利用RNAi技术鉴定哈茨木霉聚酮合酶基因pkst-1的功能

哈茨木霉(Trichoderma harzianum)是优良的生物防治真菌,能产生抗生性聚酮化合物(polyketides).目前没有关于催化木霉聚酮化合物合成的聚酮合成酶(polyketide synthase,PKS)的相关编码基因的报道,这限制了对聚酮化合物代谢合成途径的研究.该研究通过融合PCR技术获得哈茨木霉的聚酮合成酶pkst-1基因的编码区序列,成功构建了RNAi介导的pkst-1基因沉默表达载体,使pkst-1基因的表达量在mRNA水平上显著降低.pkst-1基因失活使转化子发酵液产生了类似基因敲除的抑菌效果,降低了哈茨木霉抑菌能力,研究表明pkst-1基因编码催化抗生性聚酮化合物合成的关键酶.此外,RNA干扰技术在研究中的成功应用为哈茨木霉或其它丝状真菌的次级代谢合成途径相关基因的功能鉴定提供新的研究思路.     

黄河三角洲湿地木霉分离与耐盐活性鉴定

木霉菌可以提高植物的抗逆性。为了获得耐盐活性好的木霉菌株,本研究从盐渍化严重的山东东营黄河三角洲湿地中采集土样和水样,分离并筛选了耐盐的木霉菌株,鉴定木霉菌株的耐盐活性。结果表明:黄河三角洲湿地48个样品共分离获得64株木霉,木霉数量与土壤深度呈负相关,与盐度没有明显相关性;通过不同浓度Na Cl胁迫下木霉菌株在固体培养基(PDA)和液体培养基(PDW)中的生长和产孢情况观察,从64株木霉中鉴定出6株具有高耐盐活性的木霉菌株;其中3株木霉(TW-304、TW-327和TW-353)在1 000 mmol/L Na Cl胁迫下,菌丝生长与对照相比,耐盐活性达到50%以上,具有极高的耐盐性;通过形态学和分子学鉴定显示TW-304、TW-327和TW-353三株木霉分别为哈茨木霉、深绿木霉、哈茨木霉。该研究筛选获得的耐盐木霉菌株为耐盐微生物菌剂的开发利用提供新的种质资源。     

哈茨木霉T23和3种土壤有益细菌的相互作用对白菜生长的影响

哈茨木霉T23对白菜生长的影响及叶绿素含量变化的影响不明显,也不能提高白菜硝酸还原酶的活性;3种供试细菌放线菌、光合细菌及乳酸杆菌均能促进植物的生长,提高白菜硝酸还原酶的活性,白菜叶绿素含量明显偏低;哈茨木霉T23与3种供试细菌两两混合使用对白菜的促生效果均比单独使用各供试细菌的效果明显,硝酸还原酶活性明显增加,白菜叶绿素含量明显偏低.哈茨木霉T23和3种供试细菌两两混合使用,4种供试菌的含量均比单独使用时显著增加.     

木霉对核盘菌胁迫下莴笋生理特性及生防效果的影响

为探究哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai)和绿色木霉(Trichoderma viride Pers)对菌核病的防治效果差异及其对作物的生理调节作用，在单因素实验结果的基础上，采用响应面法获得菌株最佳发酵条件.以莴笋(Lactuca sativa L.)品种‘碧玉’为材料，探究核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib) de Bary)处理下，哈茨木霉和绿色木霉对莴笋各项生理指标、病情指数及生防效果的影响.结果表明：2种菌株发酵液均能缓解莴笋菌核病，提高植物抗逆性，在接种9 d时，哈茨木霉组的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均达到最高；核盘菌处理下莴笋叶片丙二醛(MDA)与脯氨酸(Pro)含量最高，施加木霉后明显下降，最大降幅分别为26.91%和31.47%;在处理15 d时，木霉组间的叶绿素荧光参数F_v/F_m(暗适应PSII最大量子产量)差异显著(P<0.05),增幅相差9.00%;哈茨木霉对菌核病的防治效果为64.17%,绿色木霉和多菌灵分...     

哈茨木霉发酵产物对玉米萌发及苗期生长的影响

哈茨木霉是自然界中普遍存在并具有重要经济意义的一种丝状真菌，研究其对植物的生长所起的作用具有重要的应用价值和实际意义．试验应用本实验室自行配制的PDA培养基，采用液体发酵得到的哈茨木霉发酵产物，并用所得发酵产物处理玉米种子，研究木霉发酵产物对玉米萌发和苗期生长所产生的影响．结果表明：在试验的各处理中，除经哈茨木霉发酵产物原液处理的玉米苗的长势低于清水对照外，其它各组经木霉发酵液的稀释液处理的玉米种子的发芽势、生长势及叶绿素含量均较对照组有所增加，其中尤以50倍稀释液效果最好．说明哈茨木霉发酵产物适量浓度对玉米的发芽势、苗期生长、叶绿素含量均有显著的促进效果，显示了木霉在促进植物生长方面的潜能．     

短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对拟茎点霉的拮抗作用

【目的】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对稻瘟病、黄瓜枯萎病及棉花黄萎病等具有显著的防治效果,测定LYMC-3菌株对8种植物病原真菌的抑菌活性,检测其抑菌谱,为其推广应用提供依据。【方法】采用平板对峙法测定LYMC-3菌株对松球壳孢菌(Sphaeropsis sapinea)、松树脂溃疡病菌(Fusarium circinatum)、金黄壳囊孢菌(Cytospora chrysosperma)、拟茎点霉(Phomopsis macrospora)、七叶树壳梭孢菌(Fusicoccum aesculi)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis theae)、山茶炭疽菌(Guignardia camelliae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothiorella)8种植物病原真菌的抑菌活性,筛选出抑菌活性最强的病原真菌,进行菌丝生长和孢子萌发抑制试验。【结果】LYMC-3菌株对8种供试植物病原真菌均有抑制作用,抑菌带长度及抑菌活性大小依次为:拟茎点霉>拟盘多毛孢>葡萄座腔菌>松球壳孢菌>七叶树壳梭孢菌>金黄壳囊孢菌>松树脂溃疡病菌>山茶炭疽菌。LYMC-3菌株发酵滤液对拟茎点霉菌丝生长的抑制率为70.36%,对其分生孢子24 h萌发抑制率为88.16%。【结论】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株抑菌谱广,其发酵滤液对拟茎点霉有较强的拮抗作用。     

哈茨木霉复合种内3个中国新记录种的分离和鉴定

采用THSM选择性培养基,从西藏、山东和云南等地的土壤中分离获得木霉菌株Z19、CX58-4 和CY358-5。通过形态学特征、ITS rDNA和TEF-1α序列对菌株进行鉴定。结果表明,3个菌株属于哈茨木霉(Trichoderma harzianum)复合种,分别是非洲哈茨木霉(T. afroharzianum)、深褐木霉(T. atrobrunneum)和西蒙斯木霉(T. simmonsii),均为木霉属中国新记录种。     

哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用的影响

为探究哈茨木霉对黄瓜幼苗促生长作用的影响,以哈茨木霉菌液灌根处理的黄瓜幼苗为实验材料,以土豆培养基(PD)灌根处理的黄瓜幼苗作为对照材料,采用盆栽土培的方法,利用WinRHIZO根系扫描分析系统以及CIRAS-3型便携式光合作用仪,通过测定黄瓜幼苗的根系指标和光合指标,研究哈茨木霉对黄瓜幼苗促生作用的影响.结果表明:黄瓜幼苗施加哈茨木霉后,植株的总根长、总根表面积、根尖数、分支数、总根体积、交叉数等根系各项指标均明显高于对照组植株;叶片的净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、细胞间隙CO_2浓度(C_i)以及水分利用效率(WUE)等明显提高.研究表明,哈茨木霉能够通过增强黄瓜幼苗的根系生长能力和光合能力来促进植株生长.     

红树林内生真菌的分离及代谢产物生物活性的初步研究

从8种红树林植物中共分离出85株内生真菌,经鉴定发现其主要类群为无孢类群(Mycelia sterilia),短梗霉属Aureobasidium spp.和盘长孢属Gloeosporium spp.,分别占菌株总数的50.6%、18.0%、14.6%。对这85株内生真菌的代谢产物生物活性研究发现:其菌丝和发酵液提取物对试验细菌表现出较好的抗性:对大肠杆菌有抗性的菌株比例分别为22.4%、21.2%、金黄色葡萄球菌为12.9%、14.1%,枯草芽胞杆菌为20.0%、36.5%;其发酵液提取物对酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、白色念珠菌Candida albicans、新月弯孢霉Curvular-ia lunata等试验真菌均有较好的抗性,抗性菌株占菌株总数的比例分别为25.9%,23.5%,28.2%,而菌丝提取物均未表现出抗性;有8株(占菌株总数的9.0%)可产生抑制小麦发芽和芽生长的代谢物,具有除草剂活性;通过本实验建立的全细胞定向筛选模型发现:有14个菌株的代谢产物对耐药性大肠杆菌具有拮抗活性,占菌株总数的16.5%。以上结果表明:红树林内生真菌蕴含丰富的生物活性物质,在新型药物先导物和除草剂的开发方面都表现出潜在的应用前景。     

虎杖内生真菌抗菌活性研究及菌株初步鉴定

利用滤纸片扩散法及形态学常规分类法对30株虎杖内生真菌发酵液进行抑菌活性试验和初步鉴定。结果表明,15株内生真菌对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有抑菌活性,12株内生真菌对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抑菌活性,7株内生真菌对大肠埃希氏菌(Escherichia coli)具有抑菌活性,分别占菌株总数的50%,40%和23%。根据菌落形态及菌丝结构对其鉴定,具有抑菌活性的菌株分属于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、枝孢霉属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)及无孢菌类(Agonomycetales)真菌。