四例血友病B患者基因治疗的临床试验

报道了对四例血友病Ｂ患者基因治疗的临床试验，取自四例血友病Ｂ患者的自体皮肤成纤维细胞，通过反转录病毒介导的基因转移，能高效地分泌人凝血因子Ⅸ。用胶原包埋经遗传修饰的自体皮肤成纤维细胞，再移植到血友病Ｂ患者皮下。四例患者经治疗后，自发出血症状得到了减轻，血浆中凝血因子Ⅸ蛋白浓度和凝血活性明显地增加，其中两例患者增加较大，达到正常值的４％￣５％。另外两例患者体内的凝血因子Ⅸ和凝血活性也有不同程度的提高     

腺病毒相关病毒载体及基因治疗的研究进展

<正>自1990年首例ADA缺乏症患者施行基因治疗成功以来,该领域的基础和临床实验研究发展十分迅速。基因治疗的主要目的是将外源基因有效地导入宿主细胞内,并使之稳定表达,以达到治疗人类疾病的目的。 为了方便和有效地将此项技术应用于临床治疗,动物病毒载体介导外源基因的转移是目前应用的主要技术。早期研究和使用较多的是逆转录病毒载体。目前由于其存在着只能感染分裂复制期靶细胞;病毒滴度相对较低以及可能因同源重组产生野生型病毒而引起靶细胞恶性转化的潜在性等缺点,其应用相对受到限制。近年来,应用腺病毒(AV)或腺病毒相关病毒(AAV)作为载体的研究不断增加,尤其是     

基因治疗的发展

据报道,美国全国卫生研究院(NIH)里的一个研究小组于1992年为世界上最早用基因治疗疾病的计划实施两周年举行了庆祝会。接受治疗者是两位女孩,分别为6岁和11岁。她们被注射了带有能生产腺苷脱氨酶(ADA)转基因的白血球细胞,已知该酶在免疫系统中发挥重要作用。两位女孩因先天缺失ADA,因而缺乏自然的防御能力。据获得该项基因治疗实验成果的小组成员,全国癌症研究所(NCI)的免疫学家朱切尔·布利谢说,如今两位女孩的免疫功能都已恢复正常.正在公立学校就读,虽然她们曾因病被隔离生活过。     

血友病B基因治疗研究

血友病Ｂ是一种由于人凝血因子Ⅸ (ｈＦＩＸ)缺陷导致的严重出血性遗传疾病 ,临床治疗主要依靠输血或凝血酶原复合物 ,但这些常规的替代治疗不仅费用昂贵 ,易引起输血反应 ,更可能感染肝炎病毒或爱滋病病毒 .理论上 ,只有基因治疗可望从根本上治疗血友病Ｂ .本研究先后建立反转录病毒基因转移系统 ,高效转染小鼠、大鼠、兔和血友病Ｂ患者皮肤成纤维细胞等不同细胞 ,尤其是人ＦＩＸ在骨髓基质细胞的表达在国际同类研究中是首次报道 .人ＦＩＸ在兔体内表达水平和持续时间在同类研究中居世界领先水平 ;在国内首先建立了有关基因治疗的安全性检…     

不同重组慢病毒介导人凝血因子Ⅸ cDNA在血友病B小鼠中表达的影响

血友病B是凝血因子Ⅸ(hFⅨ)缺乏所导致的严重凝血功能障碍、X-连锁隐性遗传性疾病,在男性中的发病率为三万分之一．目前没有理想的治疗措施,而基因治疗可能是根治该病的安全、有效方法．该实验构建了ubiquitin—c和ABP(肝特异性)启动子指导hFⅨ表达的载体FUXW、FAXW,利用磷酸钙法共转染三质粒制备高滴度的重组慢病毒．将不同剂量的重组FUXW、FAXW病毒,分别用尾静脉液压法和静脉缓注法注射入血友病B小鼠体内,各治疗组小鼠血浆均可持续检测到hFⅨ抗原,最高峰值为45ng／mL,表达持续超过60d．结果表明：hFⅨ蛋白的表达与病毒的剂量成正相关,重组FAXW病毒的hFⅨ表达量高于重组FUXW病毒,而尾静脉液压组和静脉缓注组在表达量、表达时间上没有显著差异．     

基因治疗及基研究进展

基因治疗作为一种新型的疾病治疗手段，正在广泛用于血友病、糖尿病、癌症、心血管病、爱滋病等多种疾病的治疗领域。基因治疗的一般步骤包括：目的基因的转移和目的基因的表达两个方面。其中目的基因的导入和目的基因表达的精确调控是两个关键步骤。新发展的还有反义疗法以及应用核酶进行基因治疗等。本文就基因治疗的基本步骤、基因治疗的对象、方式及基因治疗的现状和前景作一个简单介绍。     

电击法转移含人凝血因子IX基因重组质粒的影响因素

反转录病毒载体在基因治疗中可能会产生野生型病毒颗粒而引起安全性问题，本文研究含ＦＩＸｃＤＮＡ重组质粒基因治疗血友病Ｂ的可能，构建了不具反转录病毒载体结构的两重组质粒ｐＳＣＩＸＴＮ和ｐＣＩＸＴＮ，前者合ＳＶ４０早期启动子和ｈＣＭＶ启动子共同控制的ＦＩＸｃＤＮＡ，后者仅含ｈＣＭＶ启动于控制的ＦＩＸｃＤＮＡ，它们都含有ＴＫ启动于驱动的ｎｅｏ基因，通过电击法将基因转移到ＰＡ３１７和ＨＴ１０８０细胞，在ＨＴ１０８０细胞中的ＦＩＸ表达量分别为２２０、２１２ｎｇ／（１０６细胞·２４ｈ）通过与ｐＣＭＶＩＸ共转染靶细胞，可以增加人ＩＸ因子表达１．５～３．５倍，显示了用质粒载体转染靶细胞在血友病Ｂ基因治疗中是一条潜在可行的途径．本项研究用自制的电击仪转移ＰＡ３１７和ＨＴ１０８０等细胞，最高的转移效率达１０－３，并探讨了细胞种类，ＤＮＡ量，ＤＮＡ结构，电压，脉冲时间与转移效率及表达量的关系．     

基因治疗：基因生物技术的重要里程碑

基因治疗是将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的的生物医学技术。基因治疗是当代医学和生物学一个新的研究领域。它试图从基因水平调控细胞中的缺陷基因表达或以正常基因矫正、替代缺陷基因，达到治疗基因缺陷所致的遗传病、免疫缺陷或抑癌基因的失活所致的肿瘤等疾病，即与基因相关的疾病。 根据临床统计，25％的生理缺陷、30％的儿童疾病和60％的成年人疾病都是由遗传病引起的。而人类遗传病大约有5000种，大部分是单基因缺陷造成的道机体是一个复杂的动态性的平衡系统。每一个基因对机体的正常功能的影响都是复杂的，任何一个基因的变化都会导致多种症状的发生。由于这些疾病病因复杂而且发生在遗传物质水平，用传统的治疗方式很难达到根治目的，而且价格昂贵周期长。基于以上这些原因，人们一直致力于寻找新的、更好的、更彻底的遗传疾病治疗方法。随着分子生物学和分子遗传学等学科的飞速发展、人们对遗传病的分子机理的深入了解以及许多遗传疾病分子模型的建立，特别是人类基因组计划超乎预想的发展和后基因组计划、蛋白质组计划的提出，使人们自己的遗传背景和基因与疾病的关系有了更清楚的认识。这些都使人的基因治疗成为可能。 基因治疗是近十年来发展起来的新型医疗技术，有广阔的研究、应用和开发前景，但是，它还需要解决许多基础研究和技术方面的问题，才能具有真正的实用价值。总而言之，基因治疗随着分子生物学、分子遗传学和临床医学等学科的发展，它将日益走向成熟。     

一种新型纳米材料——树枝状聚合物介导的基因治疗研究

无论是在基因治疗研究兴起之初 ,还是在经历了基因治疗临床试验１０余年之后的今天 ,载体问题一直是基因治疗研究领域中最至关重要的核心问题之一。一个理想的载体系统至少必须满足两个条件 ,即有效性和安全性。有效性包括所介导的遗传物质能够高效地进入所期望的靶细胞 ,而且不被血浆或组织细胞中各种补体以及各种酶所破坏。同时 ,转导基因能够透过核膜 ,进入细胞核 ,并整合于染色体ＤＮＡ中 ,从而获得转基因的高效、稳定表达而发挥治疗作用。安全性则是指用于基因转移的载体不会引起宿主严重的免疫反应 ,不会产生严重的遗传毒性与细胞毒性…     

人类基因治疗述评(一)

何谓基因治疗 ?简言之 ,用基因治病就叫基因治疗。但必须指出 ,所谓用基因治病 ,实际上指的是把功能基因导入病人体内使之表达 ,并因表达产物———蛋白质发挥了功能以使疾病得以治疗。这就是说 ,用基因治病 ,实际上是用导入体内的基因的产物蛋白质来治病。指出这一点之所以是必要的 ,是因为基因治疗与核苷类药物是两码事 ,不可混为一谈。后者指的是用核苷类化合物治疗疾病。基因治疗设想 ,最初是针对无法根治的遗传性疾病提出的 ;更确切地说 ,最初是针对按孟德尔遗传法则遗传的单基因缺陷那样一类无法根治的疾病提出的 :设想把具有正常功能…     

基因治疗的现状与存在问题简析

基因治疗是指应用基因工程技术，将外源性基因导入体内并表达产物，从基因水平上改变人活细胞遗传物质而治疗疾病的一种医学治疗方法。１９５３年Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ提出了ＤＮＡ双螺旋结构模型，开创了分子生物学和分子遗传学研究的新纪元．为现代生物学及医学发展奠定了坚实的基础。１９７１年，Ｓ．Ｒｏｇｅｒｓ对高精氨酸血症患者两姊妹进行了兔乳头瘤病毒体内直接注射，揭开了“基因治疗”的序幕。至此，人类对疾病的治疗又上了一个新的台阶。目前，基因治疗应用的主要手段有：１．原位修复缺陷基因，使其与正常基因一样能够正确…     

淋巴细胞的发育、分化、激活、凋亡及其调节——中国科学家谈科学

淋巴细胞的发育、活化及凋亡的研究，有助于深化对特异性免疫应答及调节机理的认识。对淋巴细胞生命过程的干预可望为免疫缺陷、自身免疫、感染和肿瘤等疾病的预防及治疗提供新的、更有效的方法。     

癌症患者血象的观察

免疫学的大量研究指明,淋巴细胞与肿瘤的细胞免疫有关,特别是对小淋巴细胞的认识,有了许多新的进展;认为淋巴细胞是免疫反应中的主要细胞,在肿瘤的细胞免疫中起着重要作用。在临床实践中,对患者的末梢血涂片进行血象观察已成为诊断疾病的重要检验方法     

小鼠肿瘤免疫抑制因子若干生物学特性的研究

带瘤机体包括人和动物,在其癌性腹水和血清中存在一种对免疫系统具有很强抑制作用的物质,叫免疫抑制物或免疫抑制因子。这种体液因子,显著地抑制淋巴细胞免疫反应。这已被大量实验所证实。据Whittaker等人(1971)报告,进行性乳癌患者淋巴细胞,在患者自身血清培养条件下,淋巴细胞转化率为27.5％。如培养在正常人血清中,转化率可以上     

ICAM-1在NF-κB通路中表达的研究进展

细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1),属于免疫球蛋白超家族中的一员,其主要功能是参与白细胞的迁移,来作为T淋巴细胞活化信号和调节炎性因子的表达.因此,ICAM-1表达量的变化与机体多种疾病相关.ICAM-1启动子区域含有大量能与转录因子及协同刺激物结合的基因位点,因而多种信号通路及转录因子参与调节ICAM-1的转录表达.NF-κB通路作为重要的炎症信号通路,同样也是调控ICAM-1表达的一条关键性转录通路.在炎症、病毒及肿瘤等疾病条件下,多种细胞因子能够通过激活NF-κB通路,从而改变ICAM-1的基因及蛋白表达水平.同时,ICAM-1作为疾病治疗中重要的靶点,为疾病的治疗开辟了新的道路.     

后发性白内障的基因治疗

现代白内障手术后由于晶状体上皮细胞大量增生等原因而常常形成后发性白内障,目前尚无有效安全的药物来防止其发生.激光后囊切开术虽常被用来提高后发障患者的视力,但可能带来视网膜脱离、黄斑水肿、眼压升高等严重并发症.基因治疗为疾病的治疗开辟了一条新途径,在基因治疗中,逆转录病毒载体是在具有分裂功能的细胞中进行基因转移和表达的载体,这一特点对其应用于靶向性治疗的实验研究有着十分重要的意义,因在后发性白内障早期,晶状体上皮细胞处于活跃分裂状态,而角膜内皮细胞等眼组织细胞多处于细胞周期的静止期.本文针对后发性白内障的基因治疗做一综述.     

基因治疗新方法

最近,北京医科大学侯纬敏教授等人报告了一种新的基因治疗方法,即采用杆状病毒作为载体,将人血小板生成素（ＴＰＯ）导入哺乳动物体内获得成功。ＴＰＯ可刺激巨核细胞的生成、成熟及血小板从巨核细胞释放至血液中。临床上的病人由于肿瘤化疗,骨髓移植后导致血小板减少,ＴＰＯ是目前已知的惟一可促进血小板生成的细胞因子,可显著提高化疗期间癌症患者的血小板数目,因而对ＴＰＯ基因治疗研究近年发展很快。目前,临床基因治疗实验常用逆转录病毒和腺病毒为载体,但缺点是前者转染效率低、后者所携带或产生的病毒蛋白可诱发机体局部炎性…     

遗传学联合公司的转基因大鼠泌乳生产人类组织血纤维蛋白溶酶原激酶(TPA)

<正> 华盛顿——苏格兰刚刚声明转基因绵羊已被用来泌乳生产人类因子F-Ⅸ(《新闻观察》,8月17日,P.1),美国就有一家公司上星期也声明从转基因大鼠的乳腺中挤取到人类组织血纤维蛋白溶酶原激酶(TPA),这种蛋白质能尽快地使心脏病患者体内的血液凝结块溶解。马萨诸塞州弗明翰遗传学联合公司(IG)和国立卫生研究所(NIH)的科学家们于10月26日在这里联合召开了新闻发布会,他们声明已经证明转基因动物可以比培养哺乳动物细胞——吉纳恩特蒂联合公司近来使用的技术,多产生成千上万倍的TPA。跟苏格兰获取凝血因子时采用的方法一样,IG和NTH发展的技术也涉及到将人的     

今又生加顺铂联合热疗治疗恶性胸腔积液的护理

据世界卫生组织最新报告,导致人类总死亡率的主要疾病种类中,癌症高居首位。大部分患者确诊时已属于晚期,丧失了宝贵的治疗机会。单纯放疗、化疗之近期有效率和远期生存率不尽如人意。近年来,肿瘤治疗有了飞速发展,继传统化学药物之后,肿瘤基因治疗先后应用于临床,取得了很好的疗效。同时热疗作为一种日臻完善的抗肿瘤手段日益受到人们重视,逐渐成为临床上主要的辅助治疗方法之一。今又生(重组人p53腺病毒注射液,由深圳赛百诺基因技术有限公司提供,批号S20070004)是我国首次研制成功的抗肿瘤基因治疗药物,是肿瘤基因治疗领域的一项重要突破性进展。它是利用p53这一抑癌基因,借助于无毒无复制能力的腺病毒这一载体,将p53基因导入癌细胞DNA结构中,诱导癌细胞的凋亡自杀程序,促进癌细胞的溶解死亡。2007年5月-2007年8月,我科使用今又生加顺铂胸腔内注射联合热疗治疗6例恶性胸腔积液患者,疗效显著。现将该组患者临床治疗护理资料报告如下。     

丙肝病毒基因变异及其临床意义

丙肝病毒感染后，绝大多数病人发展为慢性肝炎．一部分发展为肝硬化和肝癌。对人类健康构成极大危害。丙肝病毒基因组变异很大，存在多种基因型。不同基因型感染的地理分布、临床特征、对干扰素治疗的应答性及疾病的转归都存在较大差异。本文就丙肝病毒的基因变异、基因分型，分子流行病学特点以及基因分型的临床意义等问题作一简要综述。1丙肝病毒（HCV）基因结构由于分子克隆技术的飞速发展，使得人们在寻找新的感染因子方面取得了很大成就。国外学者于1989年从非甲非乙型肝炎患者体内成功地克隆出丙型肝炎病毒基因组的cDNA。在丙肝病…