铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗研究

目的:筛选适宜铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗的培养基,提高继代扩繁系数和组培苗的质量.方法:在相同的培养条件下,把相同发育阶段的原球茎接种于含不同激素比例的培养基中生长;把丛生芽接种于蔗糖浓度不同的培养基中生长;把相同高度的幼苗接种于含不同附加物的培养基中生长;对结果所产生的不同生长状况进行综合分析.结果:原球茎的增殖以1/2MS添加BA2.0mg/L NAA0.5mg/L或BA3.0mg/L NAA0.5mg/L的激素比例为佳;原球茎分化以1/2MS添加BA2.0mg/L NAA0.2mg/L或BA3.0mg/L NAA0.2mg/L的激素比例为佳;丛生芽的生长中以30%蔗糖浓度的培养基为佳;生根壮苗中最佳的附加物为香蕉.     

黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究

对黑节铁皮石斛的原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根进行了初步的研究,以期为黑节铁皮石斛的人工繁殖提供理论指导。采用植物组织培养和单因子试验的方法,获得了黑节铁皮石斛带芽茎段最佳的消毒方式为70%酒精处理30s后再用0.1%HgCl2处理20min。黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS＋KT1mg/L＋NAA0.1mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎再分化的最佳培养基为MS＋KT2mg/L＋NAA0.5mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段腋芽萌发的最佳培养基为MS＋KT2mg/L＋NAA0.5mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段生根的最佳培养基为1/2MS＋NAA0.5mg/L。这些实验结果为黑节铁皮石斛试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。     

影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素

比较了不同无机盐浓度、不同碳源和不同pH 值对铁皮石斛原球茎生长的影响。实验结果表明:铁皮石斛原球茎生长较适宜的培养基为MS NAA1 mg·L- 1 w = 3% 蔗糖(pH为5 .0) 。     

铁皮石斛组织培养技术研究进展

铁皮石斛是一种珍稀的药用植物,具有广阔的市场前景。文章从铁皮石斛无菌播种、原球茎诱导、增殖及分化、壮苗生根、丛生芽的诱导、离体开花、人工种子与种质资源保存、四倍体诱导等方面对其组培技术研究进展进行总结,并对铁皮石斛组织培养技术的研究开发前景进行了展望。     

铁皮石斛组培苗生根壮苗培养基的优化筛选研究

目的筛选铁皮石斛组培苗生根壮苗的适宜培养基。方法在相同的培养条件下,将铁皮石斛相同高度幼苗接种于9种不同的培养基中,记录各组组培苗的生长情况;采用紫外分光光度法测定各组组培苗的多糖含量并进行综合分析。结果铁皮石斛组培苗的生根壮苗以1/2 MS+土豆泥+0.5 mg-1·L BA+0.2 mg-1·L NAA+活性炭+花宝1号+3%蔗糖或1/2 MS+土豆泥+0.3 mg-1·L BA+0.15 mg-1·L NAA+活性炭+花宝1号+3%蔗糖的培养基为佳。     

铁皮石斛组织培养的工艺条件研究

铁皮石斛为石斛属珍稀濒危药用植物,药用部分是新鲜或干燥茎,具有益胃生津、滋阴清热的功效。铁皮石斛的种子极小、无胚乳,自然条件下需与某些真菌共生才能萌发,很难用实生苗栽培,本文详细的介绍了铁皮石斛的组织培养的各种条件对其影响。     

铁皮石斛的组织培养及快速繁殖

铁皮石斛的外植体在MS 6BA0.5 mg/L-2 mg/L NAA0.25 mg/L~0.4 mg/L或2,4-D0.25 mg/L培养基中能诱导分化丛生芽3~5倍。原球茎分化丛生芽10~15倍。壮苗后在1/2MS NAA0.2 mg/L~0.5mg/L诱导生根,生根率达90%以上。     

锗对铁皮石斛原球茎的生长及抗氧化酶系的影响

研究了不同浓度的锗（GeO2）对组培铁皮石斛原球茎的鲜重、可溶性蛋白质、叶绿素含量以及保护酶系统（SOD,CAT,POD）活性的影响．结果表明：适宜浓度的GeO2（5．00mg／L）能够显著增加铁皮石斛原球茎的鲜重,提高可溶性蛋白质和叶绿素含量,使SOD、CAT活性明显升高,而POD的活性则呈现缓慢的下降趋势．由此可见,培养基中添加5．00mg／L的锗时,对铁皮石斛原球茎的生长是有明显促进作用的．     

细叶石斛原球茎和丛生芽增殖的研究

为了筛选出适合细叶石斛原球茎增殖、丛生芽增殖的培养基配方,把相同发育阶段的原球茎接种于含不同激素浓度的培养基中生长;把丛生芽接种于激素浓度不同的培养基中生长.研究结果初步表明在MS＋0.05mg·L^-1NAA＋0.15mg·L^-16-BA培养基比较适合原球茎的增殖,MS＋0.6mg·L^-1NAA＋1.0mg·L^-16-BA培养基对丛生芽的增殖效果较好.     

硒对铁皮石斛拟原球茎生长及抗氧化系统的影响

通过在培养基中添加Na2SeO3研究不同浓度硒对铁皮石斛组织培养拟原球茎的生长及抗氧化系统的影响.结果表明:适量加硒(≤0.2 mg/L)促进了拟原球茎的增殖生长,而高浓度硒(0.2 mg/L)则抑制了增殖,并且发现拟原球茎生长的最佳硒浓度为0.05 mg/L.低浓度硒(≤0.05 mg/L)显著增强了拟原球茎SOD、CAT、GSH-PX活性,而使POD活性降低、O2-产生速率变小,MDA含量明显下降;硒浓度过高(0.1 mg/L),SOD、CAT、GSH-PX活性被抑制,POD活性升高,O2-产生速率变大,MDA含量大幅上升.总之,适量加硒可增加产量,提高机体抗氧化能力.     

不同基质和容器对铁皮石斛生长和生理特性的影响

以树皮和水苔为栽培基质,黑色营养杯、白色营养杯和穴盘3种容器进行铁皮石斛组培苗移栽生长研究,通过植株形态、光合色素、蛋白质以及多糖含量等生理特性变化,筛选出适宜铁皮石斛组培苗生长的栽培基质和容器.结果表明:树皮基质能显著提高铁皮石斛的鲜质量、干物质质量分数、株高和节间距等生长指标,提高铁皮石斛叶片和茎干的蛋白质质量分数;而水苔基质能显著提高叶片中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素质量分数以及类胡萝卜素的质量分数,促进铁皮石斛多糖质量分数的提高.3种容器中以6cm×6cm规格的黑色营养杯最有利于铁皮石斛植株的生长和多糖的形成.     

液体悬浮培养诱导金钗石斛原球茎增殖的研究

以金钗石斛原球茎为实验材料,通过液体悬浮培养,研究金钗石斛原球茎的增殖和多糖成份积累进行了研究。结果表明:金钗石斛在B5培养基+1.0mg.L-1NAA,蔗糖浓度为3%,10%香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳,可溶性多糖成分累积相对较高。     

采用正交设计快速获得梨无菌外植体的研究

以“雪青”梨为材料 ,采用L9(34)正交设计 ,设外植体 (A)、消毒剂 (B)和消毒时间 (C) 3因素 ,每因素设 3个水平 :A分别为叶片、茎尖和节段 ;B分别为 2 %次氯酸钠、0 1%升汞和 2 %次氯酸钙 ;C分别为 10min ,5min和 5min .外植体经表面消毒后 ,接种在MS琼脂培养基中 ,于 (2 5± 1)℃ ,2 0 0 0lx光照培养 ,15d后统计成活率 .试验结果表明 :最优水平组合为A1B2 C1,A ,B对试验结果的影响达显著水平 (p≤ 0 0 5 ) ,A不同水平间差异显著 (p<0 0 5 ) .     

一品红愈伤组织的诱导与分化

以一品红的茎段、叶片、苞片及叶柄作外植体接种于Ms附加不同激素的培养基中,研究愈伤组织的诱导效果以及不同激素组合对愈伤组织分化出芽的影响。结果表明,在起始培养中以Ms BA 0．1 mg／L NAA0．1mg／L 2,4-D 2 mg／L的效果最好,最易诱导出愈伤组织,其中苞片的诱导效果优于其它外植体。在BA与NAA不同浓度组合中,茎段的诱导效果最好,其次是叶柄和苞片,叶片的诱导效果较差。愈伤组织分化产生芽的频率较低,继代培养中易出现各种颜色的次生代谢物。     

SPME-GC-MS法比较野生和栽培铁皮石斛的挥发性成分

采用固相微萃取(SPME)技术,气质联用(GC-MS)法分析野生和栽培铁皮石斛的挥发性成分.从野生和栽培铁皮石斛中,分别鉴定出97种和80种挥发性成分,相对含量均占总离子峰的96.0%,具有60个相同的化合物,主要成分均包含芳樟醇、癸醛、对映-海松-8(14),15-二烯等化合物.     

铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化

为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.