裙带菜原生质体的分离和培养

本文以裙带菜(Undaria pinnatifida(Harv)Suringat)为材料，进行原生质体分离和培养研究。取得以下结果：1、使用海螺酶(sca snail enzymes)和纤维素酶(cellulase，Onozuka R-10)，酶解裙带菜细胞壁，在一定的条件下，能够大量地分离成活的裙带菜原生质体。2、实验表明，氯化钠可作为分离裙带菜原生质体研究中的一种理想的渗透剂。3、荧光增白剂染色镜检法可作为鉴定裙带菜原生质体的一种辅助方法，并适用于原生质体再生壁的观察。4，光照(2000-2500Lux)能促使原生质体再生细胞壁，含有蔗糖(W／V，1％)的培养液有助于原生质体再生细胞壁。5、分离的裙带菜原生质体，经培养，已能长成幼体。     

温胆汤对高脂血症大鼠及小鼠体内脂质代谢调节机理研究

目的 :探求温胆汤对实验动物体内脂质代谢调节作用的机理。方法 :采用腹腔注射蛋黄乳剂的方法建立急性高脂血症小鼠模型 ,观察温胆汤对急性高脂血症成年小鼠粪便脂质含量、血清总胆固醇 (TC)、血清总甘油三酯 (TG)、低密度胆固醇 (LDL c)含量、血清丙二醛 (MDA)含量、血清超氧化物歧化酶 (SOD)活性、肝脏总脂解酶(LA)活性、脂蛋白脂肪酶 (LPL)活性和肝脂酶 (HL)活性的影响 ;建立大鼠高脂血症模型 ,观察温胆汤对大鼠血脂(TC、TG)水平、总脂解酶 (LA)、脂蛋白脂酶 (LPL)和肝脂酶 (HL)活性 ,以及肝脏低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因表达的影响。结果 :温胆汤可降低小鼠粪便脂质含量 ,显著降低急性高脂血症小鼠血清TC、TG、LDL c含量 (P <0 .0 5 ) ,温胆汤还可提高血清SOD活性 ,降低MDA含量 ,达到降低体内脂质过氧化程度的目的。同时 ,温胆汤可提高肝脏脂蛋白脂肪酶 (LPL)活性和肝脏总脂解酶 (LA) ,但对肝脂酶 (HL)活性无明显影响。在针对高脂血症大鼠的实验研究中发现 ,温胆汤能够显著抑制大鼠血清总胆固醇 (TC)、血清总甘油三酯 (TG)浓度 ,提高脂蛋白脂酶(LPL)和总脂解酶 (LA)活性 ,但对肝脂酶 (HL)活性无明显影响 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)实验显示高脂饲料能显著降低大鼠肝脏LDLRmRNA水平 ,温胆汤能显?     

胆固醇和脂肪酸对CYP7A1的调节

胆固醇7α-羟化酶是胆固醇转化为胆酸过程中的关键酶，对维持机体的胆固醇内环境稳定起着重要作用。胆固醇对7α-羟化酶有诱导作用，在种属之间有很大差异。新近发现胆固醇并不单独决定该酶的活性，膳食中的脂肪酸和胆固醇的组合最终决定该酶的活性。这些调节作用主要通过LXRα、RXRα和PPARα对胆固醇的7α-羟化酶在转录水平调节实现。     

柞蚕中β-蜕皮激素的功能性研究

为了充分开发柞蚕资源，通过动物实验对柞蚕中β-蜕皮激素的功能性进行研究。结果表明，β-蜕皮激素可明显降低血清中甘油三酯、胆固醇和血糖的水平（P〈0.01）。     

胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ)螯合物对四氧嘧啶诱发小鼠糖尿病的保护作用

研究胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物对四氧嘧啶诱发小鼠糖尿病的保护作用。通过腹腔注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型，观察胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物对糖尿病小鼠糖代谢（空腹血糖）及脂代谢（甘油三酯，胆回醇，高密度脂蛋白胆固醇，低密度脂蛋白胆固醇）的影响。实验结果表明，胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物显著降低糖尿病小鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平。提高高密度脂蛋白胆固醇水平。说明胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物对四氧嘧啶诱发的小鼠糖尿病具有显著的保护作用。     

“脾主肌肉”的生化研究──若干酶指标活性的测定

为了探讨“脾主肌肉”的机理，利用脾气虚的模型动物，测定肌肉、血液中与肌肉能量代谢物质代谢有关酶活性的变化，从这些指标的变化来了解脾与肌肉的关系。脾气虚模型动物制作是依据我所已建立的模型。通过实验发现，脾气虚模型动物肌肉中能量代谢和物质代谢水平明显低于正常组。肌肉抽提液内源性ＡＴＰ（三磷酸腺苷）的含量，磷酸肌酸激酶活性，这些与能量代谢有关的指标，脾气虚组明显低于正常组。而与肌肉物质代谢有关的酶：乳酸脱氧酶、谷丙转氨酶、α－羟丁酸脱氢酶等酶的活性，脾气虚组也明显低于正常组。根据脾气虚模型动物实验表明：脾气虚，机体运化功能不足，肌肉中能量供应不足，物质合成低下，造成肌瘦无力。该实验方法为更深入地探讨“脾主肌肉”机理开创一条新路。     

不同海藻凝集素对鲤免疫活性物的诱导作用

以条斑紫菜（Porphyra yezaensis）和裙带菜（Undaria pinnatifida）的凝集素作为免疫增强剂,来研究它对鲤免疫活性的诱导作用．实验结果表明,投喂和灌喂凝集素后,鲤血清中凝集素、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、溶菌酶活性与对照组相比都有提高,其中投喂条斑紫菜凝集素组比投喂对照组依次提高3．0倍、0．8倍、3．9倍、1.0倍;投喂裙带菜凝集素组比投喂对照组依次提高1.0倍、0．4倍、3．0倍、0．7倍,灌喂裙带菜凝集素组比灌喂对照组依次提高3．0倍、0．3倍、1．8倍;灌喂条斑紫菜凝集素组比灌喂对照组依次提高3.0倍、0．7倍．由此可看出：两种凝集素都可以作为一种免疫添加剂激活鲤的免疫系统,对鲤的非特异性免疫功能具有明显的增强作用．其中投喂条斑紫菜的效果更好．     

半乳糖寡糖的生物活性

对利用固定化β－半乳糖苷酶连续合成的半乳糖寡糖进行了有关生物活性的研究。通过双歧杆蓖培养实验和动物试验证实了半乳糖寡糖具有高效，专一地促进双歧杆菌生长，改善动物肠道内菌群分布，促进钙的吸收，提高食物的转化率，降低血清胆固醇含量及盲肠内ｐＨ等生物活性。     

胆固醇传感器的研究

首次提出了用猪小腿皮中提取的胶原纤维作载体，采用电解包埋并辅以戊二醛交联的酶固定化方法制备胆固醇氧化酶膜，并与氧电极配合制备了游离胆固醇单酶传感器．在所选择的最佳试验条件下用于血样分析，对游离胆固醇的测定结果，与酶法测定总胆固醇值范围相符     

蚕蛹多肽保健功能的研究

目的 :研究蚕蛹多肽的营养价值及其生物保健功能。方法 :通过动物喂养试验 ,观察其对小鼠生长的影响 ,检测小鼠血清胆固醇 ,MDA及 SOD酶活力等生化指标的变化情况。结果 :多肽加高胆固醇组与高胆固醇组比较 ,其血清胆固醇水平存在极显著差异 ,而与空白组比较 ,MDA水平具有降低的迹象 ,SOD酶活力明显升高。结论 :蚕蛹多肽具有降低血清胆固醇作用 ,使高胆固醇达到正常范围 ,并具有抗氧化作用     

大型海藻对石油烃的降解技术研究

研究了海带、裙带菜、带形蜈蚣藻和孔石莼等4种大型海藻对不同浓度(0.8、1.7、2.6、3.6、4.5 mg·L-1)石油烃的降解率及石油烃对大型海藻超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明,海带和裙带菜在低浓度(≤1.7 mg·L-1)的石油烃中生长良好,并且对石油烃的降解率较高,海带、裙带菜对石油烃的降解率分别为76.3%～81.3%、82.2%～87.5%。同时在低浓度(≤1.7 mg·L-1)时石油烃虽然会导致海带和裙带菜的SOD活性升高,但最终会恢复到正常范围,是一种可逆的损伤,高浓度的石油烃会对海带和裙带菜造成不可逆的生物损伤。因此,海带和裙带菜可作为低浓度(≤1.7 mg·L-1)石油污染的降解生物,具有一定的应用价值。     

裙带菜的海上直接采苗养成技术

裙带菜藻体柔嫩,滋味鲜美爽口,营养丰富,有明显的降低胆固醇、增强血管弹性的功效,作为一种健美强体的食用海藻近年来颇受国内外消费者的欢迎。我省人工养殖裙带菜的面积也逐年增加,1992年已达5000多亩,产量1.3万吨。 1991年烟台市水产研究所根据裙带菜的生态习性,结合前人的研究成果,研究成功了裙带菜的海上直接采苗养成技术。该项技术不需用育苗室和育苗器材,     

粘球藻(Gloeocapsa sp.)细胞粗提物放氢特性研究

粘球藻培养物细胞破碎后,经一段时间的厌氧保温处理,可诱导出较高的氢酶放氢活性。在常温厌氧条件下放置数日后,这种酶粗制剂仍可利用连二亚硫酸钠/甲基紫精作为电子供体放氢。内源电子供体放氢活性的高低与细胞破碎前内部光合产物积累水平有关,前期的暗饥饿可明显降低这种放氢,细胞破碎前后外加糖源均可提高放氢。酶反应最适温度为55℃,最适pH在6.5左右,不依赖于光,受CO、O_2和C_2H_2的抑制。这种氢酶放氧活性的诱导出现受蛋白合成抑制剂的阻止。     

"吃”去多余血脂的食物

茶可降低血脂和胆固醇，增强微血管壁的韧性，抑制动脉粥样硬化。云南产的沦茶，每天饮3杯，即可使血液中的脂肪大大降低。惠蒜洋葱含前列腺素，有舒张血管、降低血压之功能，还可预防动脉粥样硬化。大蒜所合大蒜精油具有降脂效能，大蒜所含硫化合物的混合物可减少血中胆固醇和阻止血栓形成，有助于增加高密度脂蛋白，保护心脏动脉。苹果含有丰富的钾，可排除体内多余的钠盐，如每天吃3个以L苹果，即能维持满意的血压。牛奶含较多的钙质，能抑制人体胆固醇合成酶的活性，也可减少人体对胆固醇的吸收。燕麦含极丰富的亚油酸和丰富的皂贰素，…     

皂荚素对大鼠DNA损伤的干预及对血清胆固醇的影响

为了探究皂荚素对高胆固醇模型大鼠抗氧化能力和DNA损伤以及对大鼠血浆胆固醇及相关血脂生化指标的影响,将48只健康大鼠,随机分为对照组、低浓度皂荚素组和高浓度皂荚素组,各组分别喂饲皂荚素质量比分别为0,80,200 mg/kg的饲料,制作由不同浓度H₂O₂(0,6,12,18 μmol/L)诱导的DNA损伤兼高胆固醇大鼠模型.实验期限为60 d,实验结束采血,应用试剂盒检测血清丙二醛(MDA)水平和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,并采用单细胞凝胶电泳法测定淋巴细胞DNA的损伤情况.结果显示,与对照组比较,低浓度皂荚素组、高浓度皂荚素组MDA含量和血清GSH活性差异均具有统计学意义;低浓度皂荚素组和高浓度皂荚素组大鼠血清总胆固醇TC、甘油三酯(TG)、载脂蛋白B(apoB)的含量都有明显的降低,尤其以高浓度皂荚素组最为显著;两组大鼠的胆汁酸排泄量增加,载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平影响差异无统计学意义.说明皂荚素可有效降低血浆胆固醇水平,对于健康幼年大鼠血清GSH及脂质过氧化产物MDA含量有显著影响,对H₂O₂诱导的DNA损伤也表现出明显的保护作用.     

裙带菜多糖的结构及抗氧化、免疫调节活性

采用水提醇沉法制备裙带菜多糖(UPP),提取率为11.00%±0.25%,UPP由葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、鼠李糖组成,分子质量为691.05 ku.体外抗氧化实验测得UPP的氧自由基吸收(ORAC)能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力分别为164.54±4.85μmol/g(以Trolox为标准品计)、64.93±4.76和46.80±6.06μmol/g(后两者均以Trolox为阳性对照).选用RAW264.7细胞对UPP的体外免疫调节活性进行研究,发现UPP在50～1 500 mg/L质量浓度范围内对该细胞无明显毒性,且可显著增强该细胞的吞噬能力,当UPP质量浓度为600 mg/L时,相对细胞吞噬能力达113.22%±2.75%.当UPP质量浓度为600 mg/L时,促RAW264.7细胞释放NO量达12.60±1.01μmol/L;UPP在100～800 mg/L的质量浓度范围内可显著上调诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达量.以上研究结果表明,裙带菜多糖具有良好的体外抗氧化能力和免疫调节活性,可应用于保健食品的工业生产中.     

超声辅助酶解法制备兔肉抗氧化肽工艺

以搅碎的兔肉末为原料，以超声辅助酶解制备抗氧化肽，对其抗氧化活性进行评价，发现抗氧化活性较好.比较不同酶制备的抗氧化肽的DPPH自由基清除率，从胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中筛选出最佳用酶，利用单因素实验和响应面法优化了兔肉酶解的工艺条件.结果表明，酶解效果最好的是胰蛋白酶，在超声时间22.5 min,超声温度37℃,超声功率330 W的条件下酶解得到的抗氧化肽DPPH自由基清除率最好，为81.17%,与响应面优化实验回归模型的预测值基本一致；在此基础上制备兔肉抗氧化肽，对酶解液的ABTS、羟基自由基和超氧阴离子清除率进行检测，值分别为44.03%、94.69%和34.32%,均大于未酶解液.该研究可以为制备兔肉抗氧化肽方面提供理论依据和数据支持.     

啤酒酵母培养条件对ATP生产的影响：I.供氧对酵母合成ATP活？…

结合酵母细胞酶促合成ＡＴＰ的活性测试，在５Ｌ发酵罐中培养啤酒酵母，考察了通气对菌体生长和细胞活性的影响。实验结果表明：通气量的变化，对菌体的生长速度和得率具有明显的调节作用；采用氧限制方法培养的啤酒酵母用于ＡＴＰ生产时得率可达到１００％。通气量６．０Ｌ／（Ｌ·ｈ）时培养的酵母细胞用于ＡＴＰ生产的效率比在通气量６０Ｌ／（Ｌ·ｈ）下培养的酵母细胞提高５０％以上。     

海带和裙带菜硝酸还原酶活性比较

试验海带和裙带菜孢子体在不同部位、不同生长期硝酸还原酶的活性。指出两种藻硝酸还原酸的活性随年龄增长而增强，叶片横向和纵向酶活性分布。阐明生长在不同水层的海带在同一部位酶活性的差异。     

啤酒酵母培养条件对ATP生产的影响 Ⅰ.供氧对酵母合成ATP活性的影响

结合酵母细胞酶促合成ＡＴＰ的活性测试，在５Ｌ发酵罐中培养啤酒酵母，考察了通气对菌体生长和细胞活性的影响。实验结果表明：通气量的变化，对菌体的生长速度和得率具有明显的调节作用；采用氧限制方法培养的啤酒酵母用于ＡＴＰ生产时得率可达到１００％。通气量６．０Ｌ／（Ｌ·ｈ）时培养的酵母细胞用于ＡＴＰ生产的效率比在通气量６０Ｌ／（Ｌ·ｈ）下培养的酵母细胞提高５０％以上。