2种缓冲液对血清蛋白醋酸纤维膜电泳效果对比研究

目的在血清蛋白醋酸纤维膜电泳巴比妥缓冲液可以分离出5条区带的实验条件下,研究硼酸-硼酸盐缓冲液是否能够达到相同甚至更好的实验效果,是否可替代巴比妥缓冲液。方法采用DYY-8C型电泳仪进行醋酸纤维膜电泳,选择不同电压和电泳时间,观察巴比妥缓冲液与硼酸-硼酸盐缓冲液分离兔血清蛋白的效果,并分析2组蛋白质相对含量测定值有无差异。结果在相同的实验条件下,硼酸盐缓冲液的分离效果好于巴比妥缓冲液,2组蛋白质相对含量无明显差异。结论在血清蛋白醋酸纤维膜电泳实验中,与巴比妥缓冲液相比,硼酸缓冲液的实验结果更稳定且重复性更好,可以替代巴比妥缓冲液。     

琼脂糖电泳改良法明显提高HBsAg的检出率

琼脂对流免疫电泳是一种检测HBsAg常用方法,但存在的问题是其敏感度较低。笔者在常规方法的基础上,做了些改进:用琼脂糖代替纯化琼脂;并先将诊断血清加在阳极端孔内,预电泳15—20分钟,然后将待检标本加入阴极端孔内继续电泳50分钟。应用这种预电泳法检查416份标本并和常规法作了比较。结果表明预电泳法HBsAg检出率(25.0％)明显地高于常规法(15.4％)。     

硼酸缓冲液应用于电泳实验的效果分析

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是医学院校生物化学实验中的重要实验,传统巴比妥缓冲液具有毒性且不经济,该文旨在研究硼酸缓冲液的效果。采用DY—l型电泳仪配套水平电泳槽进行醋酸纤维薄膜电泳,控制电流时间和室内温度。显示硼酸缓冲液电泳可以分离出5条清晰的蛋白区带,并且电泳10次后仍然效果良好。由此得出离子强度为0.08的硼酸缓冲液完全可以替代巴比妥,无毒且经济,值得推广应用。     

毛细管区带电泳直接分离与测定抗坏血酸对映体的研究(英文)

报告了用毛细管区带电泳法直接分离与测定抗坏血酸对映体的方法。考察了电泳电压,缓冲液酸度、浓度对分离的影响,样品由电进样方式(5kV/10s)引入未经处理的弹性熔硅毛细管(49cm×50μm i.d.,有效分离长度为37.5cm),并以40mmol/L硼砂(pH9.0)为电泳介质,在25kV下电泳,紫外280nm检测。D.L-抗坏血酸分别在75～1100μs/mL和25～120μs/mL范围内可进行定量分析,日间-RSD值分别为3.2％和7.2％(n=6)。     

高效毛细管电泳法用于麻保沙星的测定

建立了一种高效毛细管电泳法测定麻保沙星原料药含量的方法.采用未涂层石英毛细管柱,以15 mmol/L硼酸钠缓冲液(pH值为9.2)为电泳介质,分离电压为20 kV,采用高度差进样10s,检测波长为295 nm,麻保沙星在10～100μg/mL范围内线性良好,平均回收率为100.2%,RSD值为0.97%.     

斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体蛋白和病毒粒子的血清学研究

斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体蛋白的抗血清与其同源抗原,在双向免疫扩散和免疫电泳中产生一条沉淀线和一条沉淀弧,病毒粒子的抗血清与其同源抗原,在双向免疫扩散和免疫电泳中形成两条沉淀线和三条沉淀弧。异源系统之间无交叉反应。凝胶内吸收试验表明多角体蛋白与病毒粒子之间不存在共同抗原,两种组分无血清学关系。     

芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅱ的分离纯化及部分性质

从芦荟叶中提取的SOD溶液，通过丙酮沉淀、热变性、DEAE-琼脂糖柱层析、Sephacryl S-9200凝胶过滤，获得芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅱ电泳纯产品．该同工酶经凝胶过滤测定全分子量为35kD及SDS-PAGA测得亚基分子量为17kD，由2个亚基组成．经等电点聚焦电泳测得该SOD的等电点为pH7．6．     

从对流免疫扩散电泳免疫复合物沉淀线提取抗原小核RNA的方法

可提取性核抗原(ENA,包括Sm、RNP、Ro和La等多种抗原成分)是小核RNA和蛋白质组成的复合物。本文介绍从对流免疫扩散电泳(CIDE)形成的免疫复合物沉淀线提取单一抗原小核RNA的方法。其结果与纯化抗原的小核RNA组成相同。此法仅需约100微升的单价特异性抗体,抗原不需纯化,操作简单易行。     

非水毛细管电泳检测辣椒粉中苏丹红

首次采用非水毛细管电泳法对两种苏丹红染色剂-苏丹红I与苏丹红II进行了分离检测。考察了电泳介质、背景电解质、SDS浓度对分离的影响。当运行缓冲液为100 mmol/L乙酸钠+35 mmol/L SDS的乙腈/甲醇(6:4,v/v)混合溶液时,两种苏丹红化合物能够在15 min内达到基线分离。各组分的峰面积与待测物浓度在0.01~0.5 mg/mL范围内呈良好的线性关系,检测限均为0.005 mg/mL。最终检测到辣椒样品中含有苏丹红II浓度为3.040 mg/g,苏丹红I与苏丹红II在加标辣椒样品中的回收率分别为94.68%和81.00%。     

猪内脏中盐酸克伦特罗的毛细管电泳电导检测

建立了可用于检测猪内脏中盐酸克伦特罗含量的毛细管电泳电导检测方法 ,考察了实验参数对分离、检测的影响。采用醋酸 /醋酸氨缓冲体系为运行电泳介质 ,在最佳实验条件下 ,盐酸克伦特罗的线性范围为 1 2～ 2 0mg/L ,检测限为 0 6mg/L ,是一种较好的检测盐酸克伦特罗的方法。     

益母草药材中水苏碱成分的高频电导毛细管电泳法分析

建立了益母草药材中水苏碱含量测定的高效毛细管电泳高频电导法,以融硅毛细管(150 μm×60cm)为分离柱,H3PO4-NaH2PO4缓冲液为电泳介质(2.0 mmol/L NaH2PO4,H3PO4调pH 5.0),在12.0 kV,柱端高频电导检测了益母草药材中水苏碱的含量,重点探讨了缓冲液的种类、浓度、pH值、分离电压、进样时间、进样高度及毛细管有效长度对检测的影响;该法的线性范围为20.0～1 300 μg/mL,检出限为2.50μg/mL;结果表明该法快速,简便,结果准确,适用于益母草药材中有效成分的含量测定.     

琼脂微球偶联氨基化合物及其效果分析

琼脂微球表面偶联了氨基这一易被氧化的亲和性基团,制备了对口蹄疫病毒抗原的亲和作用。以琼脂微球为基质,通过正交试验筛选、凯氏定氮法测定,选取最优偶联条件下的琼脂微球介质,用其亲和吸附口蹄疫病毒灭活抗原,检测其亲和吸附效果。结果显示:琼脂微球15g,环氧氯丙烷15mL,3 M NaOH 30mL,40℃活化反应3.5h;6mL苯乙胺,2M NaOH 20mL,50℃偶联反应2.5h。该条件偶联后的含氮量是0.4486%,得到的该介质对口蹄疫灭活病毒抗原的层析效果和某生产疫苗的药厂的分离纯化效果相似,表明该自制介质对分离纯化口蹄疫灭活病毒抗原具有一定的应用潜力。     

Fe（OH）3胶体电泳实验再探索

在琼脂中加入适量的KNO3，经处理制成一定长度的琼脂柱，在其中插入铜线便制成Fe(OH)3胶体电泳实验的电极，探索了电压，电极间距，胶体浓度及环境温度等对实验效果的影响，提出了最佳的实验条件，获得了较快的电泳速度和清晰的电泳界面。     

高效毛细管电泳法测定牛奶中四环素类抗生素含量

采用固相萃取-毛细管电泳法(SPE-HPCE)同时检测牛奶中四环素、氯霉素、土霉素和金霉素的含量。以80mmol.L-1硼砂缓冲液为电泳介质,运行电压25kV,压力法进样5s;柱温25℃;检测波长200nm。结果表明,该方法能使4种抗生素在15 min内得到完全分离,检测限(μg.ml-1)分别为0.5,1.5,1.0,0.5,回收率分别为100.7%(RSD=1.3%),101.7%(RSD=0.6%),100.8%(RSD=1.5%),101.1%(RSD=0.7%).该方法简单、可靠,灵敏度高,适用于牛奶中四环素类抗生素残留量的检测。     

一种简便快速筛选重组子的方法

将转化后的单菌落置于快检缓冲液中,振荡后,直接通过琼脂糖凝胶电泳比较质粒大小,2h内可筛选出重组子．详细介绍了快检缓冲液配方、快检效果、注意事项以及与其它方法的优势比较．     

用血清反应法检验稻田害虫捕食天敌种类的研究

为了了解几种主要水稻害虫的捕食性天敌种类以及它们之间的相关性,我们从1981年开始对稻田的几种捕食性节肢动物进行了血清学方法检验.方法试验方法包括抗原制备,免疫血清的制备,天敌的采集和血清沉淀反应.抗原的制备从田间采回活的害虫,12小时后,冰冻致死,放在研砵中,加入磷酸盐缓冲液研磨成浆状,低温搅拌、离心和抽滤,透析浓缩,浓缩液冰冻贮存备用.     

哌嗪类药物的毛细管区带电泳与高压液相色谱分离研究

对自行设计合成的哌嗪类药物进行了毛细管区带电泳和高压液相色谱的分离研究。在ＣＺＥ的分离过程中,考察了缓冲液的ＰＨ值,毛细管柱来源,缓冲液的类型和浓度,添加剂等因素对分离效果的影响。在优化的条件下,化合物Ｉ与化合物Ⅲ的电泳迁移率相近,没有得到完全的分离。     

花粉多糖组分的高效毛细管电泳分析

单糖经α－萘胺衍生化以后,用硼砂做电泳介质,实现高效毛细管电泳分离,得到标准的α－萘胺衍生单糖的毛细管区带电泳谱图。将玉米和蔡花多糖水解成单糖,用相同的方法实施电泳,得到多糖的毛细管区带电泳谱图。与标准谱图对照分析,得到多糖的组分成成。     

两种优化的提纯鱼类线粒体DNA的方法

以鱼类的卵巢、肝脏为材料，采用两种方法制备并纯化了线粒体DNA（mtDNA），并进行了琼脂糖电泳检查。结果表明，两种方法都能获取高浓度的mtDNA样品，且收得率都较高。     

鸭肝炎Ⅰ型琼脂扩散试验的研究

本试验用不同的鸭肝炎病料,通过氯仿去脂和反透析法进行病毒的提纯浓缩,研究鸭肝炎的琼脂扩散试验.结果显示用抗原检测抗体或用抗体(血清)检测病毒病原,均可达到80%的阳性检出率.试验中还发现,试验最佳的凝胶配方为pH为7.2,w(NaCl)为8%和琼脂糖的质量分数为1%,病雏鸭肝浓缩抗原最为理想.