弓形体引起的奶山羊流产

用10、100或1,000枚刚第弓形体GT—1株的侵袭性卵囊经口接种于15只血清学阴性的怀孕山羊。其中4只接种10枚;6只100枚;5只1,000枚。另以6只怀孕山羊不接种,作为对照。在接种后4—12天之间,接种过的母羊全都出现发热(40—41℃)和呼吸困难。妊娠早期(68和70天)用100枚卵囊接种的两只山羊,子宫增大,当接种后86和88天宰杀时,见有胎膜但未发现胎儿。3只山羊在接种后9、10、和11天流产或羔羊产下死亡,其余10只产下感染弓形体的羔羊,内有8只至少有1只羔羊产下即死亡;2只山羊被感染但羔羊产下时正常。     

Wistar大鼠超数排卵及胚胎移植

不同剂量激素对Wistar雌鼠超数排卵,并与正常雄鼠交配,收集2-细胞胚胎进行输卵管移植,收集8-细胞胚胎进行子宫移植,结果发现每只Wistar雌鼠间隔48h分别腹腔注射50IU的PMSG与hCG,Wistar大鼠的超数排卵效果最好,平均可获得2-细胞胚胎36.3±15.8枚,输卵管移植后产仔率为73.33%,平均可获得8-细胞22.6±13.1枚,子宫移植产仔率为75.00%.     

小鼠胚胎移植技术优化及对巨细胞病毒净化研究

目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44.5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40.64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43.75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。     

小鼠早期胚胎不同移植方法的建立

目的建立小鼠胚胎移植技术,探索小鼠胚胎输卵管伞部移植、输卵管剪口移植和子宫移植技术要点,为进一步将该项技术应用到生物净化等领域提供参考数据。方法对4周龄C57BL/6雌性小鼠采用腹腔注射7.5 IUPMSG(孕马血清促性腺激素),48 h后腹腔注射7.5 IU HCG(人绒毛膜促性腺激素)进行超数排卵处理,并与C57BL/6雄鼠合笼,分别在见栓0.5 d、1.5 d和3.5 d取出相应胚胎,对所得胚胎进行筛选,将质量较好的胚胎选出,并将相应胚胎阶段(单细胞、2细胞、囊胚)移入同期发情并经KM结扎雄鼠交配刺激后见栓的KM假孕小鼠输卵管或子宫内,待妊娠生产后得到移植小鼠。结果对88只4周龄雌性C57BL/6小鼠进行超数排卵处理,见栓62只,共取得单细胞胚胎510枚、2细胞期胚胎400枚、囊胚35枚,采用输卵管伞部移植、输卵管剪口和子宫移植,共移植假孕母鼠43只,妊娠生产39只,产仔361只。结论输卵管伞部移植与输卵管剪口移植比较无显著差异,输卵管伞部移植对动物伤害较小,但对术者要求较高;输卵管剪口移植操作较快捷,但对动物损伤较大;子宫移植的妊娠效果最好,处于这一阶段的胚胎极易着床。     

大熊猫（Ailuropoda melanoleuca）的繁殖研究

通过对最大的大熊猫圈养种群———中国保护大熊猫研究中心的圈养种群的研究 ,总结了圈养大熊猫的繁殖生物学特性 .中国保护大熊猫研究中心的繁殖场现圈养了大熊猫 4 2只 ,雄性 18只 ,雌性 2 4只 .0～ 1岁的 11只 ,2～ 4岁的 12只 ,5～ 10岁的 8只 ,11～ 15岁的 7只 ,16岁以上的 4只 .育龄雌性大熊猫 11只 ,有生育史的 9只 ,育龄雄性大熊猫 6只 ,4只能进行自然交配 ,2只可供采精 .从 1986～ 2 0 0 0年 ,共繁殖大熊猫 3 3胎 ,5 0仔 ,存活 1岁以上的3 6只 ,存活率为 72 %,其中单胎 17胎 ( 5 1 5 %) ,双胞胎 15胎 ( 4 5 5 %) ,三胞胎 1胎 ( 3 %) .大熊猫是季节性繁殖的动物 ,每年春季 3～ 4月发情交配 ,8月 ( 3 0 49%)和 9月 ( 4 8 88%)产仔 ,每胎平均产仔 1 5只 ,圈养繁殖大熊猫的雌雄比为 1 1∶1.大熊猫的妊娠期和幼仔的初生体重变化很大 ,妊娠期平均是 13 7 4± 19 3d ,初生幼兽的体重平均为14 2 6± 3 9 4g(N =13 ) ,最轻的只有 5 3 5g ,最重的 2 16g .即使是同一双胞胎 ,两仔的体重也有很大差异 ,1999年 8月2日大熊猫白雪产一双胞胎 ,两仔的体重分别为 5 3 5g和 15 0g ,相差近 3倍 .性成熟的年龄 ,雌性是 5 7± 1 1岁 ,雄性是 5 8± 0 5 8岁 .     

人原发性肝癌中p16,p15基因CpG岛甲基化研究

目的　检测人原发性肝癌中 p16和 p15基因 5’启动子区CpG岛的异常甲基化 ,并分析其与人原发性肝癌发生发展的关系 ,探索其在临床早期基因诊断和治疗中的意义 .方法　用敏感的甲基化特异性PCR检测 2 0例人原发性肝癌患者癌组织、癌旁组织和远癌正常组织中p16 ,p15基因5’CpG岛的甲基化状况 ,统计分析这两个基因 5’CpG岛甲基化与肝癌病理特征的相关性 .结果　2 0例原发性肝癌肝癌组织中 p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 6 5 %(13/2 0 )和 5 0 %(10 /2 0 )异常甲基化 ;癌旁组织中 p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 6 0 %(12例 )和 4 0 %(8例 )异常甲基化 ;远癌正常组织中p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 35 %(7例 )和 2 5 %(5例 )异常甲基化 .p16 ,p15基因 5’CpG岛甲基化在癌组织和癌组织旁、癌组织和远癌组织中均有相关性 .两个基因 5’CpG岛异常甲基化与临床病理特征无显著相关性 .结论　p16和 p15基因 5’CpG岛异常甲基化在人原发性肝癌中频率很高 ,可能在肝癌发生发展中扮演了重要角色 ;而...     

胎肝Sca-1+细胞移植造血重建

目的:观察胚胎肝Sca-1+细胞能否重建造血。方法:免疫磁珠法分离孕14 5dC57BL/6J小鼠的雄性胚胎肝的Sac-1+细胞,经尾静脉注射(细胞数为2 0×103/只)移植到致死剂量(10 0Gy)放射线照射的8～10周C57BL/6J雌性小鼠;sry基因PCR方法检测受体小鼠外周血中供体来源的血细胞。结果:移植胚胎肝Sca-1+细胞的实验组小鼠外周血各种血细胞数在5d后开始下降,在10d后开始上升,20d恢复至正常,均存活6个月以上;而未移植Sca-1+造血干细胞的对照组小鼠20d内全部死亡。多聚酶链式反应(PCR)显示实验组小鼠外周血细胞sry基因检测阳性,未移植对照组小鼠外周血细胞sry基因检测均为阴性;随着移植时间的延长,移植小鼠外周血细胞sry基因的PCR扩增物量增加,说明雄性胚胎供体来源的细胞在增加,反映造血重建情况。结论:胚胎肝Sca-1+细胞能重建致死剂量放射线照射的小鼠造血功能。     

Lats基因敲除小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究

用冷冻麦管、细胞冷冻管分别采用一步法和二步法对Lats基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻 ,胚胎解冻后 ,囊胚发育率分别为 90 %、90 1%、89 2 %和 91 4 % ;移植后着床率分别为 :5 0 0 %、4 7 1%、4 3 4 %和 4 6 5 % ,差异不显著 ;并且与对照组相比差异也不显著。因此 ,玻璃化冷冻可以作为Lats鼠保种方法之一     

昆明小鼠胚胎输卵管移植技术研究

目的通过研究不同输卵管胚胎移植方法、不同细胞类型及适宜胚胎的数量对移植后妊娠率和产仔率的影响,旨在提高小鼠胚胎移植效率。方法分别将1-细胞、2-细胞和8-细胞胚胎、移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管,选择最适宜的胚胎类型用以研究最合理的胚胎移植数量,以及比较输卵管伞移植和膨大部移植两种方法的优劣。结果2-细胞胚胎移植后的妊娠率显著高于1-细胞和8-细胞处理组（66.67%vs25%,33.33%,P〈0.05）;每只小鼠输卵管移植25个2-细胞胚胎后的产仔率显著高于15个和35个两处理组（36%vs16.67%,10.71%,P〈0.05）;采用输卵管壁切口移植的妊娠率和产仔率显著高于输卵管伞移植（50%vs75%,38.9%vs49.3%,P〈0.05）。结论采用25枚左右的2-细胞期胚胎通过输卵管壁切口移植的方法可以取得较高的输卵管移植成功率。     

青皮和陈皮对大鼠小肠纵行肌条运动的影响

把大鼠离体小肠纵行肌条安置在灌流肌槽中 ,记录肌条自发收缩活动的变化 ,比较青皮和陈皮对各肌条运动的影响并初步探讨青皮的作用机制 .青皮 (p H 5 .0 )和陈皮 (p H 5 .8)均明显减小各肌条的收缩波平均振幅 ,且青皮的作用比陈皮强 .中性青皮减小各肌条的收缩波平均振幅 ,但中性陈皮只减小十二指肠肌条的收缩波平均振幅 .酚妥拉明可部分阻断青皮 (p H7.4 )对回肠纵行肌条的抑制作用 (由加酚妥拉明之前的 - 6 7.3%± 5 .5 %减小为 - 4 4 .0 %± 3.2 % ,p <0 .0 0 5 ) ,六烃季胺、心得安、消炎痛、L- NNA不影响青皮的作用 .结果表明 :青皮和陈皮同为柑橘的果皮 ,但青皮对大鼠小肠纵行肌条的抑制作用比陈皮强 .青皮对回肠纵行肌条的抑制效应可能部分经由肾上腺素能α受体介导 ,对其他部位肌条的抑制作用机理有待于进一步研究     

布地奈德联合孟鲁司特对哮喘患者肺功能及免疫功能的影响分析

目的探讨布地奈德联合孟鲁司特对哮喘患者进行干预后患者肺功能及免疫功能的变化.方法将80例哮喘患者分为观察组和对照组,对照组采用布地奈德雾化吸入,观察组在对照组基础上服用孟鲁司特片;在治疗前及治疗结束2周后观察患者肺功能、血清IL-4及INF-γ、外周血Ig E和嗜酸性粒细胞(EOS)水平.结果治疗后两组患者FEV1,FEV1/FVC及PEF均显著升高(P0.05),且观察组升高水平显著高于对照组(P0.05);治疗后患者血清中IL-4水平显著降低(P0.05),INF-γ显著升高(P0.05),且观察组患者IL-4降低水平及INF-γ升高水平均显著高于对照组(P0.05);治疗后两组患者外周血Ig E及EOS水平均显著降低(P0.05),且观察组患者降低水平显著高于对照组(P0.05).结论应用布地奈德联合孟鲁司特对哮喘患者进行治疗,可有效改善患者肺功能及免疫功能,提高临床疗效.     

异育银鲫对糖利用性的研究──饲料糖含量对生长、消化吸收率及体成分的影响

用糊精含量分别为５％、２５％、５０％的三种饲料饲养异育银鲫,研究异育银鲫对糖利用性特点,每个循环过滤水族箱中放养４０尾鱼,每种饲料喂两箱之鱼,饲养六周．摄食不同饲料的异育银鲫增重率有显著差异（ｐ＜０．１）,２５％糊精组生长最快,５％糊精组生长最慢．异育银鲫对三种饲料中糖的消化吸收率随着饲料糖含量的增加而极显著提高（ｐ＜ ０．０１）,粗蛋白的消化吸收率虽然各组间差异不显著,但也有相同的趋势．摄自不同糖含量饲料的鱼其肌肉含水量随饲料糖含量增加明显下降（ｐ＜０．０５）,粗蛋白和脂肪的含量随饲料糖含量的增加而增加,但差异不显著．在禁食２４小时时,肝糖元含量随饲料糖含量增加而显著提高,但能降解肝糖元的肝脏淀粉酶活性差异不显著（ｐ＜０．０５）．     

依折麦布对高迁移率族蛋白1诱导血管内皮细胞激活的影响机制研究

目的探讨依折麦布对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导血管内皮细胞激活影响的分子机制.方法分离、培养雄性SD大鼠胸主动脉内皮细胞,分为空白对照组、HMGB1刺激组、依折麦布组(HMGB1刺激前10μmol/L依折麦布预处理)、CLI-095组(HMGB1刺激前1μmol/L CLI-095预处理).荧光定量分析中性粒细胞与内皮细胞的黏附能力;RT-PCR和Western blot检测内皮细胞中TLR4,ICAM-1、可溶性E选择素mRNA和蛋白表达水平;EMSA法检测NF-κb-p65的DNA结合活性.结果 HMGB1活化的内皮细胞与中性粒细胞黏附活力均明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组、CLI-095组内皮细胞与中性粒细胞黏附活力均明显低于HMGB1诱导组,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1刺激组的内皮细胞TLR4,mRNA和蛋白表达量明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组和CLI-095组mRNA和蛋白表达量均明显低于HMGB1组,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1组内皮细胞NF-κb p65亚单位核位移明显强于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组和CLI-095组较HMGB1组核位移明显减弱,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1组ICAM-1、可溶性E选择素表达水平明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).而经依折麦布、CLI-095干预后可明显降低ICAM-1、可溶性E选择素表达水平,与HMGB1组之间差异具有统计学意义(P0.05).结论依折麦布可通过调节黏附分子(ICAM-1、可溶性E选择素)的表达而有效抑制HMGB1诱导的血管内皮细胞活化效应,其机制与抑制TLR4的表达和NF-κb激活有关.     

木犀草素抑制哮喘大鼠气道炎症的机制研究

目的探讨木犀草素抑制哮喘大鼠气道炎症的可能机制.方法取健康清洁级Wistar大鼠60只,随机分为木犀草素组、哮喘组、对照组,每组各20只.木犀草素组、哮喘组建立大鼠哮喘模型,建模过程中每次激发后1h给予哮喘组和对照组腹腔注射生理盐水,木犀草素组腹腔注射1 mg/kg的木犀草素.光镜下观察大鼠肺组织病理变化,测定支气管肺泡灌洗液中的细胞数及IL-4水平;免疫组化法检测p38MAPK,PPARγ蛋白表达情况;RTPCR检测p38MAPK,PPARγ的相对表达量.结果 3组大鼠支气管基底膜周径之间差异无统计学意义(P0.05);哮喘组大鼠平滑肌厚度、管壁厚度均明显高于对照组及木犀草素组大鼠(P0.05).哮喘组大鼠细胞总数、嗜酸粒细胞数、中性粒细胞数均明显高于木犀草素组和对照组(P0.05);木犀草素组细胞总数、嗜酸粒细胞数、中性粒细胞数均明显高于对照组(P0.05);哮喘组IL-4含量明显高于木犀草素组及对照组(P0.05);哮喘组大鼠p38MAPK蛋白表达明显高于对照组,PPARγ蛋白表达明显低于对照组(P0.05);木犀草素组大鼠p38MAPK蛋白表达明显低于哮喘组,PPARγ蛋白表达明显高于哮喘组(P0.05).哮喘组大鼠p38MAPK mRNA相对表达量明显高于对照组,木犀草素组表达量明显低于哮喘组(P0.05);哮喘组大鼠PPARγmRNA相对表达量明显低于对照组,木犀草素组表达量明显高于哮喘组(P0.05).结论木犀草素可能通过影响PPARγ表达和p38MAPK信号通路而发挥抑制哮喘大鼠气道炎症的作用.     

不同饲料对牛蛙机体主要养分组成变化的影响

研究了饲喂不同饲料对牛蛙机主要养分级成变化的影响。结果表明：全价饲料组牛蛙整体中粗蛋白、钙、磷的含量分别比蚕蛹组高４２．４１％、８１．３２％、８７．５０％,而粗脂肪含量比蚕蛹组低１１８．１１％;必需微量元素、氨基酸的含量均不同程度地高于蚕蛹组。牛蛙腿肌中粗蛋白、粗脂肪、钙、磷等的含量与峡谷组间十分接近;在微量元素上,全价饲料组牛蛙铜、铁的含量比蚕蛹组高３１．００％、９２．０６％,而锌、锰的含量则差     

S-1联合奥沙利铂方案一线治疗晚期胃癌 有效性及安全性分析

目的探讨S-1联合奥沙利铂方案一线治疗晚期胃癌的有效性及安全性.方法选取60例晚期胃癌患者作为研究对象,随机将其分为研究组和对照组,研究组采用S-1+L-OHP方案进行治疗,对照组采用FOL-FOX方案进行治疗.结果研究组和对照组患者有效率比较差异无统计学意义(P0.05);研究组疾病控制率为80.0%,优于对照组的53.3%,且差异具有统计学意义(P0.05);研究组和对照组中位TTP比较差异具有统计学意义(P0.05);两组中位OS比较差异无统计学意义(P0.05);研究组外周神经毒性发生率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05),其余不良反应发生率比较差异均无统计学意义(P0.05).结论 S-1联合奥沙利铂治疗晚期胃癌具有良好的疗效及安全性,与FOL-FOX方案比较,不良反应低,且静脉滴注时间短,患者依从性好.     

牙缺失修复不同骨质患者行即刻种植与常规种植临床比较研究

目的比较即刻种植和常规种植在不同骨质牙缺失修复中的近期和远期效果,为临床牙缺失种植提供参考.方法选择牙缺失修复患者96例,以接诊顺位分为两组,单数48例患者为常规修复组,采用常规种植;双数48例患者为即刻修复组,采取即刻种植,比较两组治疗时间,种植后使用Osstell谐振频率分析仪测定种植体稳定性(ISQ值);随访24个月,评价远期效果.结果常规修复组不同类骨质牙缺失患者种植后ISQ值与即刻修复组比较差异无统计学意义(P0.05).即刻修复组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ类骨质牙缺失患者治疗时间均明显短于常规修复组(P0.05).随访24个月,常规修复组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ类骨质牙缺失患者种植成功率分别为100%,100%,85.71%,80.0%;即刻修复组种植成功率分别为100%,100%,75.0%,83.33%(P0.05).两组牙齿松动、牙龈红肿、牙周脓肿发生率差异无统计学意义(P0.05).结论即刻种植法修复牙缺失可缩短治疗时间,而且近远期效果与常规种植相当,可用于不同骨质的牙缺失修复.     

利多卡因凝胶治疗带状疱疹后神经痛临床疗效分析

目的探讨利多卡因凝胶治疗带状疱疹后神经痛的临床疗效.方法随机将86例带状疱疹后神经痛患者分为两组,对照组43例使用双氯芬酸凝胶治疗,治疗组43例使用利多卡因凝胶治疗,观察比较两组临床疗效.结果观察组治疗总有效率(93.02%)显著优于对照组(76.74%)(P0.05);治疗前,两组患者VAS评分无统计学意义(P0.05);治疗后1,2,4周观察组VAS评分(13.5±14.2),(18.5±17.1),(20.8±19.0)分,均显著优于对照组(6.8±12.5),(7.3±12.4),(8.2±14.3)分,差异具有统计学意义(P0.05).结论利多卡因凝胶治疗带状疱疹后神经痛,效果明显,值得进一步深入研究与临床推广使用.     

miR-143-3p通过调节TGIF2的表达在甲状腺癌中的作用研究

目的 探究过表达 miR-143-3p 对甲状腺癌( thyroid cancer,TC) 细胞的影响及其作用机制。 方法 Real-time PCR 分析正常甲状腺上皮细胞和不同 TC 细胞中 miR-143-3p 的表达。 Targetscan 网站和双荧光素酶报告系统验证miR-143-3p 和 TGIF2 3′UTR 的靶向关系;Real-time PCR 检测 miR-143-3p 和 TGIF2 mRNA 的过表达效率;过表达成功后,将 CAL-62 细胞分为对照组、miR-143-3p mimic 组、pcDNA-TGIF2 组和 miR-143-3p+TGIF2 组,ELISA 检测细胞上清液中诱导型一氧化氮合酶( iNOS) 、白细胞介素( IL) -1β 和 IL-6 的含量;试剂盒检测超氧化物歧化酶( SOD) 水平,免疫荧光检测活性氧( ROS)产生;显微观察干细胞成球,Western blot 检测 TGIF2、p-P65、富含亮氨酸重复序列的 G 蛋白偶联受体5 ( LGR5) 和 八聚体结合蛋白4 ( OCT4 ) 蛋 白 表 达。体内构建裸鼠移植瘤, 检测过表达miR-143-3p 对肿瘤生长的影响。 结果 miR-143-3p 在 TC 细胞中的表达明显低于正常甲状腺上皮细胞( P< 0. 05) 。Targetscan 网站和双荧光素酶报告系统证实 miR-143-3p 与 TGIF2 存在靶向关系。 miR-143-3p mimic 组 miR-143-3p的表达上调( P<0. 05) ,TGIF2 mRNA 和蛋白表达下调( P<0. 05) ,iNOS、IL-1β 和 IL-6 含量明显降低( P<0. 05) ,抗氧化能力显著下降 ( P < 0. 05) , 干 细 胞 成 球 能 力 降 低 ( P < 0. 05) , p-P65、 LGR5 和 OCT4 的蛋白表达均显著下调( P<0. 05) 。 pcDNA-TGIF2 组的结果相反,过表达 miR-143-3p 能显著抑制 pcDNA-TGIF2 的促癌作用。 裸鼠移植瘤模型表明过表达 miR-143-3p 能够减小肿瘤的质量和体积,下调瘤组织中 TGIF2 和 OCT4 的表达( P<0. 05) 。 结论过表达 miR-143-3p 能够通过下调 TGIF2 的表达抑制 TC 细胞促炎因子水平、抗氧化能力和干细胞样特性,并抑制裸鼠肿瘤的形成。     

孕期营养补充剂对妊娠母鼠和仔鼠行为学影响

目的 观察孕期添加多种维生素和矿物质营养补充剂对母鼠和仔鼠自主活动与探究行为的影响,以及对仔鼠发育的影响.方法 SPF级昆明小鼠交配见栓后随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和溶剂对照组,孕期添加营养补充剂(孕早期、孕中期、孕晚期3个阶段的产品)按人体推荐日摄入量2 g/d换算小鼠的等效剂量,以等效剂量的0.5倍、1倍...