啤酒酵母XB05及其突变株JY2-2的RAPD分析

菌株JY2-2是啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XB05经半导体激光诱变筛选得到的优良菌株.为了从分子水平考察菌株JY2-2与XB05的差异,为酵母菌株JY2-2的鉴定提供分子依据,我们运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对啤酒酵母XB05和JY2-2进行全基因组分析.用27条随机引物对这两株酵母菌进行扩增,结果得到5条可产生较多扩增条带,并具有较丰富多态性的随机引物,每条引物可扩增8～20条DNA条带,分子量大小在100～3000bp之间.菌株XB05和JY2-2的DNA遗传相似系数为0.794,可以认为菌株JY2-2是啤酒酵母XB05的突变株.     

耐高温巴氏杜氏藻突变株的诱变和鉴定

采用紫外线辐射的方法对巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)进行诱变.经过夏日高温(42~52℃)筛选,得到一耐高温的突变株,命名为Dunaliella bardawilvar.H-42 Huang&Liu(简称H-42).研究结果表明,在每天42℃处理6 h的条件下,H-42达到生长平衡期时藻细胞密度为初始密度的4.5倍,而对照在第5天时细胞密度几乎降为零.通过显微镜观察并测量,证明突变株的细胞体积为(0.65~1.27)×10-15m3,是原出发株的3.0~3.4倍.蛋白质SDS-PAGE电泳表明,H-42在大约24 kD和30 kD处分别比对照多出一条新的蛋白带,同时在大约26 kD处缺失一条蛋白带.RAPD分析表明两者的遗传相似系数为0.726.由此我们认为H-42确为一耐高温的巴氏杜氏藻突变株.     

酸浆豆腐中产酸菌的耐高温紫外诱变

乳酸菌在食品及食品发酵行业具有广泛的应用,其中以乳酸菌发酵酸浆作为凝固剂的酸浆豆腐已逐渐成为人们关注的热点。酸浆豆腐发酵过程中以乳酸菌为优势菌,在酸浆豆腐点浆时,需在75℃以上高温下进行。普通乳酸菌无法耐受此温度且大量失活,影响产品的后熟。为了开发耐高温乳酸菌,以课题组从云南建水豆腐酸浆中分离的菌株为出发菌,通过紫外诱变的方式,温度梯度筛选获得4株耐高温产酸性能好的菌株。诱变获得4株菌均可在75℃耐高温30 min并保持较好的活性和产酸效果。研究所得突变菌株相比原始菌株均具有更好的耐热性和产酸性。其中HCUL 1.1801-1912Z活性最强、产酸能力最好,为4株菌中最优菌株,将该菌株用于发酵生产酸浆豆腐,将显著提高乳酸菌在豆腐中的活性和豆腐的品质。     

高产Monacolin K的红曲霉诱变育种

为了提高Monacolin K的产量,以紫红曲霉M2为出发菌株进行诱变育种(紫外诱变、常压室温等离子体ARTP诱变),通过构巢曲霉对峙培养、高效液相色谱HPLC等方法筛选高产Monacolin K的优秀突变菌株。结果显示:相对于原始出发菌株M2,两种方法均能够高效筛选到红曲菌株,对6株高产Monacolin K诱变菌株进行5次传代培养,发现诱变菌株产Monacolin K的能力均有下降;但紫外诱变菌株Z-4和ARTP诱变菌株M-43的Monacolin K产量分别下降2.83%和1.97%,表现为良好的遗传稳定性,说明Z-4和M-43具有潜在应用价值。     

盐藻粉中维生素E含量的测定

利用紫外分光光度法和高效液相色谱法对盐藻粉中的维生素E含量进行测定,比较这两种传统测定方法的优劣.结果表明,用高效液相色谱法测定盐藻粉中的维生素E含量准确可靠,据此可以建立一套完整的测定盐藻粉中维生素E含量的分析方法.     

He-Ne激光复合诱变选育柠檬酸高产菌

柠檬酸产生菌黑曲霉经多次物理、化学诱变处理后会对其产生一定的抗性,在菌种改良过程中不易得到优良高产菌株。为此,以黑曲霉(Aspergillus niger)28#为出发菌株,采用金属盐类化合物—LiCl处理黑曲霉的孢子,然后用He-Ne激光辐照对柠檬酸发酵菌黑曲霉进行复合诱变。结果表明,各实验组发生了明显的不同变化,说明该方法能诱发黑曲霉细胞的遗传变异,适合于菌种的改良选育。研究采用玉米粉为原料,摇瓶发酵时间72h,发酵温度35±1℃,通过溴甲酚绿指示性平板辅助筛选和摇瓶发酵,筛选出了3株柠檬酸发酵高产突变菌株,柠檬酸产酸率提高了19.29%,转化率从87.07%提高到103.86%,其中菌株L42遗传相对稳定,可作为进一步诱变筛选的出发菌株。     

利用空间诱变选育辅酶Q10高产菌

 以空间搭载为诱变手段,筛选可用于工业化生产的辅酶Q10高产菌株。以类球红细菌（Rhodobacter sphaeroides）为出发菌株进行空间搭载,根据菌落形态进行初筛,摇瓶发酵进行复筛,HPLC检测含量等方法筛选辅酶Q10高产菌株。最终得到名为Shenzhou6的突变株产量比对照菌株提高30％,产量可达（0.8+0.02）g/L,经过优化培养可满足工业生产需要。同时也说明空间诱变因其复杂的空间环境条件,可以作为一种诱变手段进行工业化菌样的筛选。     

纤维素酶高活力菌株筛选

通过测定呼吸消耗率和纤维素酶活性来研究7个侧耳属菌株对稻草的降解情况。结果表明：桃红侧耳纤维素酶（CMC）产量和活性较高，适合用于降解稻草，同时在该菌的生产中也可以选用稻草作培养料。     

高产普鲁兰菌种的诱变与筛选

采用紫外照射法对普鲁兰产生菌出芽短梗霉进行诱变和筛选，得到一株普鲁兰的高产变异株B9，其转化率可达52％．同时，对变异株B9进行菌落形态及发酵的研究．     

高产杆菌肽菌株的筛选及培养条件研究

采用细胞融合技术得到的菌株与不同来源地衣芽孢杆菌菌株,进行深层液体发酵生产杆菌肽,研究了不同菌株,不同碳源,不同量锌和磷量诸因素对杆菌肽高产的影响.结果表明,1号菌比B-1号、B-2号、3号、4号株菌的效价高,为5.80×102Iu.mL-1.以柠檬酸为碳源时,磷的用量为0.10~0.20 mmol.L-1的最佳培养基中培养时,最有利于杆菌肽的合成,锌的用量10%,其发酵液中杆菌肽效价最高,可达8.86×102~9.85×102Iu.mL-1.     

高温诱导双孢蘑菇蛋白质表达变化的分析

对24℃常温培养和32℃诱导培养的双孢蘑菇8213、02、2796、4607菌株的菌丝体总蛋白质的SDS－PAGE分析比较,发现2796和4607菌株在43kD-110kD之间有明显的差异蛋白质出现,而和8213菌株的蛋白质差异带不明显。这些高温诱导特异表达的蛋白质可能与双孢蘑菇的热耐受相关。