血管生成抑制素对体外培养的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

为研究血管生成抑制素对体外培养的血管内皮细胞生长的影响,采用MTT法观察细胞的增殖情况,利用Hoest染色和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果发现血管生成抑制素能够抑制血管内皮细胞的增殖,其IC50为1.19 mg/L,并干扰内皮细胞的周期,出现G0/G1期阻滞。     

几种新的植物甾醇类衍生物对人类癌细胞系增殖的影响

探讨几种新的植物甾醇类衍生物抑制人肝癌细胞系HepG2和人乳腺癌细胞系MCF-7生长及诱导其凋亡的生物学效应.采用形态学观察,溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)还原法和流式细胞仪(FCM)检测3种新的植物甾醇衍生物在不同作用时间、处理浓度时,对HepG2和 MCF-7细胞生长的影响.实验结果表明: 3种新的植物甾醇衍生物对2种细胞系的生长具有明显抑制作用,且呈现一定的对浓度和时间的依赖效应,并具有诱导细胞凋亡的功能.     

流式细胞术检测二甲亚砜对内皮细胞周期的影响

流式细胞术检测二甲亚砜对内皮细胞周期的影响张利华，李方勇，王耀发（华东师范大学河口海岸国家重点实验室上海２０００６２）流式细胞术（ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）是７０年代末发展起来的一种快速高效的单细胞分析及分选的新技术。它在细胞生物学上的一个...     

运动对肝细胞凋亡的影响及干预探讨

不同的运动方式和强度对肝细胞凋亡产生不同影响。本文从耐力训练、低氧训练和急性力竭、大强度训练等方面探讨运动状态下的肝细胞凋亡,从自由基理论、Bax、Bc l-2基因表达和Ca2+浓度等研究热点探讨肝细胞凋亡的机制。目前常采用抗氧化制剂对运动致肝细胞凋亡进行干预,通过清除体内的氧化过氧化产物,达到减少肝细胞非正常凋亡的目的。     

rhNDPK-α蛋白对正常小鼠脾细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨rhNDPK-α蛋白对正常小鼠脾细胞增殖和细胞周期的影响.方法:不同质量浓度的rhNDPK-α蛋白体外作用于脾细胞,通过MTT法和流式细胞术测其增殖和细胞周期.结果:rhNDPK-α蛋白的质量浓度为10～250μg·mL-1时对脾细胞的自发增殖反应有明显的促进作用;10～50μg·mL-1时对PHA诱导的脾细胞增殖有明显的协同作用;50μg·mL-1rhNDPK-α蛋白作用小鼠脾细胞24h后,G0/G1和G2-M期细胞比例明显增加,而S期比例显著减少.结论:rhNDPK-α蛋白可促进脾细胞的存活,很可能通过调控细胞周期而参与细胞的生长调节.     

紫杉醇对体外大鼠肝细胞影响的实验研究

目的:在通过观察紫杉醇对体外培养大鼠肝细胞的影响来探讨紫杉醇自身毒副作用.方法:采用四唑盐(MTT)比色法及形态学方法观察紫杉醇在不同质量浓度下作用不同时间对肝细胞的影响;采用Hoechst 33258荧光染色法观察紫杉醇作用后,肝细胞的形态变化.结果:质量浓度分别为5、10、20、40、80μg/L的紫杉醇分别作用24、48、72 h后,随着质量浓度的增加、作用时间的延长对体外培养的肝细胞损伤加大、抑制率增加;相同质量浓度的紫杉醇不同作用时间的抑制率无时间效应关系;24 h的IC50质量浓度为28.5μg/L,并能诱导肝细胞发生凋亡.结论:紫杉醇在一定的质量浓度和长时间作用下对肝细胞有细胞毒作用.     

钙调素对肿瘤细胞周期的调节作用

利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)研究了钙调素对HeLa细胞周期进程的影响,TFP处理的细胞被阻抑在G_1/S,使S期群体及DNA合成下降,G_2期群体增加.有丝分裂(M)前期细胞减少,中期细胞增加.结果表明钙调素对G_1至S期.G_2至M期和M中期至M后期具有调节作用,钙调素通过细胞周期中上述3个位点对肿瘤细胞增殖进行调节.     

抗草甘膦转基因大豆对雄鼠睾丸的影响

以雄性昆明小鼠为动物模型,分别以抗草甘膦转基因大豆和非转基因大豆饲料喂食,于30、90 d后,取其睾丸.采用流式细胞术检测睾丸组织中各生殖周期细胞比例、Hoechst33258染色观察睾丸细胞凋亡、组织化学染色技术观察睾丸组织病理学变化.研究抗草甘膦转基因大豆对雄鼠睾丸的影响.结果显示,30、90 d实验组和对照组小鼠睾丸精细胞单倍体、2倍体、4倍体比例均正常且趋于稳定,单倍体比例占主导地位,且实验组与对照组相比无统计学差异.在荧光显微镜下实验组睾丸细胞的细胞核呈正常的蓝色,与对照组相比,未发现明显的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染,颜色有些发白的凋亡细胞.组织病理观察也未发现两组小鼠的睾丸出现明显病理损伤.30 d喂食抗草甘膦转基因大豆急性毒理研究和90 d喂食抗草甘膦转基因大豆亚慢性毒理研究对雄鼠睾丸均无显著影响.     

人脐带静脉血管内皮细胞的体外培养及其凋亡的研究

本文从提取生长因子入手，建立人脐带静脉血管内皮细胞系，用电镜进行了细胞鉴定，然后用去除生长因子（FGF和胎牛血清）的方法诱导细胞凋亡，利用荧光显微技术、DNA凝胶电泳、电镜技术和流式细胞分光光度技术，研究了血管内皮细胞凋亡过程中超微结构和细胞周期的变化。发现去除生长因子3h后，在细胞发生明显的DNA片段化和形成凋亡小体的同时，细胞核与细胞质的超微结构发生了明显的变化，S期细胞显著减少，G1期无明显变化，G2细胞显著增多，说明用去除生长因子的方法诱导血管内皮细胞凋亡时，细胞从G2期脱离细胞周期进入凋亡程序，本文的人血管内皮细胞在体外的成功培养和对该细胞凋记的研究对深入研究其凋亡的分子调控机制具有重要的参考价值。     

流式细胞仪法检测4HPR诱导Hela细胞凋亡的百分率

目的：实验结果表明4HPR抑制Hela细胞生长的机理之一是诱导该细胞凋亡。本文用流式细胞仪检测不同浓度的4HPR作用不同时间Hela细胞凋亡的百分比及细胞周期变化。方法：体外细胞培养及流式细胞仪检测法。结果：2μg／m的4HPR作用24、48、72h后,Hela细胞的凋亡百分比分别为4.1％、6．6％、26％;4μg／ml的4HPR分别为5．1％、8．3％、28％、8μg／ml的4HPR分别为5．9％、6．2％、34％。细胞周期分布图中,G1细胞明显减少。结论：上述结果提示Hela细胞凋亡的百分比与4HPR的作用时间、作用浓度呈正相关。     

晚期糖基化终产物对人肝细胞株LO2增殖和凋亡的影响

目的:研究晚期糖基化终产物(AGEs)对人正常肝细胞株LO2的作用.方法:以体外培养的LO2细胞株为研究对象,采用MTT法测定不同质量浓度(0、3.75、7.5、15、30、60 g/L)AGEs对LO2生长的抑制作用,应用流式细胞仪分析细胞的凋亡情况,RT-PCR分析不同质量浓度AGEs处理LO2后其IL-1β,TNF-α,HMGB1的基因转录水平变化.结果:当LO2细胞在AGEs质量浓度分别为3.75、7.5、15、30、60 g/L保温48 h后,细胞的增殖均受到显著性抑制,且抑制作用具有剂量依赖性.流式细胞仪分析发现AGEs促使LO2发生凋亡,凋亡率亦随AGEs浓度增高而增加.RT-PCR方法检测显示,AGEs使LO2细胞中IL-1β,TNF-α,HMGB1的基因mRNA的表达水平增高.结论:AGEs可抑制人正常肝细胞株LO2的增殖和诱导其凋亡,并能上调IL-1β,TNF-α和HMGB1基因的表达.     

白藜芦醇类似物对Bel-7404细胞增殖及凋亡的影响

为研制新型抗肿瘤药物,以3,4-二甲氧基苯乙腈和对甲氧基苯甲醛合成白藜芦醇类似物,并以MTT法、流式细胞仪细胞周期分析、Hoechst33258荧光染色及Western blot方法检测合成的白藜芦醇类似物对肝癌Bel-7404细胞的增殖影响及其机制。实验结果证明,所合成的含甲氧基白藜芦醇类似物可通过诱导Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达上调,引起Bel-7404细胞G2/M周期阻滞,并发生细胞凋亡,最终抑制细胞增殖。     

龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的观察

观察龙葵碱对3种消化系统肿瘤细胞株人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞SGC-7901、人大肠癌细胞Ls-174的细胞毒作用.并从细胞凋亡角度揭示龙葵碱对敏感细胞株的作用机制.采用MTT法观察龙葵碱对3种肿瘤细胞株的细胞毒作用;采用AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微术(confocal)观察龙葵碱对HepG2肿瘤细胞形态的影响;PI单染,流式细胞仪测定龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响.龙葵碱作用于HepG2、SGC-7901、LS-174的IC50分别为14.47μg/mL、(50μg/mL、(50μg/mL;在形态学观察实验中,阴性对照组细胞形态正常,0.003 2μg/mL、0.016μg/mL龙葵碱使细胞外周呈微弱皱缩状改变,0.08、0.4、2μg/mL龙葵碱使HepG2细胞出现大量碎片及凋亡小体等典型的细胞凋亡形态.凋亡率测定结果表明5个剂量龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡率分别为6.0%、14.4%、17.3%、18.9%、32.2%,0.08μg/mL喜树碱诱导HepG2细胞的凋亡率为21.9%.细胞周期观察发现龙葵碱各组G2/M期均消失,S期明显升高.龙葵碱对HepG2人肝癌细胞株比较敏感,能够诱导HepG2细胞凋亡,并将HepG2细胞阻止在S期,影响肿瘤细胞DNA合成.     

稀土铈对电镀镍层的影响

研究了稀土元素铈（Ce）对光亮镍镀液电流效率、分散能力和阴极极化能力的影响；测试了所得光亮镍镀层的表面形貌和镀层的硬度以及在5％NaCl溶液中的阳极极化曲线，讨论了稀土元素Ce对镀层性能的影响。结果表明，Ce^3＋的加入对电流效率影响不大，但提高了镀液的分散能力和阴极极化能力；Ce^3＋的加入可以使镀层晶粒细化，从而提高了镍镀层的硬度和耐蚀性。     

穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响

目的:研究穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨.方法:分离小鼠淋巴结细胞,以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A(Con A)的刺激下,穿心莲内酯对T淋巴细胞早期活化抗原CD69表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色分析穿心莲内酯对T淋巴细胞增殖的影响;用碘化丙锭染色分析细胞周期的分布.结果:终浓度为10、20、30、40 μmol/L的穿心莲内酯对Con A刺激的早期活化抗原CD69的表达具有明显的抑制作用(P<0.01);对Con A刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01);并明显阻止T淋巴细胞进入S期,且呈剂量依赖性.结论:穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,并抑制T淋巴细胞进入分裂周期.     

小鼠胚胎发育中期肝细胞增殖与凋亡

探讨小鼠胚胎中期肝发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律，相关基因P21及Ki-ras在肝发育中的表达意义，在胚胎中期的小鼠肝组织中，采用免疫组织化学及切口末端标记法，可检测到小鼠肝发育过程中的细胞增殖与凋亡相伴存在，这与肝发育变化密切相关，用原位杂交的方法检测到P21时，Ki-ras基因在胚胎肝发育中期并没有表达，说明这两个细胞周期调控基因可能在胚胎肝发育中期并不起作用，而与其他的基因有关。     

磁感应热疗联合艾迪对Daudi细胞作用的研究

 为研究磁感应热疗联合艾迪注射液对人淋巴瘤Daudi细胞的作用,首先进行磁性介质对Daudi细胞生物相容性的研究以及磁性介质升温性能的检测,运用CCK-8法测出不同艾迪药物质量浓度对细胞增殖率的影响选出本实验工作浓度,将对数生长期的人淋巴瘤细胞Daudi分别暴露于磁场、艾迪注射液、磁场与艾迪联合作用下,采用流式细胞技术分析各组实验作用下对细胞凋亡、细胞周期的影响。结果表明：本实验选用的不锈钢空心球具有良好的发热效率以及细胞相容性;本研究选用75 mg/mL作为工作浓度;磁感应热疗作用Daudi细胞后,细胞存活率为（78.48±0.95）%,联合艾迪注射液治疗后,细胞存活率为（9.25±2.05）%（P<0.01）;磁感应热疗联合艾迪注射液能够增加细胞凋亡率,而对细胞周期改变不明显。由此可知,磁感应热疗磁性介质应用于淋巴瘤治疗在细胞水平是可行的;磁感应热疗单独使用可以诱导Daudi细胞凋亡,艾迪注射液与其联合应用时能表现出协同抗淋巴瘤细胞作用。     

应用Sub-G1法和PA法分析HL-60细胞自发凋亡的周期特异性

分别用Sub-Gl法和PA法对人类早幼粒细胞急性白血病细胞株（HL－60）的自发凋亡进行检测，发现HL－60细胞自发凋亡时，在DNA直谆图上，G1峰前出现亚G1峰（Sub-Gl峰），G1期细胞增加，S期和G2／M期细胞减少。同时G1期细胞发生自发凋亡，而S期，G1期细胞少有凋亡发生。这对研究肿瘤细胞发生凋亡的死亡机制及临床治疗有重要意义。     

PTTG1在肝细胞癌中的分子机制研究

肝细胞癌（HCC）是癌症最常见的一种预后不良的原发性肝癌,也是癌症相关死亡的主要原因.垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在多种癌症中过表达.本研究为了评估PTTG1在HCC患者中的表达和预后价值.使用GEPIA(gene expression profiling interactive analysis)数据库分析PTTG1的蛋白表达及其预后特征.KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析发现PTTG1的相关信号通路.采用免疫组织化学方法比较PTTG1在正常肝组织和肝癌组织中的表达.采用流式细胞术、western blot和CCK-8方法评估两种癌症细胞系和正常肝细胞系中PTTG1的分子生物学的功能.采用细胞划痕实验方法评估PTTG1对细胞迁移的影响.GEPIA数据库分析表明, PTTG1在肝癌组织中表达上调并且PTTG1的表达与肝癌细胞的增殖能力呈正相关.另外,细胞实验发现PTTG1被敲低后显著抑制细胞增殖、阻碍细胞迁移、抑制细胞周期、促进细胞凋亡.因此, PTTG1在肝细胞癌的发生以及病程进展中的作用至关重要,可能是肝细胞癌转移...