细胞灌注装置的研制及31P NMR谱测试

研制一套细胞灌注装置,将该装置与核磁共振技术联用监测细胞内31P谱。结果表明:本装置温度、流量和压力稳定可控;细胞灌注核磁共振联用方法可在线检测细胞的31P谱,能推测药物作用下细胞内部能量代谢变化。     

可持续灌注细胞培养系统的研制与测试

为了实现对体外培养细胞生长状态的实时监测,本实验研制出一套可在显微镜下实现细胞实时连续监测的可持续灌注培养系统.本可持续灌注培养系统主要包括4个部分:pH-CO2调控系统、温度控制系统、可持续灌注系统和可拆卸式细胞培养池.可拆卸式细胞培养池由Pro-E软件设计,并以有机玻璃为材料加工.利用此培养系统,已成功地将中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)等细胞分别培养4~5天,不但细胞生长状态良好,还可对之进行显微镜下各种形态结构参数的检测.表明该系统可针对某一特定细胞的生命活动进行长时间连续实时追踪测控;并且可与显微操作系统联用,实现单个细胞的搬运,注射等显微操作.     

颅骨组织工程复合支架动态灌注装置的设计

为了解决颅骨组织工程支架中存在的中心处细胞存活率低的问题,针对具有血管嵌入的颅骨复合支架研制动态灌注培养装置,为多孔支架内部细胞提供营养物质以提高细胞存活率,使复合支架达到体内整合的要求.基于颅骨复合支架结构特点,设计双通道循环分别对多孔支架和血管进行灌注,为颅骨复合支架中成骨细胞和内皮细胞提供物质传输,气体循环为循环培养液提供氧气、二氧化碳,保证了培养液氧气充足和pH稳定;模拟人体自然颅骨组织中机械刺激,建立多孔支架、血管流体模型,根据灌注室和血管入口流量计算流体所需的剪切应力,据此确定流体流量和压力的控制范围与精度,为复合支架提供合适的流量;设计三因素三水平正交试验对灌注室的结构尺寸进行优选,确定关键部位灌注室的结构,通过硅胶管连接灌注室、储液瓶、蠕动泵形成循环系统,实现动态灌注装置的总体结构安装;建立流体仿真分析有限元模型,分析不同流速的流体培养液分别对颅骨多孔支架和血管结构的影响,结果表明灌注室和血管结构内流体速度、剪切应力、压力分布均匀,满足骨组织和内皮细胞的培养生理环境,验证了装置设计的合理性.该装置可用于骨组织体外细胞的动态培养,为骨组织工程支架体外构建及血管化奠定了基础.     

灌注速率对成纤维细胞在三维支架中生长和胶原合成的影响

为了降低工程化组织体外构建过程中的传质限制,采用自行研制的灌注生物反应器系统,以人皮肤成纤维细胞为模型细胞,以PET(Poly(ethylene terephthalate))为三维支架,构建工程化真皮组织,考察灌注速率对成纤维细胞生长和胞外基质合成的影响。将人皮肤成纤维细胞灌注接种于PET支架,分别以0.02、0.2、0.8 cm/min的灌注速率培养18 d。结果表明,灌注培养能促进细胞增殖,提高细胞在3D支架中均匀分布;与静态培养和0.02 cm/min的灌注速率相比,在0.2 cm/min和0.8 cm/min的灌注速率下进行培养,提高了细胞的葡萄糖比消耗速率,刺激细胞合成和分泌更多的胶原基质,但增加了流失到培养液中胶原的比例,灌注培养是体外构建工程化真皮组织的有效方法。     

连续灌注培养红豆杉细胞生产紫杉醇的研究

利用由一圆形柱和三角瓶组成的生物反应器对红豆杉细胞进行连续灌注培养，结果显示，培养基的pH值，糖和磷的变化幅度较平缓，细胞的生长期长，说明该反应器适于细胞生长，根据该反应器具有培养液提取简便的特点，首次提出诱导子可按照培养基中残糖和残磷的体积质量加入，而且发现高含量紫杉醇仅发生在特定的残糖和残磷体积质量下，结果还显示该反应器用于诱导和萃取结合处理细胞，与搅拌式和气升式反应器相比，得到较高的生物量和紫杉醇产量，这些结果表明该反应器可用于连续灌注培养红豆杉细胞生长紫杉醇。     

基于AMESIM软件的流量控制装置仿真

介绍了一种用于柴油机共轨系统的新型高压泵流量控制装置,运用AMESIM软件建立了流量控制装置的仿真模型,并对其工作过程进行仿真分析.结果表明,所设计的流量控制装置能够改变共轨压力并满足使用要求.
     

小鼠肝肿瘤细胞原位灌注分离培养方法的建立

摘要: 目的建立一种有效分离小鼠肝肿瘤细胞的原代培养方法,为肝癌发生发展的机制研究提供有效的实验手段。方法以9 月龄H-ras12V 转基因肝癌小鼠为实验材料,采用传统的小鼠肝细胞原代培养的灌注分离法,并对其进行改进,即在灌注的同时,用剪刀剪去肿瘤表面阻塞的血管和组织,疏通灌注液流,达到有效消化肿瘤组织的目的。对用此改良灌注法分离的肝肿瘤细胞和肿瘤周围组织细胞进行成活率计数,并进行后续的原代细胞培养,观察第3、5、7 天的细胞生长状态和形态特征。结果通过对传统的灌注分离肝细胞法进行改良,分离的肝肿瘤细胞成活率由未改良前的10%提升到40%。原代培养的结果表明,分离的肝肿瘤细胞与肝肿瘤周围的正常肝细胞的形态和随时间延长的凋亡变化状态没有显著差异。结论改良的灌注法能够有效的分离小鼠肝肿瘤细胞,并显著提高其存活率和细胞质量,可用于后续的原代细胞培养并开展相关的实验。另外,本文对改良灌注法的详细叙述也为相关的科研工作者提供了切实可行的操作规程。     

离心泵性能测试装置及其控制系统

设计一套离心泵性能测试装置及其控制系统。离心泵的流量、进出口压力、功率、转速、进出口调节阀的开度等采用单片微机检测,通过自动调节进出口阀控制汽蚀和流量。控制面板可同时显示所有参数,这些参数通过串行通讯输入PC微机,并由PC微机处理储存控制及绘制成性能曲线。试验装置能方便地实现离心泵的恒流输出、但压输出等各种功能。     

可重配置的机床液压冷却系统的解耦控制

可重配置的数控加工中心中,为实现完整性加工的目的,需要配置多个加工执行单元,由此需要由一个冷却系统对多个冷却支路进行冷却。针对某一支路的流量或压力波动对其他支路的流量所造成的影响(通常造成其他支路的流量减小,冷却效果下降,甚至烧毁执行单元),根据流体理论设计了一套能够自动检测冷却系统压力和流量的自动控制系统,通过压差控制的方法该系统可以实现多支路冷却系统中每一条支路压力和流量的独立控制,降低某一条支路的压力和流量波动对其他支路的耦合影响。用液压仿真软件AM E s im对所建立的自动控制系统模型进行仿真,验证该方案的可行性。     

改型环形灌注泵的径向力研究

为解决灌注泵的泄漏问题 ,对灌注泵的 3个特征及轴封泄漏量的解析式进行了分析 .认为轴封间隙过大是导致灌注泵泄漏的主要原因 ,而轴封间隙是由作用在叶轮上的径向力引起的 .普通离心泵径向力及轴封间隙过大因而不适合用作灌注泵 .设计出一种改型环形离心泵 ,其压水室由一段环形流道和一段螺旋形流道组成 .对环形压水室、螺旋形压水室及环形 -螺旋形压水室泵径向力的定性分析表明 :这种改型环形灌注泵的径向力小 ,且最小径向力点向小流量方向偏移 ,正好满足灌注泵小流量下小径向力的要求 .对这种改型环形泵的径向力进行了测试 ,并将结果与相同比转速下涡形泵和环形泵径向力的计算值进行了比较 ,也证实了上述结论     

Increased production of recombinant prourokinase with porous microcarrier cell culture by periodic pressure oscillation in a stirred tank reactor

0 IntroductionIn microbiological fermentation and plant cell cul-ture ,there are manyexamples of applying“periodic oper-ation”to enhance productivity[1-3],although the mecha-nismof this effect remains obscure .In animal cell cul-ture ,applying intermittent hydrostatic pressure could in-crease cell proliferation[4-6]orincrease enzyme activity[7].Process parameters such as temperature , pressure , pH,light intensity and nutrients concentration may be chosentointroduce physical stimuli .Cytopo…     

全自动尸体灌注设备的研制

人及动物尸体灌注是从事基础医学研究的人员特别是解剖学工作者必须的工作,因为灌注器械结构简陋,防腐灌注液对人体的危害性等原因,使得尸体灌注成为医学工作者比较棘手的一件事.通过对一些相关资料的分析和研究,结合我们单位的使用经验,设计出一种全自动生物灌注器,重点介绍了全自动生物灌注器的结构、原理、安装、使用及维护.医学工作者通过使用全自动灌注器,可以很好地解决人及动物尸体灌注中存在的各种问题,改善尸体灌注人员的工作环境,节约时间,提高效率,保证尸体的灌注效果.     

人脐静脉内皮细胞培养液的选择

目的:筛选出人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代、传代最适培养液.方法:0.02%II型胶原酶灌注脐静脉消化15min获得细胞,用不同的培养液培养.24h后观察细胞贴壁状况,细胞计数法得到贴壁细胞数量;内皮细胞标志性蛋白vWF进行细胞鉴定.传代培养后,用MTT法比较不同培养液对HUVECs活力的影响.结果:用含ECGS、20%FBS的ECM组进行原代培养,可获得贴壁细胞数量最多的HUVECs,且与其他组间有显著差异;用含30ng·mL-1 VEGF165、10%FBS的M199进行传代培养,HUVECs活力较ECM组无明显差异.结论:HUVECs原代、传代培养分别选用优化后的培养液,既保证原代HUVECs的质量和数量,又使传代培养成本降低60.8%.     

葛根素对家兔肠系膜微循环的影响

目的：观察葛根素（Puerarin）对家兔动脉血压、心率及其肠系膜微循环的影响。方法：采用微循环研究技术,随机分为正常对照组、微循环障碍组（NE）、微循环障碍改善组（生理盐水组、葛根素组）,观察各组给药前,给药后1、5、10、20、30、60min对微动脉、微静脉的管径、血流速度和血流量变化及动脉血压、心率的变化。结果：葛根素各组给药后均表现出家兔肠系膜微动脉和微静脉血管扩张,血液流速加快,血流量增加（P〈0.05或P〈0.01）,葛根素对家兔动脉血压、心率无显著性影响（P〉0.05）。结论：葛根素能使肠系膜微动脉和微静脉血管扩张、血液流速加快、血流量增加,但对家兔的动脉血压、心率无显著影响。     

一种新型的喷灌压力、流量控制设备

介绍一种喷灌的压力、流理控制设备的工作原理、组成、特点,以及它的设计依据。设计的压力、流量控制装置是由表面开有曲线孔的空心阀芯与弹簧的配合实现调压。它适用于山区喷灌,使喷灌有良好的均匀度,提高了喷灌质量。同时对设备的实验装置也作了介绍。     

超深稠油高温高压井筒降黏举升摩阻实验研究

新疆深层稠油在井筒举升过程中,由于温度的降低,原油会逐渐失去流动性。稠油降黏是有效降低井筒举升摩阻的途径。根据现场掺降黏剂工艺,建立了室内高温高压井筒流动模拟实验装置,实验研究了温度、压力及流速对稠油井筒举升流动摩阻的影响,得到了不同降黏方式井筒举升摩阻梯度分布,在已有井筒压降计算模型的基础上,构筑了室内井筒流动模拟装置与实际井筒之间的压降换算关系,得到了不同降黏方式塔河原油在实际井筒中压力分布。实验表明：原油在垂直井筒中举升摩阻随压力和流速的增加而增大,随着温度的升高而降低,但流速越大,井筒流动摩阻增加趋势渐缓。在井下3000m处掺降黏剂使稠油更易举升至井口,降黏效果：复合降黏剂＞油溶性降黏剂＞掺稀降黏。     

Effects of pigment glands and gossypol on somatic cell culture of upland cotton (Gossypium hirsutum L.)

The effects of pigment glands and gossypol on the somatic cell culture of upland cotton were studied, using the materials as follows: three pairs of glanded and glandless upland cotton near isogenic lines, TM-1, and Coker 312. The results showed that the pigment glands and gossypol contents in the explants had great inhibiting effect on the induction and growth of callus in somatic cell culture of upland cotton, and the induction rate of callus and the single callus weight of glandless cotton were much higher than those of their glanded near isogenic lines. It was easier to obtain regeneration plants from glandless cotton than from their glanded near isogenic lines. There was a significant inverse correlation between the gossypol contents in the explants and callus induction rate, with the correlation coefficient of -0.84. The vitro gossypol in the medium had some inhibiting effect on the induction and growth of callus, especially for the glandless cotton. However, a certain concentration of vitro gossypol in the medium (0.1 mg/L) was an aid to the steadiness growth of callus in glandless cotton somatic cell culture, with a high rate of embryogenic cells which was in favor of plant regeneration, and it was also relatively easy to obtain regeneration plants when they were transferred into differentiation medium with 0.1 mg/L of vitro gossypol, even for some cultivars which are difficult in somatic cell culture. In addition, the gossypol content and its variation in the seedlings and callus during culture of Coker 312 were discussed, as well as the relationship between gossypol variation in the explants and its somatic cell culture. The probability of vitro gossypol used in cotton somatic cell culture for the improvement of somatic cell culture was suggested.     

培养原代小鼠组织细胞检验细胞实验室技术操作规程

目的通过培养小鼠原代组织细胞,检验本科室己建立的一套细胞实验室技术操作规程能否满足细胞培养要求。方法培养小鼠原代成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞和胚胎成纤维细胞。计算原代培养成活率、传代成活率、冷冻及复苏成活率。结果成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞、胚胎成纤维细胞原代培养成活率分别为89%、96%、100%、100%、100%、80%、100%和90%;传代成活率分别为76%、93%、100%、92%、100%、66%、80%和92%;冷冻及复苏成活率分别为100%、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%。结论通过计算KM小鼠8种组织细胞原代培养、传代、冷冻与复苏的成活率,证明现有的细胞室技术操作规程基本上能够保证成功培养出常规原代细胞,并能传代、冷冻和复苏。