蒜头果细胞悬浮培养的研究

采用蒜头果(Malania oleifera Chun et．K Lee)新鲜种子的胚乳在4种含不同激素浓度组合的培养基上诱导产生愈伤组织并建立起细胞悬浮培养体系。结果表明：愈伤组织诱导率为66．7％～86．6％，其中以MS 6-BA0.5mg／L 2，4-D 2．0mg／L 蔗糖3％的培养基最佳，其诱导出的愈伤组织具有较强的增殖能力和较好的脆散结构；最佳继代培养基为MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D2．0mg／L 蔗糖3％；将继代后的愈伤组织转入6种含不同激素浓度组合的MS液体培养基中进行振荡培养，在综合分析各培养基的单细胞密度，细胞团块密度。细胞生物量增长率等指标后，初步筛选出MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D 2．5mg／L 蔗糖3％培养基为较好的液体培养基。     

胀果甘草愈伤组织培养及甘草酸含量分析

将胀果甘草的根、胚轴、子叶分别接种到含有不同激素组合的MS培养基上 ,在光照或黑暗下培养 .将根接种到液体培养基中培养 .结果发现不同的激素组合对愈伤组织生长和甘草酸质量分数的影响是不同的 .首先 ,随着 2 ,4D质量浓度上升 ,愈伤组织生长状况下降 ,甘草酸质量分数却增多 ,2 ,4D质量浓度为 4 .0时愈伤组织中甘草酸质量分数比生药中的增加 18.9% .加入BA或KT后 ,甘草酸含量明显增多 ,结果显示愈伤组织的生长与甘草酸的质量分数不成正相关 .其次 ,光照培养的愈伤组织比黑暗培养的生长快 ,但甘草酸含量低于黑暗培养 .第三 ,悬浮培养条件下 ,离体根培养物产生大量须根 ,根培养物中甘草酸质量分数明显高于其他培养物 ,比生药增多 4 3.3% ,反映出不同培养物产生甘草酸的能力不同 ,其中以离体根更适于甘草酸的合成 .     

NaCl胁迫对胀果甘草子叶愈伤组织总黄酮合成的影响

用不同浓度的NaC1处理胀果甘草子叶愈伤组织,分别在处理7 d、14 d、21 d、28 d、35 d和42 d取样,测定甘草子叶愈伤组织鲜重和总黄酮含量.结果表明当培养基中添加NaCl的浓度低于85.5 mmol/L时,随着NaCl胁迫程度的增加,胀果甘草子叶愈伤组织的生长量总体呈现升高的趋势,黄酮含量随NaCl浓度的增加而升高.其中在第28 d时,85.5 mmol/L NaCl处理的子叶愈伤组织中甘草黄酮含量达到最高值,为1.41 mg/g,比未作NaCl处理的对照愈伤组织的黄酮含量(1.31 mg/g)提高了7.83％(为0.10 mg/g),约为对照的1.078倍.试验结果表明一定浓度的NaCl胁迫可以提高胀果甘草子叶愈伤组织的甘草黄酮含量.     

乌拉尔甘草悬浮单细胞的筛选及培养

乌拉尔甘草种子在消毒后培养无菌苗,截取无菌苗子叶、上胚轴和下胚轴等作为外植体,诱导和继代培养成松散型愈伤组织,然后在振荡培养后过筛获得悬浮单细胞;再对悬浮液进行多级稀释、培养制备小细胞团.结果表明,在舍1.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、1.0mg/Lα-萘乙酸(NAA)、1.0mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.3mg/L激动素(KT)的MS培养基中,上胚轴能在3～5次继代培养后获得松散型愈伤组织,过80目筛可以获得悬浮单细胞和小细胞团;同样的培养基,悬浮单细胞在琼脂表面、珍珠岩表面和看护培养中培养,看护培养的细胞生长最快、小细胞团形态最佳.     

胀果甘草细胞悬浮培养体系的非结构动力学分析

在建立了稳定的胀果甘草细胞悬浮培养体系的基础上,分析了体系中细胞生长、基质消耗及产物合成的动态变化,利用Excel 2013和Origin Pro 8.0软件处理实验数据,拟合出模型参数,建立了相应的非结构动力学模型.模型模拟值与试验值的拟合度良好,相关系数分别为0.968 46、0.964 17、0.975 64,表明建立的动力学模型能很好地预测甘草细胞的悬浮培养过程,对指导反应器放大培养甘草细胞具有重要意义,同时为植物细胞生物反应器的设计提供理论依据.     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

胀果甘草愈伤组织生长和多糖合成的调控

为了研究培养基基本成分、碳源以及离子浓度对甘草愈伤组织生长和多糖合成的影响,以MS,6,7-V为基本培养基,改变碳源、PO43-及Ca2+浓度,分析胀果甘草愈伤组织生长及多糖产量.结果表明:MS培养基附加蔗糖最利于甘草愈伤组织生长,6,7-V培养基虽利于甘草多糖的合成但不利于愈伤组织生长从而影响多糖产量.当培养基中PO43-浓度为1.25mmol/L、Ca2+浓度为2.99mmol/L时,甘草愈伤组织生长量积累最高,同时对多糖的生物合成也最为有利.高浓度的PO43-和Ca2+有利于甘草多糖的合成,但不利于愈伤组织的生长.研究结果为利用生物工程手段进行甘草多糖的产业化生产提供参考数据.     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

高生物产量川芎细胞悬浮培养条件优化

在基本培养基为MS的基础上,研究激素浓度、接种量等因素对川芎悬浮细胞生长的影响,建立川芎细胞悬浮培养体系.实验结果表明:川芎悬浮细胞同步化继代培养液生长16 d左右,对数生长中后期时,按照1∶4(V/V)悬浮液,新鲜培养液,以MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖培养基可获得较高产量的川芎悬浮细胞,湿重达到182.6 g·L-1,干重达到39.2 g·L-1.     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究．经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０－３．建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数     

植物生物反应器细胞悬浮培养研究进展

利用生物反应器进行植物细胞悬浮培养可以缩短植物细胞的生长周期，但进行大规模植物细胞悬浮培养会受到植物自身特点和生物技术的限制。通过与微生物相比较，笔详细介绍了植物细胞悬浮培养的特点，分析了用于植物细胞悬浮培养的反应器类型及其特点和适用范围，并提出以植物快速繁育为主要目标的植物生物反应器的研究方向。     

红豆杉愈伤组织诱导及细胞培养的研究

本文研究了从红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｓｅ）的嫩茎诱导愈伤组织的过程．探讨了红豆杉细胞悬浮培养和平板培养的方法．结果表明：在所实验的３种培养基（ＭＳ，Ｂ５，Ｗｈｉｔｅ）中，虽然都能诱导红豆杉幼茎产生愈伤组织，但以ＭＳ培养基较好，其中ＭＳ＋２．４－Ｄ１ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／ｌ培养基愈伤组织诱导率高达９８％．ＭＳ和Ｂ５液体培养基均可作为红豆杉单细胞悬浮培养的培养基，普通平板培养法培养红豆杉单细胞的植板率只有０．０３％，有待改进其它平板培养法     

西洋参悬浮细胞培养条件的研究

通过试验论述了不同愈伤组织年龄和接种量对细胞悬浮培养的影响，从而得出最佳接种年龄及其最佳接种量；分析了培养方式和转达对细胞悬浮培养影响的原因，确定了有利于细胞生长的培养方式及转速；阐述了在美国ＶｉｒＴｉｓ公司生产的ＯＭＮＩ－ＣＵＬＴＵＲＥＢＥＮＣＨ－ＴＯＰ－２Ｌ发酵罐中，进行西洋参细胞发酵培养的结果。描述了西洋参细胞在发酵罐中的生长曲线、培养液中Ｄｏ变化曲线和培养过程中ｐＨ的变化曲线，为西洋参细胞发酵培养条件最佳化的研究提供了有关数据。     

伊贝母细胞悬浮培养的研究

研究了伊贝母细胞悬浮培养过程中接种量、培养方式和激素浓度对细胞生长的影响；测得细胞生长周期为１９～２４ｄ；分析了培养液的ｐＨ、蔗糖浓度、电导率和Ｄｏ变化的原因。鉴定了悬浮培养细胞中含有生物碱，其总生物碱和西贝素含量均高于栽培鳞茎。     

丰抗8号小麦悬浮细胞系的建立及遗传转化的初步研究

以丰抗８号小麦的幼胚为起始材料,建立了胚性悬浮细胞系．幼胚的取材时期、培养基的成份和选择继代的方法有明显的影响．取开花后１２～１４ｄ的幼胚、增加无机盐离子和还原态氮的用量、挑选鲜黄致密及松脆类型的愈伤组织能显著地抑制空瘪型、长条型、弯弓形等不良细胞类型出现的频率,促进细胞向圆球型方向分裂生长．通过３个月的选择继代培养,获得了理想的松散状胚性愈伤组织;再经过ＭＳ２Ｌ和ＡＡ液体培养,约２个月后,建立起分散性好、颗粒小、增殖快的小麦悬浮细胞系．以新建立的胚性悬浮系为材料,进行基因枪转化,获得了ＧＵＳ报告基因的短暂表达,平均短暂表达频率为１７．１％．就如何筛选转基因小麦进行了讨论．     

悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在 2 5 0mL和 2L摇瓶及 1 0L反应器中的生长情况进行了研究 .应用电导率法监测红豆杉细胞的生长 ,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物量与培养液电导率变化的相关性 .