生长抑素mRNA在人早期胎盘绒毛膜定位的原位杂交组织化学研究

我们先前的研究已经证明,人胎盘绒毛不仅含有多种调节肽,而且含有5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)等多种经典神经递质,这些发现使我们产生以下设想,人胎盘可能是一个复杂的内分泌器官.但是,要证实这样一个设想,首先要弄清以上调节肽和经典神经递质是否由胎盘组织自身所产生以及它们由哪些细胞所产生,然后再探讨它们相互间的调节关系.我们已经证实,人胎盘绒毛的细胞和合体滋养层细胞含有生长抑素(SS).本文用原位杂交组织化学法,研究SSmRNA是否存在于人胎盘绒毛以及存在于绒毛的哪些细胞,为确定人胎盘能否自身产生以及由哪些细胞产生SS提供形态学依据.     

膜基质金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制因子-1在早期胎盘中的表达及其功能的研究

用原位杂交方法研究了人早期胎盘中膜型金属蛋白酶(MT-MMP-1)和金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的分布. 结果表明: (1) 在绒毛滋养层细胞和与其邻近的蜕膜细胞中MT-MMP-1和TIMP-1的表达量相对较高; (2) 在基底盘,Rohrs和Nitabuch纹间的外绒毛膜滋养层细胞, 滋养层和蜕膜的腺体细胞表达最高; (3) 胎膜分离层和绒毛干的少量细胞滋养层细胞以及蜕膜和绒毛干的血管壁上有明显的MT-MMP-1和TIMP-1的表达. 结果提示, 胎盘不同细胞MT-MMP与其抑制因子TIMP-1的协同表达在早期胎盘滋养层浸入和血管发生中发挥重要作用; 同时, 两者可能对在临产时在母体与胎儿的分离机制中也起某种作用.     

人胎盘绒毛神经降压素和5-羟色胺的定位及定量研究

详细研究人胎盘绒毛各种生物活性物质的定位、定量及其功能对计划生育及优生优育无疑是很有意义的。一些研究证明,胎盘绒毛含有多种调节肽,但是这些调节肽是否由绒毛上皮细胞所产生,还缺乏直接的证据。5-羟色胺(5-HT)是否也存在于胎盘绒毛。迄今未见报道。本文对胎盘绒毛的组织切片和无血清培养的绒毛细胞滋养层细胞进行5-HT和神经降压素(NT)的免疫组织化学定位及定量研究,为进一步探讨其在胎盘中的功能意义提供形态学依据。     

基质金属蛋白酶(MMPs)在人滋养层细胞侵入中的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)及其天然组织型抑制分子TIMPs是调节许多生理和病理过程中细胞外基质(ECM)有序降解和重塑的重要分子. 胎盘形成(placentation)是妊娠期间的一个重要事件, MMPs/TIMPs系统在调节胎盘中绒毛外细胞滋养层细胞(EVTs)的节制性侵入中发挥重要作用. 本文综述了近些年MMPs/TIMPs家族成员在胎盘中的表达情况及多种因素(物理性因素、激素、细胞因子和生长因子等)通过影响MMPs/TIMPs系统的平衡对滋养层细胞侵入程度的调节. 最后, 对MMPs/TIMPs系统在治疗某些妊娠性疾病如先兆子痫、胎儿宫内生长抑制和绒毛腺癌等的应用前景进行了展望.     

人胎盘绒毛白介素-6的定位及定量研究

用免疫组织化学结合图象分析对人胎盘绒毛白介素 6 (IL_6 )进行显微定位及定量研究 .结果显示 ,胎盘绒毛 2层滋养层细胞 ,绒毛基质细胞 ,绒毛毛细血管内皮细胞和绒毛中轴毛细血管内的白细胞均呈IL_6免疫反应强阳性 ,提示人胎盘绒毛内这些细胞可能产生IL_6 .原位定量的结果显示 ,妊娠第 6周 ,胎盘绒毛IL_6受体的含量较低 ,妊娠第 7周升高达峰值 ,第 8周到第 4 0周则呈逐渐减少趋势 .IL_6含量的周龄变化和我们先前研究的GnRH含量的周龄变化相平行 ,提示IL_6可能参与胎盘其他激素分泌的调节 .     

人胎盘绒毛白介素-6的定位及定量研究

用免疫组织化学结合图象分析对人胎盘绒毛白介素 6 (IL_6 )进行显微定位及定量研究 .结果显示 ,胎盘绒毛 2层滋养层细胞 ,绒毛基质细胞 ,绒毛毛细血管内皮细胞和绒毛中轴毛细血管内的白细胞均呈IL_6免疫反应强阳性 ,提示人胎盘绒毛内这些细胞可能产生IL_6 .原位定量的结果显示 ,妊娠第 6周 ,胎盘绒毛IL_6受体的含量较低 ,妊娠第 7周升高达峰值 ,第 8周到第 4 0周则呈逐渐减少趋势 .IL_6含量的周龄变化和我们先前研究的GnRH含量的周龄变化相平行 ,提示IL_6可能参与胎盘其他激素分泌的调节 .     

人早期胎盘绒毛膜P物质及P物质mRNA的免疫组织化学与原位杂交研究

先前的研究已经证明,人胎盘绒毛能产生神经肽Y(NPY),生长抑素(SS)和β-内啡肽(β-EP)等多种神经肽,说明神经肽对胎盘和胚胎发育可能起重要的调节作用.P物质(SP)是最早发现的神经肽,对血循环有重要调节作用.但是迄今未见人胎盘绒毛中有SP的报道.本文用免疫组织化学和原位杂交组织化学法,从基因翻译和转录水平证明人胎盘绒毛是否产生SP及其细胞定位,为进一步研究SP对人胚胎和胎盘的功能意义提供形态学依据.     

人早期胎盘绒毛中去甲肾上腺素和多巴胺的免疫组织化学研究

关于人胎盘绒毛的内分泌的研究已经有许多报道,但大多是关于神经肽、垂体激素样物质、生长因子和细胞因子方面的研究.单胺类物质报道较少.我们曾首次发现胎盘绒毛滋养层细胞合成5-羟色胺(5-HT),并且5-HT的含量随妊娠时间而变化.多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)也是重要的生物胺,它们与性腺激素的合成及分泌关系密切.应用高压液相色谱出(HPLC)和电化学检测仪,我们曾检测到人胎盘绒毛中NE和DA的存在,并通过     

人类基因顺序的简便测定法

美国加州大学的科学家们使核苷酸顺序与已知的氨基酸顺序相匹配,从而简化了基因的研究。最近他们确定了两个多肽激素基因的部分核苷酸顺序:人类绒毛膜生长激素(HCS)和大鼠生长激素(GH)。以前对DNA的顺序测定仅局限于在特殊的细胞中产生占优势的     

膜基质金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制因子-1 在早期胎盘中的表达及其功能的研究

用原位杂交方法研究了人早期胎盘中膜型金属蛋白酶（ＭＴ－ＭＭＰ－１）和金属蛋白酶抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）的分布。结果表明：（１）在绒毛滋养层细胞和与其邻近的蜕膜细胞中ＭＴ－ＭＭＰ－１和ＴＩＭＰ－１的表达量相对较高;（２）在基底盘,Ｒｏｈｒｓ和Ｎｉｔａｂｕｃｈ纹间的外绒毛膜滋养细胞,滋养层和蜕膜的腺体细胞表达最高;（３）胎膜分离层和绒毛干的少量细胞滋养层细胞以及蜕膜和绒毛干的血管壁上有明显的ＭＴ－     

纤溶酶原激活因子和抑制因子在早期胎盘中的表达及其功能

用原位杂交方法研究了人早期胎盘中组织型（ｔ）和尿激酶型（ｕ）纤溶酶原激活因子（ＰＡ）与其相应的抑制因子１型（ＰＡＩ－１）和２型（ＰＡＩ－２）ｍＲＮＡ的分布。结果表明：（１）在绒毛和蜕膜的血管壁,Ｒｏｈｒｓ和Ｎｉｔａｂｕｃｈ纹间的蜕膜中的大部分外细胞滋养层细胞沿绒毛盘、基底盘、绒毛叶间隔和绒毛膜的细胞滋养层细胞以及蜕膜的腺体细胞中都检测到ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ－１和ＰＡＩ－２ｍＲＮＡ;（２）在基底绒     

异亮氨酸调控大鼠小肠黏膜形态和结构的作用机制

作为动物体重要的必需氨基酸,异亮氨酸除了作为蛋白合成底物外,还可促进肠道的吸收功能和屏障功能,但其作用机制尚不清楚.本研究通过体内动物试验和体外细胞试验探究了异亮氨酸对肠道黏膜结构和功能的可能作用机制.试验选用80只远交群大鼠,随机分为4组,饮水添加不同浓度异亮氨酸(0、0.5、2.5和5 mg/mL),试验期为28 d,测定大鼠小肠各段组织结构和空肠中紧密连接蛋白表达水平.体外试验选用大鼠空肠上皮细胞系IEC-6并用不同浓度异亮氨酸处理,通过噻唑兰测定细胞活力,流式细胞术测定细胞的周期和凋亡情况, Western blot分析细胞中紧密连接蛋白表达情况.结果表明,饮水中添加2.5 mg/mL异亮氨酸显著提高了小肠的绒毛高度和绒毛高度隐窝深度比,显著降低了隐窝深度,并显著提高空肠紧密连接表达;适宜浓度异亮氨酸显著促进了IEC-6细胞的增殖并提高细胞中紧密连接蛋白表达量,而高浓度异亮氨酸呈现抑制作用.综上,异亮氨酸可改善小肠的组织结构,尤其促进绒毛生长并提高吸收表面积,其可能作用机制是适宜异亮氨酸可促进小肠上皮细胞的增殖并降低凋亡,进而增大了绒毛的高度;异亮氨酸提高了上皮细胞中紧密连接蛋...     

人胎盘绒毛5-羟色胺受体的显微亚微定位及定量研究

用免疫组织化学和原位杂交法对人胎盘绒毛５－ＨＴ受体进行显微亚微定位及量研究。结果显示,胎盘绒毛两层滋养层细胞,绒毛中轴毛细血管内的白细胞既呈５－ＨＴ受体免疫反应阳性又有５－ＨＴ１Ａ受体ｍＲ－ＮＡ杂交信号。     

人早期胎盘绒毛中多巴胺和去甲肾上腺素受体的免疫组织化学定位

许多研究表明:人早期胎盘是一个复杂的神经内分泌器官.我们已观察到人早期胎盘中不仅存在多种调节肽,而且存在5-羟色胺(5-HT),多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)等多种单胺类神经递质;它们在胚泡着床和早期妊娠的维持中起着重要的作用.但有关人早期胎盘绒毛中单胺类神经递质受体的研究,迄今未见报道.作者最近已成功地制备了DA和NE抗独特型抗体,并证实它们分别对DA和NE受体具有特异性免疫反应.本实验用以上两种抗独特型抗体的免疫组织化学法,探讨了DA和NE受体在人早期胎盘绒毛中的分布,为研究该两种神经递质在胎盘中的作用及其机理提供形态学依据.1 材料与方法1.1 试剂兔DA和NE抗独特型抗体(Anti-idiotypic antibody)均为中国科学院动物研究所本实验室自制;过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP),由第四军医大学组织胚胎教研室提供.1.2 胎盘绒毛石蜡切片的制备由人工流产胚胎取得新鲜的胎盘绒毛(7～8周)6例(由北京市海淀医院计划生育门诊室提供),立即用生理盐水洗去血液,剪成小块,然后用Bouin液固定;石蜡包埋,制成5～7μm的连续切片.     

抑制素对妊娠早期人胎盘绒毛孕酮分泌的影响

在一段时间人们一直认为抑制素(inhibin)只是睾丸组织分泌的激素,对腺垂体卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)的分泌有负反馈作用。1976年,DeJong等人证实牛卵泡液中存在抑制素活性物质,进一步加强了人们对抑制素研究的兴趣。之后,从人、羊和大鼠的睾丸网液以及人、牛、羊和猪的卵泡液等中相继分离出纯化抑制素成功,并逐渐了解其在体内具有广泛的生理作用。本工作应用体外灌流技术观察了抑制素对人胎盘绒毛孕酮(progesterone)分泌的影响。     

绒毛间期细胞熟前凝聚染色体的研究

1970年,Johnson等发现,在仙台病毒的作用下,分裂期与间期的HeLa细胞发生融合,在间期细胞中出现了一种熟前凝集的染色体(prematurely condensed chromosome,PCC)。     

细胞融合技术及其应用

一、前言细胞融合现象是1957年日本冈田善雄博士发现的。它是给动物细胞中加上HvJ(Hemagglutinating virus of Japan)病毒,病毒表面的受纳体即发生连接作用,使细胞与细胞凝集起来,产生具有两个或两个以上的核的细胞。这一技术后来应用于体细胞遗传学之类的基础科学,作出了很多贡献。细胞融合技术最近引起了产业界的注目,其原因是:(1)1975年英国C.Milstein等人将此技术用于免疫学领域,利用淋巴球之类细胞和癌细胞融     

人LDL受体cDNA在受体缺陷CHO细胞中的表达

低密度脂蛋白(LDL)受体可介导细胞摄取含胆周醇的脂蛋白,调节体内胆固醇平衡。1984年,Russell等克隆了人肾上腺皮质细胞LDL受体的全长cDNA,并对LDL受体缺陷的家族性高胆固醇血症患者的基因突变进行了     

利用单克隆抗体研究人绒毛膜促性腺激素与受体的结合反应

人绒毛膜促性腺激素(hCG)是人胎盘绒毛膜分泌的一种糖蛋白激素,对其化学结构、理化特性、生理功能及代谢过程等已有较为系统的研究,但迄今尚未获得hCG的结晶,故对其立体结构及其与功能之间的关系还缺乏了解。近年来,杂交瘤技术的发展和单克隆抗体(McAb)的应用,为医学和生物科学开辟了新的前景,也为hCG结构与功能之间关系的研究     

动物实验的交替法

“鸡蛋试验”(HET)和“鸡蛋绒毛膜尿囊膜试验”(HET-CAM)是一种快速、灵敏、可靠性强且成本低的毒理学检测方法。它能给出胚胎毒理、畸胎形成、系统和免疫病理等诸多效应的信息。通过该方法还能获得代谢退化途径、化学物质的膜刺激潜能方面的数据。