用新洁尔灭测定核酸的共振瑞利散射方法研究

在酸性BR缓冲溶液 ，新洁尔灭（溴化十二烷基二甲基苄铵，BB）与小牛胸腺DNA（ctDNA)鲱鱼精DNA（hsDNA)、鲑鱼精DNA（sDNA)和酵母RNA（yRNA)反应，产生强烈的共振瑞利散射（RRS）增强，其最大散射峰位于470nm处。由此建立测定微量核酸的新分析方法。ctDNA,hsDNA,sDNA和yRNA的测定范围分别为0－4.2μg/mL，0-4.0μg/mL,0-4.6μg/mL,0-12.0μg/mL；检出限（3σ）分别为8.6ng/mL,9.2ng/mL,9.9ng/mL和27.9ng/mL。研究发现RRS强度变化与核酸构象转变有密切联系，因此RRS法有望成为研究核酸构象的有用手段。     

用比布列西猩红共振光散射技术测定蛋白质

在酸性溶液中，比布列西猩红与蛋白质作用，产生共振光散射(RLS)增强光谱，最大散射峰位于286．0nm，且增强RLS强度在一定范围内与蛋白质浓度呈线性关系．研究了pH、比布列西猩红的浓度及离子强度对RLS强度的影响．人血清白蛋白(HSA)的线性范围为0.02～4．0μg／mL，牛血清白蛋(BSA)0．02-4．5μg／mL，溶菌酶(Lys)为0．02-2．0μg／mL，γ-球蛋白(γ-IgG)为0.0l-7.5μg／mL.测定的检测限(3σ)分别为：16．6ng／mL(HSA)，15．7ng／mL(BSA)，16．7ng／mL(Lys)和7．5ng／mL(γ-IgG)．此方法用于人血清样品测定，结果满意．     

毛细管色谱法测定头孢美唑中的有机溶剂残留量

采用毛细管气相色谱法，以叔丁基甲醚为内标，用Agilent DB-200毛细管气相色谱柱和氢焰离子化检测器．同时测定了头孢美唑中甲醇、乙醇、二氯甲烷、三乙胺、乙酸乙酯、苯甲醚等6种有机溶剂残留量．6种溶剂的线性范围分别为0～480μg／mL（r=0．9996）、0—800μg／mL（r=0．9994）、0～96μg／mL（r=0．9990）、0～800μg/mL（r=0．9993）、0～800μg／mL（r=0．9995）、0～800μg／mL（r=0．9993）；平均回收率分别为100．1％、100．5％、101．2％、100．1％、100．7％和100．4％；相对标准偏差分别为0．90％、1．30％、1．18％、1．23％、1．52％、1．41％（n=9）．     

阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究

在阔叶榧新鲜针叶DNA提取过程中，应用pH值较低，无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质，其中加入2％的β-颈基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色。提取出的DNA样品产率在83．7－197．5ng/mg.f.，DNA质量和纯度较高，260nm/280nm光密度比值在1．8－1．9之间。所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切，并可用于随机引物PCR扩增，在优化RAPD各种反应条件研究中，确定 了阔叶榧最佳RAPD反应体系为：15μL反应体系中含有50mmol/L KCl．10mmol/L Tris-HCl(pH9.0）．0．1％Triton-100、3nmolμL MgCl2、0.6nmol/μLdNTPs、6μg/μL BSA、1U Taq酶、60ng引物、50－100ng左右的阔叶榧DNA。     

人工合成绿蝇防御素及其活性研究

采用人工合成的方法研究绿蝇防御索（phormicin A）对细胞及肿瘤作用效果，实验结果发现，人工合成的绿蝇防御素可以在较低浓度下抑制革兰氏阳性菌的生长（MIC＝5－75μg/mL），其中以金黄色葡萄球菌的反应最为敏感，MIC为5μg/mL，而且当人工合成的绿蝇防御素浓度升至300μg/mL时可以抑制大肠杆菌的生长，但无法抑制绿脓杆菌的生长，此外，它还能抑制MDA435乳腺癌细胞及TSU前列腺癌细胞的体外增殖，抑制率分别为22．21％（P＜0．05）和35．53％（P＜0．01）。     

DApMM催化光度法测定痕量钌

我们在实验中发现了封（Ⅲ）对KIO4氧化二安替比林基-（p-甲氧基）苯基甲院（DApMM）的增色反应有明显的催化作用，由此建立了测定痕量钌的催化分光光度分析法．其最大吸收峰位于445nm，检出限为1．3×10－9g/mL，钌的含量在0－6．0μg/L范围内符合比尔定律，线性回归方程为△A＝0．01760＋1．6802C（μg/25mL），r＝0．9909，并且测定了一些动力学参数．方法的灵敏度较高，稳定性较好，用于冶金产品和岩矿中痕量钌的测定，其结果令人满意．     

吖啶橙-SDS-核酸荧光体系的研究及分析应用

在pH=5．89的六次甲基四胺-HCl缓冲溶液中，DNA可使吖啶橙(AO)的荧光强度增强，在一定浓度范固内，体系的荧光强度变化与DNA浓度呈线性关系，可用于DNA的定量测定。体系的荧光强度在加入阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)后有很大增强。研究了pH值及缓冲溶液种类、吖啶橙用量、表面活性剂种类及用量等对体系荧光强度的影响。结果表明，在最佳实验条件下，DNA浓度的线性范围分别为0～2．0μg/mL、2．0～10．0μg/mL，检出限为7．18ng/mL，相对标准偏差为2．0%。该方法线性范围较宽、灵敏度高、反应速度快、稳定时间长，是用染料定量分析DNA的一种无毒、高效、简便的新方法。     

化工区成年人体内β_2-m含量观察

本文对416例化工区居住5年以上者进行了血清β_2－m含量测定，其结果观察组为2．11±0．48μg/ml；对照组为1．96±0．51μg/ml（P＜0．01）。另外观察组与对照组之间，男性为2．14±0．51μg/ml；1．95±0．477μg/ml（P＜0．01），女性为2．0±0．46μg/ml，1．98±0．54μg/ml（＜0．05）。实验结果表明，化工区成年人机体内β_2－m含量有不同程度的改变。     

涂敷注射针头固相微萃取方法研究(英文)

特4cm×0．3mm内征的牙科5号针头的内表面（针头和针管的连接部分除外）用OV－1气相色谱固定液涂敷，膜厚4．8μm。此外头配用2mL注射针管作为固相微萃取器对模拟水样中的三氯甲烷和四氯化碳进行了萃取研究。考察了取样方式、解吸方式、解吸时间、解吸温度等条件对结果的影响。实验表明，这种萃取装置和气相色谱仪配合，仅用1mL样品，即可使水中三氯甲烷和四氯化碳的检出限达到0．5μg／L和0．05μg/L，线性范围102，相关系数分别为0．983和0．979，相对标准偏差分别为7．3％和7．7％。     

核酸某些碱性三苯甲烷染料体系的RRS及其分析应用

在Tris缓冲溶液中,核酸能与某些碱性三苯甲烷染料如乙基紫（EthyI Violet,EV)、结晶紫（Crystal Violet,CV)和甲基紫（MehtyI Violet,MV）结合而使共振瑞利散射（RRS）急剧增强并产生新的RRS光谱。以鲱鱼精DNA（Herring Sperm DNA,hsDNA)为例考察了其相应的光谱特征、影响因素和适宜的反应条件,体系均在hsDNA浓度为0～2.0μg/mL时与散射强度呈直线关系,方法具有较高的灵敏度,其检出限（3σ）分别为4.7ng/mL（EV-hsDNA体系）,13.0ng/mL（CV-hsDNA）和12.2ng/mL（MV-hsDNA体系）。考察了某些共存物质的影响,并用于全成样品中核酸的测定,获得了满意的结果。     

小麦叶绿体DNA的提取与psbA基因的扩增

利用高离子强度，低ｐＨ值缓冲液匀浆细胞的方法，提取小麦叶绿体ＤＮＡ，并以此为模板，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）对小麦叶绿体ｐｓｂＡ基因进行了特异性扩增。     

Poly(dimethylsiloxane) based microchip for DNA electrophoresis

A novel poly(dimethylsiloxane)(PDMS) -based microchip for DNA separation through electrophoresis has been developed using a micro-electro-mechanical-system(MEMS) technology. Unlike previous hybrid PDMS microchip, one PDMS film is first created on glass support by pressing method in our microchip. Thus, increased band-broadening phenomena, arising from the material nonuniformity at the walls of microchannel, can be avoided in electrophoresis process. A low-viscosity hydroxypropylmethylcellulose-100 (HPMC-100) is used as the separation medium for fluorescent intercalator-labeled double-stranded DNA (dsDNA) fragments. Mannitol is introduced to PDMS-based microchip as a separation medium additive to enhance separation efficiency. At applied electric field strength of 150 V/cm, excellent separations of the PCR marker could be achieved with an effective separation distance of 25mm .     

中性红用于痕量DNA测定

在pH 7 6～ 7 8和低离子强度条件下 ,中性红 (NR)与DNA作用产生以 53 5 0nm和 3 50 0nm为特征的共振光散射增强 (ERLS)光谱 .研究表明 ,在最佳条件下 ,在 53 5 0nm处的共振光散射增强与DNA的浓度成线性关系 ,据此建立了用ERLS光谱测定痕量DNA的新方法 .方法的检出限在纳克级 .     

顺铂与DNA相互作用下的CD谱的测试

本文报导了ＤＮＡ与顺铂相互作用下的ＣＤ谱的测试过程及实验结果，并对作用机理做了初步分析．     

Stretching and imaging studies of single DNA molecules

DNA molecules were stretched on silanized mica surface with the molecular combing technique, and detected with fluorescence microscopy and atomic force microscopy. Meantime, DNA molecules were stretched with a modified dynamic molecular combing technique and studied with atomic force microscopy. The results indicate that, compared with the dynamic molecular combing technique, the modified dynamic molecular combing technique has advantages of less-sample demand and less contamination to sample; as compared with the molecular combing technique, it has better aligning effect and reproducibility. Combination of this kind of DNA molecular manipulating technique with the single DNA molecule detecting technique by atomic force microscopy and fluorescence microscopy will play an important role in the basic research of molecular dynamics and the application of gene research.     

DNA-夜蓝结合光谱研究

:在脱氧核糖核酸(DNA)分子中,磷酸苷脱质子和碱基的质子化使双螺旋链构成双静电膜,带电荷的染料分子被双静电膜吸附,吸收光谱发生位移。本实验用微表面吸附-光谱修正技术(MSASC)研究了DNA与夜蓝(NB)染料分子间的相互作用,结果表明NB在DNA上的吸附聚集满足Langmuir单分子层吸附规律。     

Combined-dynamic mode “dip-pen” nanolithography and physically nanopatterning along single DNA molecules

Atomic force micriscope (AFM)-based dip-pen nanolithography (DPN) is an emerging approach for constructing nanostructures on material surfaces such as gold, silicon and silicon oxide. Although DPN is a powerful technique, it has not shown its ability of direct-writing and patterning of nanostructures on surfaces of soft materials, for example biomacromolecules. Direct depositing on soft surfaces becomes possible with the introduction of a combined-dynamic mode DPN rather than mostly used contact mode DPN or tapping mode DPN. In this report, the combined dynamic mode DPN is used for direct depositing protein ink on DNA molecules at the nanometer scale.     

间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用的SCGE研究

采用小鼠睾丸支持细胞/ 生殖细胞共培养法以及单细胞凝胶电泳技术,研究了间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.结果表明:间二硝基苯能够导致生殖细胞DNA链断裂,而且其受损率与剂量具有明显的剂量效应关系,与对照组相比均具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05);间二硝基苯可以引起离体小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,具有生殖毒性.