激活乳过氧化物酶体系对牛乳的保鲜

用硫氰酸盐和过碳酸钠为激活剂,对牛乳中乳过氧化物酶体系(Lactopemxidase system,LPS)进行激活,研究了在30℃条件下不同激活浓度对牛乳的pH、乳酸度、细菌总数和大肠茵群的影响.结果表明,牛乳的保鲜期与添加激活剂的浓度有关,添加中(硫氰酸钠/过碳酸钠=70:150mg/L)、高(硫氰酸钠/过碳酸钠=140:300 mg/L)浓度激活荆对牛乳的保鲜效果优于低(硫氰酸钠/过碳酸钠=14:30 mg/L)浓度激活剂的处理组.添加低浓度激活剂可使牛奶新鲜度保持12h,而中、高浓度激活剂可使牛奶新鲜度最少保持15h.     

蛋白酶对脂肪酶活性影响的研究

为了弄清洗涤剂中碱性蛋白酶及金属离子对碱性脂肪酶稳定性的问题，对加酶洗涤剂中的碱性蛋白酶及金属离子对圆弧青霉ＰＧ３７所产碱性脂肪酶的活力影响进行了研究。在碱性脂肪酶溶液中分别添加不同量的碱性蛋白酶和金属离子，并在２５℃保温３０ｍｉｎ，分别测定保温前后的脂肪酶活力。结果表明：在一定浓度范围内的蛋白酶对ＰＧ３７碱性脂肪酶活力的影响较小，可同时应用于洗涤剂中；金属离子对脂肪酶活力无明显影响，甚至在一定浓度范围内对酶活有激活作用。总之，ＰＧ３７菌株所产碱性脂肪酶具有良好的酶学特性，非常适合于洗涤剂用酶。     

脂肪酶催化制备丁酸乙酯的研究

利用脂肪酶BSL2作为催化剂,在有机介质中催化合成丁酸乙酯.考察了反应温度、底物浓度、底物摩尔比、反应介质和初始水活度等反应条件对酶促合成丁酸乙酯的影响.试验结果表明:以正己烷为溶剂,初始水活度为0.33,加酶量为100 mg,丁酸浓度为40 mM,底物摩尔比(丁酸/乙醇)为1∶1.5,在40℃条件下振荡反应30 h,合成丁酸乙酯的的转化率可达到94.8%.     

Ca^2＋激活猪凝血酶原作用的初步研究

为探讨Ca2+激活猪凝血酶原的最适工作浓度和激活时间,以新鲜猪血为材料,采用HAc等电点沉淀法获取凝血酶原后,添加0.25mol/LCaCl2作为凝血酶原激活剂,使Ca2+达到不同终浓度,并经过不同激活时间进行对比试验.结果显示以Ca2+单一因子激活猪凝血酶原的最适CaCl2终浓度为0.05mol/L;最适激活时间为1.5h.使Ca2+激活猪凝血酶原的实验条件得以确立.     

Ca~(2 )激活猪凝血酶原作用的初步研究

为探讨Ca2 激活猪凝血酶原的最适工作浓度和激活时间 ,以新鲜猪血为材料 ,采用HAc等电点沉淀法获取凝血酶原后 ,添加 0 .2 5mol/LCaCl2 作为凝血酶原激活剂 ,使Ca2 达到不同终浓度 ,并经过不同激活时间进行对比试验。结果显示以Ca2 单一因子激活猪凝血酶原的最适CaCl2终浓度为 0 .0 5mol/L ;最适激活时间为 1.5h。使Ca2 激活猪凝血酶原的实验条件得以确立。     

洗涤剂用碱性脂肪酶稳定剂研究

青霉脂肪酶在一定浓度的钙离子存在下,显示出高的活性,当钙离子浓度为2×10-2M时,酶的相对活性达180%.乙酸钠和多羟基化合物可以作为洗涤剂的稳定剂,其中多羟基高分子化合物对青霉脂肪酶有优良的稳定和激活效果.     

有机相中大孔吸附树脂固定化酶催化拆分消旋萘普生

考察了大孔吸附树脂对柱状假丝酵母脂肪酶（CCL）的固定化效果,实验证明了大孔吸附树脂HZ-841作为固定化载体可以为酶营造一个良好的微环境,对水分具有较强的缓冲能力,当固定化酶的含水量8%时催化效率最高,醇既是底物又是竞争性抑制剂,它的浓度对反应具有较大的影响,在萘普生浓度为20mmol/L时正辛醇最适浓度为40mmol/L。选择弱极性大孔吸附树脂HZ-841固定化酶在填充床反应器中进行循环反应。20h左右转化率超过40%,反应3批反酶活仍保持在98%以上。     

南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探

将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA(含pAOX1启动子)和pGAPZαA(含pGAP启动子)中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96h后,CLAB活力达到11.1U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2U/mL,蛋白质量浓度为1.36mg/mL.体积分数12%SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5~9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5%.5mmol/LMg2+、Ni+、Co2+和体积分数0.10%SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2+强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05%TritonX-100对CALB稍有激活作用.     

石油污染地下水中苯降解菌的代谢特征

从东北某油区石油污染的地下水中分离、 纯化出苯降解优势菌B6, 研究其降解效率和代谢特征. 结果表明： 当模拟石油污染地下水中苯的质量浓度
为394.36 mg/L时, 3 d后的降解率为82.82%; 相关酶活及代谢产物在双加氧酶的作用下, B6菌降解苯的途径为儿茶酚正位裂解; B6菌在代谢过程中产生色氨酸酶、 脂肪酶、 淀粉酶、 明胶酶、 乳糖酶和氧化酶等, 葡萄糖、 乳糖、 蛋白质、 色氨酸、 脂肪、 淀粉、 明胶、 多肽、 纤维素、 含硫有机物和细胞色素C等为其营养物质, 以亚硝酸盐和硝酸盐为电子受体; B6菌为革兰氏阳性红平红球菌.     

陆梁水驱油藏内源微生物激活配方优化及性能

针对陆梁油田陆9井区边底水油藏特性,运用聚合物驱等方法提高采收率在该油藏中受限;采用最大可能数法(MPN)分析油藏产出液中微生物四类菌浓度及分析了油藏地层水的离子组成;确定了激活内源微生物的激活思路。确定以菌浓、原油乳化效果和界面张力作为优化激活剂配方评价的依据;并以物理模拟实验为指导,通过调整激活剂中蔗糖、钠盐的浓度,比较激活剂是否注气两种方式;优化了激活剂配比,进行了激活效果评价实验。结果表明,对于陆梁油田陆9井区油藏,在一定范围内,提高激活剂中蔗糖、钠盐的含量,注入空气,可以有效提高微生物驱采收率;其中激活剂体系优化选择质量分数0. 55%的蔗糖、质量分数0. 6%钠盐,可提高驱油效率6. 45%,能较好满足生产效益,为陆梁油田陆9井区开展内源微生物驱提供了可靠的室内实验依据。     

紫外-荧光分光光度法联用测定熊果酸对胰脂肪酶的抑制作用

在pH 8.0的Tris-HCl缓冲体系中,应用紫外-荧光分光度法作为研究手段,结合酶抑制动力学,研究了熊果酸对胰脂肪酶的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,并探讨了熊果酸对胰脂肪酶表面疏水性的影响。结果表明,熊果酸是一种的竞争型胰脂肪酶抑制剂(半抑制率IC50为1.87±0.05 mg/mL,抑制常数Ki为0.68±0.03 mg/mL),且失活动力学时间进程能够证明熊果酸能很快的与胰脂肪酶发生作用并迅速的降低酶的活性;荧光光谱分析显示木犀草素能显著增强酪氨酸酶的表面疏水性,使胰脂肪酶活性位点的内部疏水性区域暴露出来,诱发了胰脂肪酶的解折叠,最终导致胰脂肪酶活性的降低。     

Structure of the pancreatic lipase-procolipase complex.

Interfacial adsorption of pancreatic lipase is strongly dependent on the physical chemical properties of the lipid surface. These properties are affected by amphiphiles such as phospholipids and bile salts. In the presence of such amphiphiles, lipase binding to the interface requires a protein cofactor, colipase. We obtained crystals of the pancreatic lipase-procolipase complex and solved the structure at 3.04 A resolution. Here we describe the structure of procolipase, which essentially consists of three 'fingers' and is topologically comparable to snake toxins. The tips of the fingers contain most of the hydrophobic amino acids and presumably form the interfacial binding site. Lipase binding occurs at the opposite side to this site and involves polar interactions. Determination of the three-dimensional structure of pancreatic lipase has revealed the presence of two domains: an amino-terminal domain, at residues 1-336 containing the active site and a carboxy-terminal domain at residues 337-449 (ref. 6). Procolipase binds exclusively to the C-terminal domain of lipase. No conformational change in the lipase molecule is induced by the binding of procolipase.     

有机相中脂肪酶催化拆分环氧丙醇的研究

用正交实验方法筛选出有机相中酶促拆分环氧丙醇反应的最适酶源为猪胰脂肪酶(PPL ) .考察溶剂、酰基供体和加酶量对反应的影响 ,确定有机相中酶促拆分环氧丙醇的最适反应条件     

凝结芽胞杆菌产碱性脂肪酶的条件研究

本文对分离获得的产碱性脂肪酶的5株菌进行复筛,对产酶量大的一株菌F12进行鉴定,确定该菌株为凝结芽胞杆菌(BacillusCoagulans)。此菌产碱性脂肪酶的最适条件是:黄豆饼粉2.5,玉米浆1.5,可溶性淀粉0.5,K2HP40.5,NaNO30.5,起始pH9.0,培养温度28～30℃,培养周期22～26h。     

大黄鱼消化系统的组织学和组织化学研究

为探讨大黄鱼消化系统的结构与功能,用组织学和组织化学方法对各主要消化器官进行了研究.胃前段粘膜上皮由柱状细胞和粘液细胞组成;胃中后段粘膜上皮仅有柱状细胞,固有层含有发达的胃腺,胃腺上皮由Ⅰ型和Ⅱ型细胞构成.幽门盲囊与肠粘膜形成发达的皱襞和绒毛,粘膜上皮由柱状细胞和粘液细胞组成.胰腺为弥散性腺体.胃中后段粘膜柱状细胞呈现脂酶和非特异性酯酶活性;胃前段粘膜粘液细胞及胃腺Ⅰ型细胞分泌中性和酸性混合粘液,胃腺Ⅱ型细胞呈现强蛋白酶活性.幽门盲囊与肠粘膜粘液细胞分泌酸性粘液,柱状细胞呈现蛋白酶、脂酶和非特异性酯酶活性,其游离端质膜和胞质还分别具有碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性.肝细胞和胰腺细胞呈现非特异性酯酶和弱蛋白酶活性,肝细胞还贮存糖原.     

A model for interfacial activation in lipases from the structure of a fungal lipase-inhibitor complex

Lipases are hydrolytic enzymes which break down triacylglycerides into free fatty acids and glycerols. They have been classified as serine hydrolases owing to their inhibition by diethyl p-nitrophenyl phosphate. Lipase activity is greatly increased at the lipid-water interface, a phenomenon known as interfacial activation. X-ray analysis has revealed the atomic structures of two triacylglycerol lipases, unrelated in sequence: the human pancreatic lipase (hPL)4, and an enzyme isolated from the fungus Rhizomucor (formerly Mucor) miehei (RmL). In both enzymes the active centres contain structurally analogous Asp-His-Ser triads (characteristic of serine proteinases), which are buried completely beneath a short helical segment, or 'lid'. Here we present the crystal structure (at 3 A resolution) of a complex of R. miehei lipase with n-hexylphosphonate ethyl ester in which the enzyme's active site is exposed by the movement of the helical lid. This movement also increases the nonpolarity of the surface surrounding the catalytic site. We propose that the structure of the enzyme in this complex is equivalent to the activated state generated by the oil-water interface.     

活性炭吸附法固定猪胰脂酶的初步研究

初步研究了以活性炭为载体的猪胰脂酶吸附固定，吸附pH和吸附量对吸附固定有重要影响，吸附的最适pH在8左右，酶的比活随吸附量的增加而减小，同时固定化酶有比自由酶更好的热稳定性。     

双液相反应体系中脂肪酶催化拆分缩水甘油酯

利用脂肪酶作为催化剂在双液相反应体系中对外消旋缩水甘油酯进行立体选择性的酯水解反应. 考察了影响该拆分反应的因素， 确定了最适酶源为猪胰脂肪酶； 最适底物为缩水甘油丁酯； 其它最适反应条件： pH为7.6； 温度为27 ℃； 反应时间为4 h. 在最适 条件下， 当酶促拆分反应的转化率为60.6%时， 缩水甘油丁酯的光学纯度可以达到93.3%以 上.     

脂肪酶干燥方法对环十五内酯合成的影响

研究了冷冻干燥法,真空干燥法,N2吹干法3种干燥方法对Candida.sp.GXU08所产脂肪酶活力的影响,以3种方法制得的酶为催化剂进行了15-羟基十五烷酸甲酯环化反应.结果表明,冷冻干燥的酶粉酶活保留率最高,有78.74%,转化率为1.367%;真空干燥酶活保留率有75%,转化率为1.158%;N2吹干法的酶活保留率最低为63.9%,转化率仅有0.405%.