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相似文献
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耐热DNA聚合酶介导的DNA酶促自发合成   总被引:1,自引:0,他引:1  
构建了无模板引物的“类PCR体系”。该体系在适当温度保温一段时间之后,能检测到产物出现,利用热变性分析等手段,初步研究了产物的性质,发现这些产物是随机合成的具有一些特殊构型的DNA。本文报道三种构型,两类碱基组成比例,并通过改变反应条件观察对酶促自发合成的影响,探讨耐热DNA聚合酶的非特异聚合活性以及介导的酶促自发合成的机理和意义。  相似文献   

3.
PCR新技术     
PCR是多聚酶链式反应,是一种无细胞分子克隆法,是近年发展起来的一种快速的特定DNA片段体外扩增法。本文将讨论PCR试剂,设备以及PCR最佳条件。  相似文献   

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介绍了一种增加连接效率的PCR产物克隆技术,即SmaⅠ内切酶参与的PCR产物与SmaⅠ酶切的载体的连接;并通过克隆黄鲜基因组中一段约250bp的PCR产物的实例证实了该技术的可靠有效性。  相似文献   

5.
应用于PCR技术的DNA聚合酶   总被引:2,自引:0,他引:2  
DNA聚合酶作为聚合酶链式反应(PCR)的重要因素之一,在PCR过程中起着至关重要的作用,在某种意义上甚至可以说,PCR技术就是耐热DNA聚合酶的技术。故综合研究聚合酶并改善其酶学性能,已成为分子生物学工作者关注的热点之一。本文就PCR技术产生至今DNA聚合酶的研究历史及现状进行简要综述。  相似文献   

6.
DNA聚合酶作为聚合酶链式反应(PCR)的重要因素之一,在PCR过程中起着至关重要的作用,在某种意义上甚至可以说,PCR技术就是耐热DNA聚合酶的技术。故综合研究聚合酶并改善其酶学性能,已成为分子生物学工作者关注的热点之一。本文就PCR技术产生至今DNA聚合酶的研究历史及现状进行简要综述。  相似文献   

7.
本文应用多聚酶链反应(PolgmeraseChainReaction,PCR)技术对直接涂片镜检淋球菌阴性患者100例进行淋球菌cppB基因片段测定。其中PCR阳性者高达54例,占54%,该组病人中有20例尖锐湿疣患者,其中PCR阳性者13例,占65%。以上结果提示:PCR技术可明显提高淋病患者的检出率。  相似文献   

8.
本文介绍性病淋球菌PCR基因检测方法的研究过程.笔者设计一对对淋球菌隐蔽性质粒cppB基因有专一性的引物,应用该引物进行PCR体外基因扩增.对淋病患者的泌尿生殖道标本可检出380bP特异片段应用该试剂盒检测125例性混乱患者与细菌培养法比较,前者检出率25.6%(32/125),后者仅6.4%(8/125).  相似文献   

9.
首次将AP-PCR应用于DNA多态性研究。研究了AP-PCR的反应程度,找到实现稳定扩增的适宜条件,并发现模板DNA浓度的变化在相当范围内不会改变扩增图谱;对肿瘤瘤周组织以及正常组织进行分析,在11个引物中发现2个引物的扩增结果是多态的。初步结论:多态现象与癌变相关。  相似文献   

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固定标本的DNA提取及PCR扩增   总被引:7,自引:1,他引:6  
报道富尔马林、酒精固定的日本绒螯蟹标本的DNA提取及PCR扩增,并与冷冻、煮沸标本进行了比较。结果表明,福尔马林固定标本与酒精固定标本一样可以撮加入的蛋白酶K量越多,DNA的回收率越高。以提取的DNA为模板,进行了线粒体DNA12SrRNA和D-1ooP基因片段的PCR扩增,经琼脂糖产电泳PCR扩增产物后均得到了与期待的碱基长度相一致的清晰谱带。  相似文献   

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单引物PCR扩增的DNA分子模式   总被引:2,自引:3,他引:2  
  相似文献   

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单引物PCR扩增DNA指纹图谱的稳定性研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
以人胶原蛋白基因下游一段DNA的互补序列设计引物,对人染色体DNA进行单引物PCR扩增,在低温退火的条件下,这种引物与DNA模板的一处完全配对,并且可以随机地结合在其他一些位置上。由此进行单引物PCR扩增,它们的扩增产物形成了稳定的引物-模板特异的DNA指纹图谱。本文所建立的单引物PCR扩增技术在类似的研究中均可获得稳定的实验结果,具有一定的应用价值。  相似文献   

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模板甲基化水平对鼠肝RNA聚合酶体外转录活性的影响   总被引:1,自引:2,他引:1  
利用3H-UTP同位素参入法,研究了大鼠肝细胞RNA聚合酶在核内外的转录活性,结果表明:在细胞核内的转录活性明显低于在无核抽提物中的转录活性。利用自身的DNA模板,优于利用外加的DNA模板。并比较了不同DNA甲基化水平的模板对RNA聚合酶体外转录活性的影响,发现模板的甲基化水平与其体外转录水平呈反相关。  相似文献   

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采用聚合酶链式反应(PCR)检测植原体在桑树体内的分布及其相对含量的周年变化.结果显示,茎部植原体含量在生长季节逐渐升高,7月达到最大,冬季检测不到;叶部与茎部相似但植原体含量在8月达到最大;根部全年均含有植原体,含量较低.此外,用酶联免疫吸附分析(ELISA)对桑树内源激素检测的结果显示,病株中生长素、细胞分裂素(Z+ZR,DHZ+DHZR)及赤霉素(GA3,GA4)的含量都明显高于健株.表明桑树体内激素水平的变化与植原体有关  相似文献   

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本文通过把计算机图象处理技术应用于DNA指纹图的质量改善和分析,提出一种用计算机图象处理系统对DNA指纹图进行个体识别的可行方法。  相似文献   

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