用扫描电镜观察裸甲藻的方法研究

将多聚甲醛固定的裸甲藻(Takayama pulchellum,TPXM)细胞采用离心法收集,进行小梯度的酒精结合离心法逐级脱水,临界点干燥并真空喷金后,能够在扫描电镜(SEM)下很好地显示出T.pulchellum细胞的完整形态和细微结构,如纵鞭毛、横沟、顶沟、顶突、带状物、藻体线纹、腰鞭毛等;同时环境扫描电镜(ESEM)也能对裸甲藻进行较好的形态学观察,但环境样品的ESEM和SEM电镜观察条件尚需要进一步完善.     

基于18S rDNA序列鉴定北部湾养殖区引发藻华的一株原甲藻

高度保守的核糖体18SrDNA序列可用于经济快捷且精确地鉴定浮游植物的种类。2018年夏季,广西北部湾近海的对虾养殖区内发生了原甲藻引起的藻华,藻华的优势种密度为5.5×105 cells·L~(-1),本文采用形态学观察法结合序列分析鉴定的方法来鉴定该藻的种类。结果表明,在形态上,这株分离培养获得的原甲藻(编号BBGA-9003),其大部分细胞类似心形或卵形,少部分细胞近似三角形,鞭毛2条,细胞长和宽分别为(16.55±1.42)μm和(13.84±1.86)μm。该原甲藻经18SrDNA基因序列测定并进行BLAST分析,结果表明该原甲藻序列和GenBank中56株不同种原甲藻具有很高的同源性,在系统进化树上与不同来源的微小原甲藻聚在一大分支上,且与各微小原甲藻间的遗传距离均小于与其他种间的遗传距离。因此,从分子生物学的角度鉴定该株原甲藻属于微小原甲藻,此种藻华的发生意味着北部湾养殖区有害藻华种类多样性的增加。本研究为18SrDNA序列测定用于海洋浮游植物种类鉴定提供了实验依据,也为广西北部湾养殖区有害藻华的防治提供基础资料。     

实验条件下原甲藻与中肋骨条藻种间相互作用研究

微藻化感作用是一种极其复杂的生理、生态学现象,其在解释微藻藻种分布、群落结构及种群动力学方向起着关键作用。选择我国典型常见赤潮优势种原甲藻(Prorocentrum micans)与中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)作为对象,研究实验室共培养条件下2种微藻种间相互作用关系。结果表明:两者以1×104 cells/mL的密度接种共培养时,原甲藻的生长状况几乎没有显著变化(F=0.004 48,P=0.947 96>0.05),而共培养的中肋骨条藻被原甲藻强烈抑制致死(F=5.116 63,P=0.047 21<0.05)。Lotka-Volterra双藻竞争模型分析知,共培养条件下原甲藻的种间竞争能力大于中肋骨条藻的种间竞争能力。在去藻滤液实验中,灭菌处理及未经灭菌处理的原甲藻去藻滤液对中肋骨条藻的生长都没有显著影响(P>0.05);中肋骨条藻-原甲藻共培养体系的去藻滤液经灭菌处理及未经灭菌处理培养中肋骨条藻时,中肋骨条藻的生长也没有显著变化(P>0.05)。可见,中肋骨条藻与原甲藻共培养时的种间相互作用,可以由细胞间的直接接触进行,而并不需要通过介质来完成。     

氮磷比对两种赤潮藻生长特性的影响

研究了两种赤潮藻即赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）和东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense）在不同氮磷比培养条件下的生长特性,探讨了氮磷含量及比值对赤潮爆发的影响机理。结果表明,在试验条件下赤潮异弯藻的比生长速率与N源浓度之间的关系符合Monod公式（P〈0.001）,氮磷比在25和50时藻细胞密度高于其他比值的藻细胞浓度,说明该氮磷比是赤潮异弯藻最佳生长营养盐条件。对东海原甲藻而言,在以NaNO3为N源时,氮磷比为40时藻细胞密度高于其他比值的藻细胞浓度,说明该氮磷比是东海原甲藻最佳生长营养条件。     

东海原甲藻的培养及色素分离分析

以自行培养的赤潮藻东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense Lu）为材料,采用薄层层析（TLC）和高效液相色谱（HPLC）法对稳定生长的藻体色素进行了分离和分析．结果显示,东海原甲藻适宜生长于18—22℃,经活化、培养,一般于接种后的第4—5天进入稳定生长期．采用硅胶薄层层析方法（最适展层剂配比为石油醚：乙酸乙酯：乙醚：乙醇=20：6：3：2）从藻体色素抽提液中成功地分离到12条色素带,经颜色、极性、迁移率比对,以及荧光观察和吸收光谱分析,确定为1条Chla、1条ChlC2、1条β-胡萝卜素、1条去镁Chlα、1条多甲藻素以及硅甲藻黄素和硅藻黄素等其他4条叶黄素带,此外还有2—3条Chla或ChlC2衍生物带．进一步摸索了反相C18柱高效液相色谱（HPLC）分离东海原甲藻色素的条件,选用440nm波长检测,可得到至少30种组分．分离结果为进一步了解东海原甲藻的生长和光合特性以及赤潮研究提供了理论依据．     

塔玛亚历山大藻溶血毒素对东海原甲藻的化感作用

为明确塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)对东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)生长的化感作用,揭示塔玛亚历山大藻和东海原甲藻的藻间竞争关系,本研究探讨了不同营养盐条件下塔玛亚历山大藻无藻细胞滤液中溶血毒素对东海原甲藻生长的影响.研究发现,塔玛亚历山大藻的无藻细胞滤液中溶血毒素对东海原甲藻的生长有显著的抑制作用;无藻细胞滤液中溶血毒素的活性强弱依次为:N-限制,Fe-限制,富营养与P-限制;溶血毒素的抑制作用大小与溶血毒素活性强弱一致.提示溶血毒素在塔玛亚历山大藻的化感作用中可能扮演重要角色.     

杜氏藻Dunaliellapeircei超微结构研究

两类糖蛋白纤维构成了Dunaliella peirces的细胞外被,鞭毛和基本分别为“9+2”和“9+0”结构,首次发现的中心粒由9个三联体组成,高尔基体1～2个,眼点位于细胞质中,由二排椭圆形小球构成,内质网丰富,线粒体形状多样,在“杯形”叶绿体中发现了雏形的基粒及“杯”上的小孔,叶绿体前端凹凸不平,后端具大型淀粉核一个,细胞核位于“杯形”叶绿体的凹窝中。     

重组蓝细菌藻蓝蛋白RpcA共价偶联多种藻胆色素

利用建立的藻胆蛋白大肠杆菌异源表达系统,证明了Synechococcus sp.WH8102的藻蓝蛋白α亚基RpcA能分别结合蓝细菌中的4种藻胆素.裂合酶RpcG利用PCB或PEB做色素底物,连接它们到RpcA上,并伴随着异构作用,分别生成色素蛋白PVB-RpcA、PUB-RpcA;但裂合酶CpcE/CpcF利用PCB或PEB做色素底物,连接它们到RpcA上,则分别生成了色素蛋白PCB-RpcA、PEB-RpcA.后者荧光量子产率较高.2种裂合酶使用2种不同的色素底物,可以产生4种完全不同的、仅偶联到RpcA的色素蛋白.RpcG和CpcE/CpcF的对比研究可以探讨裂合酶异构功能的结构基础.同时这些色素蛋白有潜在的应用价值,可以作为生物学荧光探针。     

饶氏藻属(JAOA)的形态学初步研究

本文对泡状饶氏藻的模式产地及贵州部分地区所采饶氏藻属(JaoaFan)植物标本形态结构进行观察,结果表明饶氏藻属植物外形为近球形的盘状或不规则囊状的假薄壁组织体,原植体由2层或3层细胞组成,具1个周生片状的色素体,外层细胞表面具或不具表皮毛,无性生殖产生2根或4根鞭毛的动孢子,根据其形态结构特征,其系统位置属于丝藻目(Ulotrichineae)。     

藻蓝色素蛋白通过调控miR-642a-5p抑制LTEP-a2细胞的增殖和迁移

研究藻蓝色素蛋白抑制非小细胞肺癌LTEP-a2体外增殖迁移的机制.以LTEP-a2细胞为模型,采用高通量miRNA转录组学对藻蓝蛋白处理后细胞中差异表达的miRNA进行了筛选;对筛选出的差异miRNA,利用体外转染mimics的方法对细胞的增殖、迁移能力进行验证.研究结果显示,藻蓝蛋白处理LTEP-a2细胞后能够显著增加细胞内miR-642a-5p的表达水平;过表达miR-642a-5p能够显著抑制细胞的体外增殖、迁移能力;此外,藻蓝蛋白可以通过上调miR-642a-5p表达抑制核受体NF-κB信号通路,降低蛋白磷酸化水平,进而抑制LTEP-a2细胞的增殖迁移能力.研究能够为藻蓝色素蛋白的应用以及非小细胞肺癌的治疗提供一定的理论基础.      

渗透胁迫对甘薯叶绿体超微结构及其膜脂过氧化的影响

用不同浓度的ＰＥＧ对甘薯进行根际渗透胁迫处理，研究了对叶绿体超微结构和膜脂过氧化的影响．结果表明，经不同浓度的ＰＥＧ渗透胁迫２４ｈ后，叶片细胞质膜透性、ＭＤＡ含量增加，ＣＡＴ活性升高；ＳＯＤ活性表现出品种抗旱适应特性．相同的渗透胁迫条件对抗旱性较强的渝薯２０的超微结构破坏明显小于抗旱性较弱的农大红．试验结果综合阐明了由渗透胁迫引发的活性氧累积对甘薯叶绿体膜结构具有强烈的损伤作用     

绿眼虫（Euglena Viridis）的超微结构

应用光镜，透射电镜和扫描电镜对绿眼虫的超微结构进行了观察，观察结果表明，绿眼虫的细胞膜具有特化的螺旋状条纹结构，细胞器如叶绿体，线粒体和细胞核等也与高等真核细胞明显不同。     

银杏叶细胞的亚显微结构简报

用透射式电子显微镜对银杏叶片和叶柄细胞进行了观察,这些细胞的叶绿体大而多,片层结构发达;细胞核小而扁平,核质松散,内质网,高尔基体和微体则很少发现,并对此进行了分析。     

盐度对盐生杜氏藻叶绿体超微结构的影响

研究不同盐度对盐生杜氏藻（ Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａｓａｌｉｎａ（ Ｄｕｎａｌ．） Ｔｅｏｄ ．） 叶绿体超微结构的影响．结果显示,在ＮａＣｌ 浓度为２ ．７ ｍｏｌ／Ｌ 的培养液中,其叶绿体为典型的杯状结构．在ＮａＣｌ 浓度从２ ．７ ｍｏｌ／Ｌ 增加到４ ．３ ｍｏｌ／Ｌ时,其杯状叶绿体逐渐离解为多个相互连结或分离的部分;叶绿体内的类囊体片层系统解体并出现大量的嗜锇质体小球;在分离的叶绿体间隙中形成多个线粒体．在培养液的ＮａＣｌ 浓度逐步从４ ．３ ｍｏｌ／Ｌ 降低到２ ．７ ｍｏｌ／Ｌ后,盐藻的叶绿体又逐步恢复为典型的杯状结构．由此可知,不同盐度下盐藻叶绿体的结构变化是一个可逆的过程,这种可逆变化是盐藻得以在高盐度,强光照,易蒸发的自然环境中生存的一种适应机制．     

Chloroplast to nucleus communication triggered by accumulation of Mg-protoporphyrinIX

Plant cells coordinately regulate the expression of nuclear and plastid genes that encode components of the photosynthetic apparatus. Nuclear genes that regulate chloroplast development and chloroplast gene expression provide part of this coordinate control. There is evidence that information also flows in the opposite direction, from chloroplasts to the nucleus. Until now, at least three different signalling pathways have been identified that originate in the plastid and control nuclear gene expression but the molecular nature of these signals has remained unknown. Here we show that the tetrapyrrole intermediate Mg-protoporphyrin (Mg-ProtoIX) acts as a signalling molecule in one of the signalling pathways between the chloroplast and nucleus. Accumulation of Mg-ProtoIX is both necessary and sufficient to regulate the expression of many nuclear genes encoding chloroplastic proteins associated with photosynthesis.     

Direct measurement of the transfer rate of chloroplast DNA into the nucleus

Gene transfer from the chloroplast to the nucleus has occurred over evolutionary time. Functional gene establishment in the nucleus is rare, but DNA transfer without functionality is presumably more frequent. Here, we measured directly the transfer rate of chloroplast DNA (cpDNA) into the nucleus of tobacco plants (Nicotiana tabacum). To visualize this process, a nucleus-specific neomycin phosphotransferase gene (neoSTLS2) was integrated into the chloroplast genome, and the transfer of cpDNA to the nucleus was detected by screening for kanamycin-resistant seedlings in progeny. A screen for kanamycin-resistant seedlings was conducted with about 250,000 progeny produced by fertilization of wild-type females with pollen from plants containing cp-neoSTLS2. Sixteen plants of independent origin were identified and their progenies showed stable inheritance of neoSTLS2, characteristic of nuclear genes. Thus, we provide a quantitative estimate of one transposition event in about 16,000 pollen grains for the frequency of transfer of cpDNA to the nucleus. In addition to its evident role in organellar evolution, transposition of cpDNA to the nucleus in tobacco occurs at a rate that must have significant consequences for existing nuclear genes.     

蕨游动精细胞的研究

电镜研究表明蕨精细胞在发育早期为多角形细胞，具有细胞壁，多层结构和微管，但不具鞭毛，核圆形或椭圆形，随着精细胞的发育，质膜退缩远离细胞壁，在细胞壁和质膜之间质下一个空间，细胞核螺旋化并有大量鞭毛形成，最后精细胞发育形成具有鞭毛的游动精子。     

Cr~(6+)、As~(3+)污染对黑藻叶细胞伤害的超微结构研究

电镜观察发现 ,黑藻 (Hydrillaverticillata(L .F .)Royle)叶细胞遭受Cr6+ 、As3 + 毒害初期 ,高尔基体消失 ,内质网膨胀后解体 ,叶绿体中的类囊体和线粒体中的脊突膨胀 ,核中染色质凝集 .随着叶细胞毒害程度的加重 ,核仁消失 ,核膜破裂 ,叶绿体和线粒体解体 ,质壁分离使胞间连丝拉断 ,最后细胞死亡 .结果表明 :Cr6+ 、As3 + 对细胞的膜结构与非膜结构都产生毒害作用     

Morphological and phylogenetic analysis of a <Emphasis Type="Italic">Gymnodinium</Emphasis>-like species from the Chinese Coast

A Gymnodiniurn-like species was studied with light microscopy （LM） and scanning electron microscopy （SEM）. Also, the internal transcribed spacers （containing 5.8S rDNA） and large ribosomal subunit DNA （D1-D2） sequences were obtained by PCR amplification, and then sequenced to explore the relationships within our isolate, Gymnodinium and other Gymnodiniurn-like species, including Karenia, Gyrodinium, Karlodinium and Symbiodinium. The LM observation showed that the species was characterized by moving in a levorotatory direction, visible hypocone, epicone and transverse groove, all of which are typical for Gymnodinium. In addition, two flagella could be found under SEM. The phylogenetic analysis revealed that the isolate grouped with Symbiodium, rather than other relevant dinoflagellates. All results showed our isolate belongs to Symbiodium. The strain was isolated from a red tide water sample, denoting that Symbiodium may be causative species for algal bloom.