采用染料亲和层析的方法纯化卵泡刺激素

采用染料亲和层析、QAE离子交换层析等纯化步骤，从绝经期妇女尿促性腺激素(HMG)粗品中分离纯化获得高纯度卵泡刺激素(FSH)产品，其中FSH的生物活性达到268.1IU／mg，卵泡刺激素与黄体生长素(LH)的活性比值达到259，产品超过欧洲药典对高纯度卵泡刺激素的要求。此工艺FSH的活性回收率高达65％，而且分离纯化步骤少，简单易行，适合于大规模生产。     

FSH对人腔前卵泡体外生长的影响

为探讨FSH对人腔前卵泡体外生长的影响 ,为此通过在培养液中加入不同浓度的FSH ,观察卵泡存活天数和卵泡发育增大 ,并测定卵泡E2 的分泌量 .结果发现 :卵泡体外存活天数 :对照组 (无FSH)为 2 .80± 1.6 9d ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 (FSH浓度为 0 .5IU/mL、1.0IU/mL、2 .0IU/mL)分别为 5 .36± 0 .6 3、5 .47± 2 .5 0、8.13± 4.19d ,与对照组相比 ,分别为P <0 .0 5、P <0 .0 1、P <0 .0 0 1.卵泡增大比率 :对照组为 2 0 .0 0 % ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为 35 .70 %、6 0 .0 0 %、81.2 5 % ,与对照组相比分别为P >0 .0 5、P <0 .0 5、P <0 .0 1.E2 分泌量 :对照组为 49.94± 2 0 .91pg/mL ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为 10 8.6 3± 41.0 6、315 .5 3± 93.39、438.2 4± 187.6 1pg/mL .对照组与Ⅰ组相比 ,P <0 .0 0 1;Ⅰ与Ⅱ组相比 ,P <0 .0 0 1;Ⅱ与Ⅲ组相比 ,P <0 .0 5 .可见FSH能使卵泡体外存活天数延长 ,卵泡发育增大 ,卵泡E2 分泌增加 ,并大致呈正相关关系 .     

褪黑激素被动免疫对母鸭卵泡发育和垂体激素水平的影响

在秋冬光照变短季节,选择产蛋量已下降的68周龄仙湖三号母鸭30只,随机分成三组。试验组用效价为1∶3200的兔化褪黑激素血清抗体进行被动免疫,对照组用正常兔血清进行被动免疫。在第三次免疫3h后每组随机选择6只母鸭采集血液,每隔4h采血1次,血样采用化学发光定量免疫分析测定血浆中的FSH,LH的含量,采完血后剖检卵巢,对卵泡进行分级计数。结果表明,经过三次免疫,可提高FSH水平(P>0.05),但对卵泡发育的影响差异不显著。提示在短日照下通过被动免疫可中和母鸭体内MLT,增加母鸭垂体激素水平,对母鸭生殖机能具有一定的激发作用。     

150株小单孢菌的分类及生物活性

对从承德地区土样中分离出来的150株放线菌进行了初步的分类研究,初步鉴定为小单孢菌属菌株.从中选出100株与3株小单孢菌属(Micromonospora)已知菌株进行生物活性的测定.通过测定发酵液的化学效价,筛选出2株庆大霉素效价高的野生型菌株,其中菌株80221的化学效价为983.58 mg/L,菌株80177的化学效价为1 076.88 mg/L.     

二仙益坤汤对围绝经期抑郁模型大鼠生殖激素及5-HT受体mRNA表达的影响

目的:观察二仙益坤汤对围绝经期抑郁模型大鼠部分生殖激素水平、神经递质及相关受体的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激复合造模法制作围绝经期抑郁大鼠模型,选取符合条件的雌性围绝经期SD大鼠70只,随机分为正常围绝经期对照组、模型组、补佳乐组、百忧解组、中药二仙益坤汤低、中、高剂量组,连续给药21天后,称量子宫、卵巢湿重,并计算脏器指数,酶联免疫法检测各组大鼠血清中生殖激素促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)及海马、下丘脑中神经递质五羟色胺(5-HT)含量,RT-PCR法检测下丘脑5-HTR1A、5-HTR2A受体亚型mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠子宫、卵巢指数降低,血清E2水平降低,FSH、LH水平升高,海马、下丘脑中5-HT含量均降低,下丘脑的5-HTR1AmRNA表达降低,5-HTR2AmRNA表达增高(P<0.05);二仙益坤汤各剂量组与模型组比较,子宫、卵巢指数及E2含量升高,FSH水平降低,海马、下丘脑中5-HT含量升高,5-HTRIA受体mRNA表达上调,5-HTR2A受体mRNA表达下调(P<0.05),结论:二仙益坤汤能通过调节部分生殖激素水平和神经递质及其相关受体亚型的表达从而产生抗抑郁作用。     

三联疫苗对大黄鱼常见细菌性疾病免疫保护的实验研究

采用0.5%福尔马林4℃灭活和65℃热灭活2种不同的方法制备三联疫苗作为抗原,以多次腹腔注射或浸泡的方式免疫大黄鱼,通过测定受免大黄鱼血清中抗体凝集效价变化并进行攻毒实验以评估保护效果.结果表明:以福尔马林灭活疫苗注射免疫途径效果最佳,其血清抗体效价平均达1536,攻毒后1周内免疫保护率为88.9%;热灭活疫苗注射免疫途径效果也比较明显,其血清抗体效价平均达1024,攻毒后1周内免疫保护率为76.6%;福尔马林和热灭活疫苗浸泡免疫大黄鱼也有一定效果,免疫保护率分别为55.7%和44.6%.     

海带多糖对铅中毒大鼠生殖系统的影响

通过建立大鼠铅中毒模型,研究海带多糖对铅中毒大鼠生殖系统的影响。大鼠48只,雌雄各半,随机分为正常对照组（正常饮食30d）、模型组（自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30d）、青霉胺组（自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30d＋按90mg.kg-1体重ip青霉胺21d）、海带多糖高、中、低剂量组（自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30d＋200mg.kg-1、100mg.kg-1,50mg.kg-1ig海带多糖）。实验结束处死大鼠,取血测定血铅,取睾丸、附睾、卵巢、子宫等生殖器官,称重并计算脏器指数,观察雄鼠精子数、死亡精子数、畸形精子数,测定促卵泡成熟激素（FSH）、生殖激素睾酮（T）、促黄体生成激素（LH）的变化。结果表明,海带多糖能降低铅中毒后大鼠的血铅,附睾、睾丸指数降低情况得到改善（P〈0.05）,精子的畸形率、死亡率有所降低（P〈0.05）;精子活动率、密度有所增高（P〈0.05）;T、FSH水平的降低得到改善（P〈0.05）,而对LH的水平影响不大（P〉0.05）。这说明海带多糖对铅中毒大鼠的生殖系统有保护作用,有望开发成天然低毒的铅中毒保护药。     

体外受精-胚胎移植及其衍生技术249个周期的临床研究

目的：总结本中心2年的体外受精-胚胎移植(IVF—ET)和单精子卵泡浆内显微注射(ICSI)技术研究及临床应用。方法：采用GnRHa／FSH/HOG和GnRHa／FSH/HMG／HOG、GnRHa／HMG/HOG及OCP/GnRHa／FSH/HOG四种超排卵方案治疗225对(249个周期)不孕夫妇。结果：取卵3383个。平均每周期取卵数13．59个;获受精卵3062个,受精率90．51％,卵裂率97．10％;249个周期植入胚胎762个,平均每周期移植3．06个。生化妊娠112例,临床妊娠95例,17例自然流产。截止目前已出生35个试管婴儿。其中。男婴14个,女婴21个,双胎妊娠4例,三胎妊娠2例。西北首例ICSI婴儿已1岁半,发育正常。结论：IVF—ET和ICSI是治疗不孕症的一种有效手段,特别是根据患者年龄、体重、卵巢功能状态及子内膜等因素。选择不同的超排卵方案和应用不同的药物剂量。随着技术中各个环节的进一步提高和完善,妊娠率会不断提高。     

山东地区杀虫植物筛选研究

室内测定了采自山东地区的117种植物样品的丙酮提取物对蚜虫、玉米螟、及田间采集的菜青虫等昆虫的生物活性,筛选出了对供试昆虫具有50%以上生物活性的植物样品47种,其中豆科5种,菊科4种,大戟科3种,其余各科不足3种.通过研究分析认为楝,苦参和烟草有进一步研究开发的价值.     

豚鼠气单胞菌灭活疫苗的安全性和免疫防治

对鲤鱼竖鳞病疫苗的安全性、免疫保护力和免疫效价进行了系统性的研究,并进行了口服免疫养殖应用实验。结果表明,该疫苗口服无毒性,注射途径的免疫保护率为８８．９％,免疫效价为２５００;口服途径的免疫保护率为８０％,免疫效价为２０００;而对照组的免疫效价为１５。养殖应用实验证明,口服疫苗可使鲤鱼竖鳞病的自然发病率降低５０％。     

家兔超数排卵的初步试验

本研究对家兔超排各种处理方法的超排效果进行了比较,并对处理过程中外周血浆 P 及17β～E_2的变化情况进行了放射免疫测定。当 FSH 用于兔的超排时,持续处理三天对于保证 FSH 的超排效果是必需的。FSH 的超排效果显著优于 PMSG(P<0.05),但在注射 PMSG 的同时注射10—12单位 FSH 则可使 PMSG 的超排效果有所提高。受试兔重复处理后,排卵数降低不明显(P>0.05),仅胚胎收集数明显下降(P<0.05),这说明重复处理对受试兔的超排反应的影响不明显,胚眙收集数下降可能是由于手术后的粘连所致。胚胎收集数与处理瞬前及输精瞬前的 P 浓度成负相关(r=-0.3616,-0.4334,P<0.05),与17β—E_2浓度成正相关(r=0.5036,0.5055,P<0.01);且受试兔经 PMSG 处理后的 P 升高幅度远较FSH 处理后为大(P<0.01)。由此说明:PMSG 超排效果较差的原因可能是其 LH的活性较高,引起卵泡的黄体化及带血卵泡的形成所致。     

新西兰大耳白兔超排前后生殖内分泌激素变化的研究

使用HMG(尿促性腺激素)+hcG(绒毛膜促性腺激素)对30只新西兰母兔进行超排(超数排卵)处理,于超排前后不同时期采集血清标本,测定FSH(卵泡刺激素),LH(黄体生成素),P(孕激素),E2(雌激素)的浓度.结果显示:FSH水平在超排后96h达高峰水平1 83±1 32ng/mL,是超排前的6倍.LH水平在超排后15h达0 19±0 09ng/mL高峰.P浓度在受孕后逐步升高,在超排后96h,P水平达35 07±16 71ng/mL,是超排前的10倍.E2水平超排后也有升高.结果表明家兔超排后生殖内分泌激素有显著性变化,而受孕后可出现高浓度的孕酮.同时也为通过测定激素水平提供了排卵和受孕的早期诊断依据.     

论新亚欧大陆桥鲁南经济带与胶济经济带的协调发展战略

新亚欧大陆桥的开通和发展,为鲁南经济带的振兴带来了良好的机遇。它使山东省形成了两条相互平行的经济带——鲁南陆桥经济带和胶济经济带。前者包括日照、临沂、济宁、枣庄和菏泽。1996年的国内生产总值(GDP)、人均GDP分别为1346.45亿元、4204元/人;后者包括青岛、济南、烟台、威海、淄博和潍坊,1996年的GDP和人均GDP     

山东省城市物流发展水平综合评价研究

文章设计构建了评价物流发展水平的指标体系,运用因子分析法、熵权法、灰色关联分析法、Kendall协调系数检验法以及系统聚类分析法,借助于SPSS25.0软件对2016—2018年山东省16个城市的物流发展水平进行综合评价和分析。研究结果表明:青岛的物流发展水平连续3年最高,潍坊、临沂、济宁、济南、烟台和淄博等城市物流发展处于中等水平,枣庄等9个城市的物流发展水平较低。通过分析发现山东省的物流发展水平地区差异比较明显,地区平衡性有待提高,最后结合该地区物流发展的基本状况,提出了相应的建议。     

山东省城市发展与旅游经济协调度评价研究

通过构建旅游系统与城市发展评价指标体系,以山东省17所城市为研究区域,运用熵值法、耦合度模型及耦合协调度模型对山东省的旅游与城市发展的耦合协调关系进行分析.结果表明:(1)就旅游与城市发展水平而言,属于城市发展滞后型的城市有青岛、烟台、济宁和泰安,属于旅游发展滞后型的城市有济南、淄博、威海、临沂、潍坊、日照、聊城、枣庄、德州、东营、菏泽、滨州、莱芜;(2)就耦合度而言,省内处于高耦合度水平的城市所占比重较大,旅游和城市的整体耦合水平较高;就耦合协调度而言,处于高水平耦合协调的城市较少,中度协调和低度协调的城市数量庞大;(3)青岛、烟台、威海为城市旅游和谐型,济南、济宁、临沂、潍坊、泰安、日照、淄博为城市旅游磨合型,聊城、枣庄、德州、东营为城市旅游拮抗型,菏泽、滨州、莱芜为城市旅游失调型.     

雌性Wistar大鼠、NIH小鼠性周期血清激素含量分析

目的通过测定Wistar大鼠和NIH小鼠性周期各期及超排后血清生殖激素雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的含量,比较不同性周期实验动物的血清性激素水平,研究动物血清性激素随性周期变化的规律。方法用阴道涂片法判定动物的性周期阶段并进行分组,用放射免疫分析法测定各组动物血清E2、LH和FSH的含量,进行统计学处理和分析。结果Wistar大鼠和NIH小鼠E2各时期间无显著差异;LH以超排组最高,与其他各组比较有极显著差异(P<0.01);FSH在动情后期最高,与各组比较有极显著差异(P<0.01)。结论雌性大、小鼠的血清生殖激素在性周期的不同阶段其含量呈规律性变化,超排后动物血清LH的分泌增加,以促进卵子的排出和黄体的形成。     

实验性糖尿病大血管病变SD大鼠模型的建立

为建立糖尿病大血管病变的sD大鼠模型,购3周龄雄性SD大鼠,适应性饲养一周后,禁食12h,腹腔注射链尿佐菌素（streptozotocin,STZ）45mg／kg,血糖稳定后,给予维生素D3（VitD3）注射液按总剂量50万IU／kg分3d灌胃,在上述基础上饲喂高脂高胆固醇饲料。测定大鼠血脂、血糖,制作主动脉石蜡切片,观察其形态学变化。8周后主动脉内膜下有大量泡沫细胞聚集,中膜增生,结构紊乱。正常组未出现类似变化。由此可知,该方法可用于糖尿病大血管病变SD大鼠模型的制作。     

过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响

摘要:目的 探讨过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。 方法 选择清洁级 SD 雌性大鼠32 只,随机分为 4 组:正常对照组、模型组、阴性对照组和 miRNA-320 过表达组,每组 8 只。 在实验过程中,每天观察各组大鼠饮食、活动和体毛等外在表现的差异。 采用 ELISA 检测各组大鼠血清中 E2、FSH、LH 的含量;采用 HE染色,光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化;采用 PCR 检测各组大鼠卵巢组织 miRNA-320、PGRMC1、BMP15的表达水平;采用 Western blot 检测各组大鼠卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白表达水平。 结果 与正常对照组相比,模型组大鼠活动迟缓、无精神、反应迟钝、食欲下降、体质量下降以及体毛暗淡无光泽;组织形态学分析表明,卵巢组织明显萎缩、皮质变薄、闭锁卵泡数目多以及间质纤维组织增多;血清 FSH、LH 显著升高,而血清 E2 及卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 表达水平均降低,差异具有统计学意义( P< 0. 05) 。 与阴性对照组相比,miRNA-320 过表达组大鼠活动量增加、反应较为敏捷、进食增多、体毛逐渐有光泽;间质纤维化明显减轻、成熟卵泡数量明显增加、黄体数增多;血清 E2 的含量、卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 的表达水平均升高,而FSH、LH 的含量降低( P<0. 05) 。 结论 顺铂可诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能障碍,过表达 miRNA-320 可改善顺铂诱导的卵巢早衰大鼠的卵巢功能。     

淫羊藿苷对更年期综合征模型大鼠的实验

目的:探讨淫羊藿苷对更年期综合征(CS)的影响.方法:将40只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、淫羊藿苷低剂量治疗组(质量分数为25 mg/kg)、中剂量治疗组(质量分数为50 mg/kg)和高剂量组(质量分数为100 mg/kg)5组,每组8只.除假手术组外,其余各组大鼠去势4周,复制CS动物模型后,分别给予灌胃相应的生理盐水和药物60 d,采用放射免疫分析法检测各组大鼠血清雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)以及下丘脑β-内啡肽(β-EP)的含量,放射配体结合分析法检测子宫、脾脏雌激素受体(ER)水平.结果:与假手术组相比,模型组大鼠E_2、下丘脑β-EP以及子宫、脾脏ER表达量显著性下降(P0.05),血清FSH与LH表达量显著性升高(P0.05).与模型组相比,淫羊藿苷低、中、高剂量治疗组模型组大鼠E_2、下丘脑β-EP以及子宫、脾脏ER表达量显著性上升(P0.05),血清FSH与LH表达量显著性降低(P0.05),且淫羊藿苷剂量越高,治疗效果越高.结论:淫羊藿苷对更年期综合征有治疗作用.