可高亲和结合两种不同抗原的抗体

抗体和抗原的相互作用面常常被描述成锁和钥匙的关系,说明一个抗体只能适合一种抗原。美国加州基因技术公司Germaine Fuh和同事分离出一种治疗用单克隆抗体Herceptin的异构体,其结合位点可以同时结合人表皮生长因子受体2（HER2）和血管内皮生长因子（VEGF）     

从分子印迹到仿生电化学传感

正分子印迹是模拟抗原抗体特异性结合的一种仿生技术,电化学传感是一种快速、简便、灵敏的测量方法。将二者结合,会不会产生"1+1 2"的效应?源于免疫学的分子印迹仿生技术抗体和抗原的结合是非常奇妙的,二者之间呈现出"专一"的互补关系。抗原和抗体是生物体内免疫机制中重要的组成部分,它们之间的结合不仅具备很高的灵敏度,而且还有很强的特异性;哪怕是某一抗原分子的结构或者立体构象有细微差别,抗体也能很好地识别,不会与之结合。     

美国开发出身份识别新技术

美国能源部下属爱达荷国家实验室等机构的研究人员新开发出一种利用人体抗体进行身份识别的技术。抗体是机体在抗原物质刺激下产生的一种可与相应抗原发生特异性结合的一类免疫球蛋白类物质。每个人都有自己独一无二的抗体识别信息，就像区别商品的“条形码”一样。抗体“条形码”信息可以从人体血液、唾液或其他体液中获取。     

黑河市正常人C3含量的测定

补体系统是存在于机体血液或体液内的一组大分子量的球蛋白，约占血清球蛋白总量10％左右，具有酶活性及趋化性等生物活性，可以在特异性抗原──抗体结合时被激活。它除了参与非特异性免疫反应外，也是联结特异性免疫与非特异性免疫和体液免疫与细胞免疫的重要成分。C_3是补体系统的重要组成成份，所以了解人血清中C_3含量对了解机体免疫功能及研究损伤机理均有较大意义。我们做了正常儿童（5－7）95例和200例正常成人（中专、军人体检18－30岁）的C_3含量测定。一、实验方法单相扩散法：用上海生物研究所生产的冻干抗人cs和参考血清作为…     

流动注射免疫比浊法测定血清中IgA

1引言 免疫球蛋白是具有抗体活性、能与相应抗原呈特异性结合的蛋白质,普遍存在于体液、组织液及外分泌液中,在免疫应答中产生重要作用.     

噬菌体筛选技术筛选与联萘酚(BINOL)相结合的抗体

利用噬菌体展示技术筛选只结合1种对应体的BINOL抗体,建立人类单链抗体(scFv)噬菌体文库--Griffin.1文库,以固相化抗原淘筛抗体库,ELISA鉴定噬菌体抗体.从经过4轮富集的次级抗体库中挑选到噬菌体克隆,用该克隆制备的单链抗体阳性克隆,经ELISA证实具有良好的抗原特异性.从人类scFv噬菌体文库中获得抗BINOL的特异性抗体.     

中药免疫增强剂研究进展

中药免疫增强剂能非特异性地与抗原结合而增强其特异性免疫原性,调节、增强、恢复机体免疫功能,增强机体免疫应答或改变免疫应答类型,是治疗和预防疾病的重要物质,特别是对疫苗发挥作用具有独特的效果。详细论述了中药免疫增强剂的种类、有效成分及影响其作用功能的因素等。     

肿瘤抗原及新型肿瘤免疫疗法

不同的肿瘤抗原能刺激机体产生特异性排斥反应，包括病毒抗原和脱抑制基因产物；肿瘤也能表达导致机体耐受组织分化抗原或胚胎抗原。各种免疫方法，包括肿瘤抗体，过继免疫治疗，细胞因子治疗，目前都正在进行临床实验。     

SLE患者血清ENA抗体的检测及临床意义

系统性红斑狼疮(Systemic Lupus erythematosus, SLE)是一种病因不明的自身免疫病,病人体内由于B淋巴细胞多克隆激活而产生多种自身抗体,这些抗体能与细胞核或胞浆内的许多成分反应,对SLE的诊断有重要意义,如抗ds—DNA抗体,抗组蛋白抗体,抗Sm抗体等。由Halman等(1959)首先报导某些SLE患者血清中有一种自身抗体,能和细胞核的盐水可溶性成分反应,命名为可提取核抗原(extractable nuclear antigen, ENA)抗体。后经学者研究,发现ENA含多种抗原成分,如Sm、RNP、SSA、SSB、ScL—70、Jo—1、Ku、HSP—90等,其相应抗体对风湿病的诊断和鉴别诊断有重要价值,如抗Sm抗体对SLE特异性较高,高滴度RNP抗体对混合性结缔组织病(MCTD)特异性较高,SSA及SSB抗体是干燥综合征(SS)特异性抗体。研究较多的是Sm和RNP抗体。 1 ENA抗原的分子特性 ENA属非组蛋白核蛋白,因其大多数是酸性蛋白,所以又称酸性核蛋白。ENA常从兔或小牛胸腺、猪胸腺、Hela细胞、Wi1—2细     

建立Raji细胞免疫酶抑制法对血清抗HLA—DR抗体的检测

由于Raji细胞表面具有表达HLA-DR抗原特点,利用被测血清中抗HLA-DR抗体与抗人HLA-DR单克隆抗体竞争和Raji细胞表面HLA-DR抗原结合的特征,建立了Raji细胞免疫酶抑制法检测血清中抗HLA-DR抗体的方法。进行了方法学特异性,重复性和实验条件确定研究,并用此方法检测了72例系统性红斑狼疮患者和113例健康者血清。结果显示:该方法特异性强(中性粒细胞无显色反应);重复性好(抗体阳性血清变异率C.V为4.66％,抗体阴性血清C.V为0％);抗体滴度范围1∶5-1∶40。系统性红斑狼疮患者中抗HLA-DR抗体阳性率为30％;而健康阳性率为1.8％。作者认为:用Raji细胞免疫酶抑制法检测血清中抗HLA-DR抗体是一种特异性强,重复性好,操作简便和假阳性率低的方法,这种方法值得推广应用。     

抗EV71多克隆抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒对病毒的特异性富集

 手足口病是幼儿和儿童常见的一种传染病,严重时会引起患者死亡。EV71病毒（人肠道病毒71型）是引起手足口病的一种主要病毒。为寻求一条快速诊断EV71病毒感染的新方法,将兔抗EV71多克隆抗体,通过戊二醛交联法偶联在氨基硅烷修饰的磁性纳米颗粒表面,获得抗EV71多克隆抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒用于EV71病毒的检测。通过酶联免疫、免疫荧光方法证实了抗体耦合在磁性纳米颗粒表面,并通过BCA法测得其耦合的效率为94.1%。采用抗体偶联的磁性纳米颗粒对EV71病毒液中的病毒抗原进行吸附,通过ELISA法检测上清液中病毒含量的变化,并对磁性纳米颗粒表面吸附的病毒进行免疫荧光和核酸PCR检测,证明了抗体偶联的磁性纳米颗粒可以与病毒抗原特异性结合。由于该纳米颗粒同时具有抗体的靶向性和磁性颗粒的磁响应性,对病毒抗原有较好的特异性吸附能力,可以用于低浓度大样本的EV71病毒抗原的富集检测。利用抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒,同时具有可在病毒感染的细胞周围特异性富集和磁颗粒可在交变磁场下感应升温的双重功能,将其作为磁感应热疗的靶向介质,有望研制出病毒感染性疾病磁感应热疗的靶向介质,为靶向热疗病毒感染性疾病提供新的尝试。     

仙台病毒抗原的制备及初步应用

目的纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测。方法通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定;优化确定间接SeV-ELISA抗原的最佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证。结果用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80%;确定SeV-ELISA抗原最佳包被浓度为2.5μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100%,并由Western-blot检测法得到了证实。结论通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性。     

多功能纳米标记探针在生命分析中的初步应用

免疫分析是利用抗原-抗体特异性反应来测定痕量物质的一种高灵敏度、高选择性的方法,该方法的提出和发展不仅推动了血清学的应用,而且也有助于从理论上研究抗原-抗体的关系及其本质.纳米生物技术是纳米技术与生物技术交叉渗透形成的新技术,纳米材料的介入为免疫分析的发展提供了无穷的想象空间,由于其量子尺寸效应和表面效应,可把免疫分析方法的性能提高到新的水平,使其不仅检测的速度快、精度高、可靠性好,还能实现多功能化和选择检测.     

利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因INAIAP在肝癌细胞中的表达

为探究纺锤体蛋白INMAP的功能及其在细胞恶性增殖中发挥的作用,制备INMAP多克隆抗体。利用0.1 mmol/L IPTG于16℃诱导His-INMAP融合蛋白进行原核表达,SDS-PAGE及免疫印迹检测蛋白表达。4.0 mol/L尿素处理包涵体获得可溶性融合蛋白,镍亲和柱分离纯化融合蛋白抗原并检测蛋白浓度及纯度。以所获抗原免疫4只Balb/c小鼠,收集心脏抗血清。以纯化前、后的原核表达产物作为抗原,检测INMAP多克隆抗体的特异性。通过免疫印迹分析INMAP在正常肝细胞系L-02及5个肝癌细胞系(PLC、Hep G2、SUN449、SMMC-7721和BEL-7402)中的表达差异。结果显示,His-INMAP融合蛋白主要以包涵体形式存在,经4.0 mol/L尿素处理可获得可溶性目的蛋白,且纯化后的抗原纯度较高(94.1%)。INMAP多克隆抗体能与INMAP抗原特异结合。INMAP在6种肝细胞中具有多态性,除PLC外,在其他肝癌细胞中其基因表达水平显著下调。本研究制备的INMAP多克隆抗体特异性高,为INMAP基因功能的进一步研究奠定了基础。     

日本血吸虫病人群同种型抗体应答的特征及其流行病学意义

该研究通过对我国日本血吸虫病流行区人群的免疫流行病学调查,确定年龄相关的优势血吸虫抗原特异性抗体应答的同种型特征及与化疗后再感染状态相关的优势血吸虫特异性抗体应答的分子机理,进而确定其抗原特异性,为日本血吸虫病免疫流行病学研究和疫苗的研制提供基本信息.     

胃癌抗体、胎儿胃粘膜抗体及免疫活性碎片研究

胃癌对人类的危害是目前国内外密切注意的问题。H(?)kkinen认为胎儿硫糖蛋白是胃癌胃液特异的糖蛋白抗原,它存在于胃癌细胞及癌组织周围的粘液细胞内。为进一步阐明癌细胞与抗体的结合特性,有必要对抗原存在的部位及抗体的性质进行深入的了解。我们制备特异性抗体,用间接免疫萤光技术以识别胃的正常细胞及癌变细胞,探讨胃癌细胞表面抗原存在的部位。并比较了胃癌抗体、胎儿胃粘膜抗体及其碎片的性质。     

利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因INMAP在肝癌细胞中的表达

 为探究纺锤体蛋白INMAP 的功能及其在细胞恶性增殖中发挥的作用,制备INMAP 多克隆抗体.利用0.1 mmol/L IPTG于16℃诱导His-INMAP 融合蛋白进行原核表达,SDS-PAGE 及免疫印迹检测蛋白表达.4.0 mol/L 尿素处理包涵体获得可溶性融合蛋白,镍亲和柱分离纯化融合蛋白抗原并检测蛋白浓度及纯度.以所获抗原免疫4 只Balb/c 小鼠,收集心脏抗血清.以纯化前、后的原核表达产物作为抗原,检测INMAP 多克隆抗体的特异性.通过免疫印迹分析INMAP 在正常肝细胞系L-02 及5个肝癌细胞系(PLC、HepG2、SUN449、SMMC-7721 和BEL-7402)中的表达差异.结果显示,His-INMAP 融合蛋白主要以包涵体形式存在,经4.0 mol/L 尿素处理可获得可溶性目的蛋白,且纯化后的抗原纯度较高(94.1%).INMAP 多克隆抗体能与INMAP 抗原特异结合.INMAP 在6 种肝细胞中具有多态性,除PLC 外,在其他肝癌细胞中其基因表达水平显著下调.本研究制备的INMAP 多克隆抗体特异性高,为INMAP 基因功能的进一步研究奠定了基础.     

我们参与微生物课外实验活动的几点体会

我们本学期在微生物教研组老师的指导下,开展第二课堂活动,采用伤寒、痢疾杆菌免疫家兔制备抗伤寒、痢疾诊断血清、在临床实践中,这两种诊断血清对伤寒和痢疾的诊断具有重要的意义。实验是以伤寒或福氏痢疾杆菌作为抗原,注射家兔,使之产生特异性抗体,整个过程需要巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞三类免疫细胞协同作用,表现为B细胞介导的免疫应答,最后产生抗伤寒、痢疾的特异性抗体。这是一个将课堂免疫理论与实践结合起来的课题。整个实验过程包括:菌株纯培养、生化鉴定、血清学鉴定、抗原制备、免疫家兔、免     

单克隆抗体及其应用

免疫学实验一向是以用特定抗原免疫动物所制得的抗血清作抗体用或从其中提取抗体,由于天然抗原大都是复杂物质,其表面可有多个相同的或不同的抗原决定簇,用其免疫动物所制得抗血清多是针对多种不同抗原决定簇的抗体的混合物,可与其它抗原发生交叉反应,使得免疫学实验不可能成为一种高度特异的实验;此外,由于受免疫动物的种属和个体差异的影响,所制备的抗血清的亲和力也不稳定,给结果的解释带来一定困难。因此,寻求一种高度特异性、高度均一性的抗体,是免疫学家们梦寐以求的目     

4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化

用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔获得GnRH抗体.用间接ELISA方法检测抗血清效价,并用Western blot鉴定其特异性.制备抗原肽亲和纯化柱,纯化多克隆抗体.结果显示,4种多克隆抗体效价高达1∶500 000(体积比),并能和相应的GnRH多肽特异性结合,纯化后的抗体在SDS-PAGE显示为单一条带.通过上述方法,获得4种高效价、高纯度的GnRH抗体,为低等动物GnRH的研究提供了理论依据.