成纤维细胞和ES细胞在小鼠和兔去核卵母细胞内发育

以昆明白小鼠成纤维细胞和胚胎干（ES）细胞作为供核细胞,以昆明白小鼠和日本大耳白兔的MⅡ期去核卵母细胞作为受体,采用核移植方法,构楚了克隆胚胎．在同种克隆中,以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率明显低于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（24．4％相对于56．9％,P〈0．05）,1．8％的ES细胞克隆胚胎发育到囊胚阶段,而成纤维细胞克隆胚胎没能发育到囊胚阶段;在异种克隆中,以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（89．6％）和囊胚发育率（18．8％）明显高于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（54．2％）和囊胚发育率（4．2％）．     

1231例骨髓细胞形态学的诊断分析

目的:探讨骨髓细胞形态学改变及其对临床的诊断意义.方法:回顾性分析1 231例患者的骨髓检查,并对其细胞化学染色结果进行分析.结果:按细胞形态及细胞化学染色可将1 231例的患者分为,急性非淋巴细胞性白血病占11.9％,急性淋巴细胞性白血病占6.7％,溶血性贫血占3.3％,缺铁性贫血占13.0％,感染占11.2％等.结论:细胞形态学改变是诊断血液病学的重要指标,骨髓细胞学检查对确诊血液病是必要的.     

流式细胞仪法检测4HPR诱导Hela细胞凋亡的百分率

目的：实验结果表明4HPR抑制Hela细胞生长的机理之一是诱导该细胞凋亡。本文用流式细胞仪检测不同浓度的4HPR作用不同时间Hela细胞凋亡的百分比及细胞周期变化。方法：体外细胞培养及流式细胞仪检测法。结果：2μg／m的4HPR作用24、48、72h后,Hela细胞的凋亡百分比分别为4.1％、6．6％、26％;4μg／ml的4HPR分别为5．1％、8．3％、28％、8μg／ml的4HPR分别为5．9％、6．2％、34％。细胞周期分布图中,G1细胞明显减少。结论：上述结果提示Hela细胞凋亡的百分比与4HPR的作用时间、作用浓度呈正相关。     

低剂量碳离子束辐射增强AdCMV-p53转染对人非小细胞肺癌细胞的治疗效果

探讨低剂量碳离子束预辐照对AdCMV-p53转染非小细胞肺癌细胞的影响,观察了20和40MOIAdCMV-p53转染经^12C^6＋束流或γ射线预辐照的H1299细胞后,外源性p53的表达、细胞周期、细胞凋亡和细胞存活等．结果显示,经碳离子束预辐照后AdCMV-p53转染细胞p53阳性细胞所占比例高达90％多,明显高于γ射线预辐射后AdCMV-p53转染细胞p53阳性率．低剂量碳离子预辐照明显阻止AdCMV-p53转染细胞G0／G1阻滞的发生,促进G2／M阻滞和细胞凋亡的发生．碳离子束辐射诱导AdCMV-p53转染组相对生物学效应（RBE）比单纯碳离子束辐照组增加30％～60％,比单纯AdCMV-p53转染组增加20％～130％,比单纯γ辐射诱导AdCMV-p53转染组增加30％～70％．结论：低剂量碳离子束预照射明显增强外源性p53的表达和AdCMV-p53转染对非小细胞肺癌细胞的抑制．     

中国鲎鲎素对人胃癌BGC—823细胞增殖的抑制作用

应用从中国鲎血细胞中提取的鲎素处理人胃癌BGC－823细胞,研究海洋生物活性物质的抗肿瘤作用。实验结果显示,经2．0μg/ml鲎素处理的BGC－823细胞生长缓慢,倍增时间延长,细胞集落形成能力减弱,细胞生长抑制率达62．67％,细胞分裂指数下降40．91％,处理后细胞碱性磷酸酶细胞化学反应减弱、分布改变、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶活力分别下降40．59％和76．05％。结果表明,鲎素能有效地抑制胃癌细胞的增活动,具有与癌细胞诱导分化物相似的抗肿瘤效果。     

慢性粒细胞性白血病骨髓移植后的染色体观察

为了观察慢性白血病骨髓移植术后患者的生存情况，笔者对费城染色体进行了检测，结果表明：患者术后９个月，ＸＸ核型细胞占８７％，ＸＹ核型细胞占１３％，费城染色体阴性；术后１年，ＸＸ核型细胞占６４％，ＸＹ核型细胞占３４％，费城染色体阳性细胞占２％．慢性白血病骨髓移植术后观察费城染色体，能及时反映预后情况     

不同发育阶段小鼠胚胎在体外形成单卵双胚的比较

小鼠早期胚胎在去掉其透明带后,用吸管(2—和4—细胞卵)或微针(8—细胞卵和桑椹胚)作显微手术,将胚胎平分,产生“半胚”,然后在Whitten氏液中培养。比较了不同发育阶段小鼠半胚在体外的发育能力。2—、4—、8—细胞卵和桑椹胚在显微分割后,分别有26.9％、13.0％、48.8％和29.2％的半胚正常发育,其中8—细胞卵的半胚在体外的发育结果最好。显微操作对2—和4—细胞卵的损伤程度较低,对8—细胞卵和桑椹胚的损伤程度较高。获得了同卵半胚对在体外的正常发育结果,约有18％来自桑椹胚的半胚对和近23％来自8—细胞卵的半胚对发育正常。     

不同溶剂浸取红豆杉细胞中的紫杉醇的研究

用7种单一溶剂浸取红豆杉细胞中的紫杉醇,研究表明,甲醇有最好的浸取效果,紫杉醇含量占细胞干重的0.03315％,在23种混合溶剂中,CH3COOC2H5/C2H5OH,CH3COCH3/CH3OH,CH3COCH3/C2H5OH,CH3OH/CHCl3浸取效果最好,其紫杉醇含量占细胞干重分别为0.05166％,0.04923％,0.04276％,0.03981％.     

脱水对番木瓜体细胞胚贮藏和萌发的影响

由悬浮培养获得的番木瓜体细胞胚含水量高达90％以上，成苗率低，不能贮藏。经脱水，含水量为50％－70％的干燥体细胞胚在MSO培养基上的成苗率为82％，在室温（25℃）下贮藏60天后存活率为83％。贮藏期间体细胞胚无一萌, 但含水量小于30％的干燥体细胞胚存活率低。扫描电镜观察表明，新鲜细胞胚表面存在很多突出细胞，当体细胞胚萌发时，这些细胞进一步分裂，形成愈伤组织或次级体细胞胚，妨碍体细胞胚的正常萌发。而含水量50％－70％的干燥体细胞胚表面细胞枯死，但生长点却完成无损。     

离心法液基细胞学在肺癌支气管刷片诊断中的应用

目的:探讨离心法液基细胞制片技术(TLT)在肺癌支气管镜刷片中的应用价值.方法:收集经支气管镜刷片检查并有组织学对照的病例277例,采用离心法液基细胞制片和传统制片同时进行细胞学诊断,分析两种制片方法诊断肺癌的敏感度、特异度及分型的符合率.结果:离心法液基细胞学和传统细胞学诊断的敏感度分别为80.4％和67.6％,特异度分别为92.3％和88.5％.细胞学分型诊断与组织学的符合率,离心法液基细胞学和传统细胞学诊断分别为:鳞癌为93.3％和85.5％,腺癌分别93.8％和87.1％,小细胞癌94.4％和86.1％.结论:离心法液基细胞制片技术在支气管镜刷检制片中是一项简便易行且便于质量控制的新技术,在肺癌的诊断中具有较高的敏感度和分型诊断符合率.     

绵羊毛囊细胞分离培养的观察

应用0．25％与0．125％的胰酶分离绵羊毛囊细胞，获得2种不同形态的毛囊细胞；其次，对比分析了热消化法与冷消化法对分离毛囊细胞的影响，结果表明：热消化法优于冷消化法；同时，观察到新疆细毛羊与阿勒泰羊的毛囊细胞形态基本一致。     

培养原代小鼠组织细胞检验细胞实验室技术操作规程

目的通过培养小鼠原代组织细胞,检验本科室己建立的一套细胞实验室技术操作规程能否满足细胞培养要求。方法培养小鼠原代成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞和胚胎成纤维细胞。计算原代培养成活率、传代成活率、冷冻及复苏成活率。结果成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞、胚胎成纤维细胞原代培养成活率分别为89%、96%、100%、100%、100%、80%、100%和90%;传代成活率分别为76%、93%、100%、92%、100%、66%、80%和92%;冷冻及复苏成活率分别为100%、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%。结论通过计算KM小鼠8种组织细胞原代培养、传代、冷冻与复苏的成活率,证明现有的细胞室技术操作规程基本上能够保证成功培养出常规原代细胞,并能传代、冷冻和复苏。     

建立人输卵管上皮细胞无血清培养

人输卵管上皮细胞（HOEC）可以体外较长时间无血清培养,DMEM／F12培养液的培养效果优于Ham’sF10,在加有多种因子和胎球蛋白的培养液中,HOEC可贴壁生长,生长能力达到合质量分数15％FCS的对照组的30％～40％,一般可传代2次,最长培养可维持38d,细胞形态与有血清培养差别不大,虽然无血清培养HOEC的生长速度、密度、传代成功率远不及有血清培养,但能抑制成纤维细胞生长,维持较纯的上皮细胞。     

酸奶发酵剂高浓度培养的研究

对传统酸奶菌保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌进行了高浓度混合培养的研究。综合利用中和法、补料培养法及好气培养法等,确定了Ｌ．ｂ和Ｓ．ｔ的最佳培养工艺条件。其最佳培养基配比为：脱脂奶粉１０％、乳清粉１％、酵母膏１％、磷酸氢二铵０．２５％;培养过程控制ｐＨ值为５．８～６．３,摇床培养（（８５～１００）ｒ／ｍｉｎ）４ｈ后,补加２％乳糖;继续培养至５．５ｈ后结束,菌数达到２５．７５亿个／ｍＬ     

用大鼠心肌条件培养基建立来源于C57BL/6J小鼠的ES细胞系

报道一种新的建立C57BL/6J小鼠ES细胞系的方法。采用大鼠心肌条件培养基,在不使用饲养层细胞和白血病抑制因子(LIF)的情况下,从C57BL/6J品系小鼠中建成1个ES细胞系即MESPU 41,成系率为1.0%。MESPU 41细胞为XX型,核型正常率高达89%,表现出XX型ES细胞系少有的稳定性。进行体内分化实验时MESPU 41细胞能发生广泛分化形成畸胎瘤。嵌合体制作实验证实MESPU 41细胞具有嵌合能力,能参与胚胎的发育。采用RT-PCR方法,检测出大鼠心肌细胞有LIF mRNA的表达,这可能与其条件培养基保持ES细胞未分化状态并使X染色体稳定有关。同时,还对大鼠心肌细胞进行了永生化的尝试,共得到了4个永生化克隆,这将进一步简化ES细胞建系和培养工作,为进一步研究ES细胞在体外培养过程中的稳定性开创了新的起点。     

Increased production of recombinant prourokinase with porous microcarrier cell culture by periodic pressure oscillation in a stirred tank reactor

0 IntroductionIn microbiological fermentation and plant cell cul-ture ,there are manyexamples of applying“periodic oper-ation”to enhance productivity[1-3],although the mecha-nismof this effect remains obscure .In animal cell cul-ture ,applying intermittent hydrostatic pressure could in-crease cell proliferation[4-6]orincrease enzyme activity[7].Process parameters such as temperature , pressure , pH,light intensity and nutrients concentration may be chosentointroduce physical stimuli .Cytopo…     

神经网络模型对造血干细胞体外扩增效果评价及预测

采用神经网络技术对造血干细胞HSCs体外扩增能力建立了评价及预测模型.总结了前人的实验结果,共获得341组数据.选取细胞接种密度、细胞因子组合、细胞来源、血清、基质细胞、反应器类型和培养时问等7个影响因子作为网络输入特征参数,分别对有核细胞(nUClear cells,NCs)、CD34 细胞和成集落细胞(colony-forming units,CFU-Cs)进行体外扩增能力的拟合评价及预测.选取124、90及86组实验数据分别用于NCs、CFU-Cs和CD34 细胞为评价指标的神经网络训练;而17、10及14组实验数据分别用于NCs、CFU-Cs和CD34 细胞为评价指标的神经网络预测.结果表明.对NCs、CFU-Cs和CD34 细胞的区间训练准确率分别为85.5%、86.7%和86.1%;区间预测准确率分别为82.4%、70.0%和71.4%.由此可知.人工神经网络的非线性模拟使定量描述HSCs体外扩增效果与培养条件问的关系及预测HSCs的最佳体外扩增条件成为可能.     

应用相差显微镜和扫描电镜对离体培养的大白鼠甲状腺滤泡上皮细胞的研究

利用 Ham's F_(12)培养液对大白鼠甲状腺细胞进行了原代细胞培养,在相差显微镜下观察了培养的甲状腺细胞贴壁及生长情况,还对甲状腺的组织小块贴壁实验进行了反复观察,结果证明,在我们的试验条件下组织块贴壁细胞培养技术有利于大白鼠甲状腺细胞的培养.我们还把甲状腺组织小块接种在玻璃盖片上,并用相差显微镜及扫描电镜对培养的甲状腺细胞表面形态进行了观察,发现在 Ham's F_(12)培养液内加入15%胎牛血清,甲状腺细胞生长良好,细胞呈园形而小,核内有1-2个核仁,还能见到细胞分裂的图像.     

秋水仙素对玉米根尖细胞有丝分裂的影响

本文以玉米为材料,不同浓度的秋水仙素（0%0,.05%,0.1%,0.2%）为处理液,分别比较不恢复培养和恢复培养不同时间后不同浓度的秋水仙素对玉米根尖有丝分裂的影响.结果表明：（1）在试验浓度范围内,根尖膨大率随处理浓度增加呈上升趋势.（2）不恢复培养时,秋水仙素浓度为0.05%和0.1%较浓度0.2%时能积累较多的中期细胞.（3）恢复培养时,秋水仙素浓度低于0.1%时,抑制效应持续时间较长。     

贴壁及悬浮培养的Trex-293细胞生长及其重组腺病毒制备产率的比较分析

为了提高病毒产率并避免制备的重组腺病毒产物中残留的动物血清,将贴壁生长的Trex-293细胞用无动物血清的CD293培养基在搅拌式培养瓶中悬浮培养。分析比较其生长特征及不同条件下的病毒产率。结果表明悬浮培养的细胞生长为稳定状态的时间比贴壁培养时稍长,但每次以(4—6)×105cells/mL密度传代。(3—4)d后基本达到2×106cells/mL,21 d达3×106cells/mL以上,比贴壁细胞密度约高3倍。培养初期,悬浮细胞存活率稍低,培养14 d开始维持90%以上,细胞倍增时间约32 h。而贴壁细胞存活率是基本维持在95%以上。重组腺病毒以200,500和1 000 VP/cell的比例感染悬浮细胞所获产率均值各为18 000,14 000和990 VP/cell,而1 000 VP/cell的比例感染贴壁细胞所获产率均值为10 500 VP/cell。结论为Trex-293细胞用无动物血清的培养基在搅拌式培养瓶中可悬浮培养,当重组腺病毒感染比例为200 VP/cell,感染后48 h,细胞存活率50%时收获有利于提高病毒产率,且高于感染贴壁细胞所获产率。