏移;与自由漆酶相比,固定化酶有很好的稳定性和可重复使用性。     

云芝菌液体发酵培养基的筛选

利用29个培养基配方,进行了云芝菌液体摇瓶发酵试验,考察了发酵菌粉的多糖质量分数和菌粉干质量。结果表明:以菌粉多糖质量分数不低于0.04,菌粉干质量不低于20 g/L为标准,最优培养基配方为黄豆饼粉20 g/L,葡萄糖30 g/L,玉米粉10 g/L,酵母膏5 g/L,Ca CO31.5 g/L,KH2PO41.0 g/L,Mg SO41.5 g/L,p H自然,多糖质量分数为0.049 4;菌体干质量为21.00 g/L。     

海洋微藻裂壶藻发酵液胞外多糖的制备及活性研究

使用乙醇沉淀法从海洋微藻裂壶藻Schizochytrium sp.TIO1101的发酵液中提取胞外多糖,再经732阳离子交换树脂分离得到酸性多糖、弱碱性多糖和碱性多糖三种主要的多糖组分,并分别测定其还原力活性、DPPH自由基清除活性和羟基自由基清除活性等抗氧化活性和抗菌活性.结果表明,弱碱性多糖具有最高的抗氧化活性.抑...     

盐藻多糖提取及初步纯化

对提取β-胡萝卜素后的杜氏盐藻渣中多糖的提取、初步纯化和多糖脱色方法进行了实验研究.实验采用水浸提的方法,考察了提取温度、提取时间、液固比和pH值对盐藻多糖提取率的影响,盐藻多糖的最适提取条件为:提取温度:70℃,提取时间:4 h,液固比:30:1,pH值10,在此条件下,盐藻多糖的提取率为8.63%,多糖含量为65.73%.采用分级醇沉和分步醇沉的方法沉淀多糖,得到醇沉最佳条件为无水乙醇一步醇沉.采用中性蛋白酶水解脱除盐藻多糖提取液中蛋白质,脱除率为61.55%,脱蛋白后多糖含量为70.96%,采用过氧化氢对脱蛋白后多糖提取液脱色,脱色率为78.66%.     

碳、氮源对云芝胞外漆酶分泌的影响

研究了不同碳源、氮源对云芝漆酶分泌的影响。实验表明,淀粉和麸皮是最好的碳源,干酪素和大豆粉是最好的氮源。     

螺旋藻废液中藻多糖的提取与分离纯化

从螺旋藻废液中提取藻多糖 ,经酶和Sevage脱蛋白 ,SephadexG - 2 5凝胶过滤层析除去全部 (NH4) 2 SO4,再经DEAE -SepharoseFastFlow和SephadexG - 10 0凝胶柱层析分离纯化藻多糖 ,得到两个藻多糖组分PSPⅠ、PSPⅡ ;经高效液相色谱法测定PSPⅠ相对分子量为 130 0 0 ;经完全酸水解研究 ,确定PSPⅠ是由D -葡萄糖、D -甘露糖、D -葡萄糖醛酸组成的多糖。     

云芝多糖影响人宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡的研究

研究云芝多糖(CVP)对宫颈癌HeLa细胞系的增殖、凋亡及产生途径。采用MTT法测定了CVP对HeLa细胞增殖的体外抑制作用,流式细胞仪检测凋亡细胞的比例,qRT-PCR检测P53、Bcl-2和Fas基因在细胞处理前后表达量的变化。结果显示：CVP以时间和剂量依赖的方式抑制HeLa细胞的生长。作用时间在24 h,48 h和72 h时对细胞抑制的抑制率分别为92%、95%和98%;当CVP浓度达到1.25 mg/L时,作用24 h、48 h和72 h时的IC50值分别为0.2507±0.01 mg/L、0.2720±0.04 mg/L和0.2736±0.03 mg/L;当CVP浓度为0.5 mg/L时,作用24 h和48 h后细胞凋亡率分别为26.36% 和63.81%;CVP处理HeLa细胞24 h后,Bcl-2基因的表达被显著下调。研究表明：CVP促进HeLa细胞凋亡,其作用机制与Bcl-2基因的表达下调有关,推测是通过Bcl-2介导的途径促进细胞凋亡。图4表1参30     

香菇多糖提取技术的研究

本文综合分析了香菇在各种因素(水、酸、碱、复合酶)的影响下菌多糖的提取率,筛选出较佳的提取工艺,最大限度地保持香菇中所含有的多糖物质对人体的抗肿瘤的保健作用。     

桑叶多糖的分离纯化及其抗凝血活性的研究

为了研究桑叶多糖不同组分在体外的抗凝血活性,采用水提醇沉法提取桑叶粗多糖,聚酰胺进行脱色和脱蛋白。用DEAE sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 对桑叶多糖进行纯化,得到5种水溶性多糖组分(MPS-1、MPS-2a、MPS-2b、MPS-2c和 MPS-3)。单糖检测结果表明：桑叶多糖主要是由半乳糖、葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和甘露糖等组成。体外抗凝血活性检测显示5种桑叶多糖组分均能延长活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶时间(thrombin time,TT)、而对凝血酶原时间(prothrombin time,PT)影响不显著,说明它们是通过影响内源性途径或共同途径而发挥抗凝血作用;与对照相比,MPS-2b在试验浓度范围内对 APTT 和 TT 的效果达到极显著,表明 MPS-2b 有潜力开发成抗凝血活性物质。     

大蒜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究

采用热水浸提法从大蒜中提取大蒜粗多糖（GA），用DEAE一纤维素柱层析对GA进行纯化，得到中性多糖（GB）和酸性多糖（GC）。进一步对3种大蒜多糖的抗氧化性进行测定，结果显示：GB具有较好的清除羟基自由基和还原能力，GC具有较好的清除超氧阴离子自由基和配位能力，而GA的抗氧化能力则介于GB和GC之间。