垂柳的组织培养及植株再生体系研究

对垂柳愈伤组织和植株再生体系进行了研究,结果显示茎段比较适合诱导愈伤组织,质量浓度为1.0mg/L和2.0mg/L的6-BA均能诱导垂柳茎段愈伤组织;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.5 mg/L的激素配比最为适合胚状体和芽的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+Ac 0.3%培养基能促使垂柳根的形成,且能促使芽生长,最终形成幼苗。     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

生菜(Lactuca sativa var ro mana Hort.)下胚轴愈伤组织的诱导与植株再生

通过对生菜下胚轴的愈伤诱导和植株再生的研究 ,发现诱导愈伤组织时 ,MS培养基中加 0 .5mg/L　 6 BA 1mg/L　 2 ,4 D 0 .1mg/LNAA效果最好 ,其出愈率达 94 %;愈伤组织分化为芽时 ,在MS 1.0mg/L　 6 BA 0 .0 5mg/L　NAA中分化频率最高 ,达 10 0 %.再生苗可在 1/ 2MS 0 .5mg/L　NAA中诱导生根成完整植株 .     

黄蜀葵茎段植株再生体系的建立和花各部愈伤组织总黄酮含量的测定比较

以黄蜀葵种子获得无菌苗的茎段为外植体,研究了不同浓度激素配比对愈伤组织诱导及分化再生植株的影响.结果表明:以75%酒精30s+0.1%升汞10min灭菌黄蜀葵种子,可获得较高发芽率的无菌苗;愈伤组织最适诱导培养基为改良MS+KT0.8 mg/L+IAA0.6mg/L,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.05 mg/L;最佳生根培养基为:1/2 MS+NAA0.1 mg/L;且移栽后成活率可达95%.用紫外分光光度法测定花和各部愈伤组织总黄酮的含量,对比发现:花中总黄酮的含量高于各部愈伤组织,愈伤组织中子房愈伤组织的总黄酮含量高于其他部位.     

糯米藤的离体快繁系统的建立

对糯米藤（Memorialis hirta BL.Wedd.）进行了离体快繁研究。叶片和茎段在附加NAA0．5mg/L＋KT1．0mg/L或NAA0．5mg/L 6-BA 1.0mg/L的MS培养基上，诱导形成愈伤组织后再分化形成植株；腋芽在附加NAA0．1mg/L KT1.0mg/L或NAA0.1mg/L 6-BA1.0mg/L或IAA0.1mg/L 6-BA 1.0mg/L的MS培养基上诱导出丛生芽，并再生成植株。     

小麦叶基切段愈伤组织的诱导和植株再生

从3～5d龄小麦籽苗幼叶基部切段诱导出大量愈伤组织。诱导可再生的愈伤组织的培养基为MS 1．5mg／L 2，4-D 0．2mg／L，激动素(KT) 500mg／L，水解酪蛋白(CH) 120mg／L，天冬酰胺 100mg／L，肌醇 3％蔗糖 0．7％琼脂粉。当愈伤组织转移到生长调节物质改变为2mg／L KT，1mg／L NAA和0．1mg／L 2，4-D的MS培养基上培养后，出现了苗的分化。当分化苗在无机盐分减半的MS培养基上培养后，产生了根。愈伤组织的形成和植株再生的频率与外植体的位置和籽苗的发育阶段密切相关，3～4d龄苗叶基1cm处的切段效果最好。叶基愈伤组织的分化能力可保持3～4个月。     

百脉根植株高频再生体系的建立

以百脉根的下胚轴为外植体材料,探究不同激素种类和不同浓度对百脉根愈伤组织的诱导、分化增殖及生根的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4—D 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导愈伤组织分化最佳培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导不定芽生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂,生根率达100%;实验建立了一个高频的百脉根再生体系,为百脉根基因工程操作奠定了基础.     

前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

凤尾兰花瓣组织培养初报

将凤尾兰花瓣接种于MS基本培养基上,培养基附加2.4—D0、5mg/l、NAA0.5—1mg/l、6—BA2mg/l、水解乳蛋白500mg/l及蔗糖3％诱导愈伤组织的形成。MS培养基附加6—BA2mg/l,NAA0.5mg/l及蔗糖3％诱导愈伤组织分化。值得注意的是在培养过程中,花瓣小片以及愈伤组织的颜色有几次转变。在愈伤组织上首先分化出小根,逐渐分化出小苗。     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导及不定芽分化

为建立枣高效花药培养体系,获得再生植株,以‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药为外植体,利用L9(34)正交设计筛选适宜枣愈伤组织诱导的培养基;并以MS和WPM培养基添加不同浓度的TDZ,2,4-D,IAA,GA3试验了花药愈伤组织的分化能力。结果表明,适宜‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导的培养基为1/4 MS,NAA的质量浓度0.3 mg·L~(-1),2,4-D的质量浓度1.5 mg·L~(-1),麦芽糖的质量浓度30.0 g·L-1;诱导得到3种类型的愈伤组织,其中黄白色致密愈伤组织分化能力强。在分化培养基MS,TDZ的质量浓度0.1 mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.1 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)和培养基WPM,KT的质量浓度0.2mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.5 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)上均能分化得到正常不定芽,分化率分别达80.0%~100.0%(‘鲁枣2号’)和41.7%~50.0%(‘鲁枣6号’)。建立了‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药培养体系,获得再生植株。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生体系的优化

为了建立和优化小麦成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生体系,以京411、Brock、春麦S10鉴-6和春麦津强5号4种小麦的成熟胚为外植体,进行愈伤组织的诱导、分化及再生体系优化的研究.结果表明:(1)京411在各种诱导培养基中的平均出愈率高于其他3个品种;(2)京411在MS1(MS+2.0 mg/L 2,4-D+200 mg/L CH+100 mg/L MI+250 mg/L Glu)培养基中的出愈率最高,因此将该培养基定为京411的最佳诱导培养基;(3)同不切相比,采用纵全切的方式处理京411的成熟胚能够获得较高的出愈率和质量较好的愈伤组织;(4)在分化培养基F7(MS+10 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA)中,京411成熟胚的愈伤组织分化率、出苗率和生根率最高,幼苗长势最好,因此该培养基可以用作京411成熟胚愈伤组织的分化培养基.     

林茜草愈伤组织诱导与组培苗的快速繁殖研究

研究林茜草的茎段培养分化技术,探索林茜草快速繁殖适合培养条件;摸索出诱导林茜草愈伤组织的最佳培养方法,为林茜草人工栽培用以提取其所含代谢药用成分的工业化生产提供原材料.根据植物组织培养方法,将林茜草茎段用不同浓度的生长调节剂培养基配方培养,使其诱导林茜草的茎、叶、进行愈伤组织诱导.结果表明,MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基适于诱导愈伤组织发生;MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基可诱导林茜草茎段能迅速分化为幼苗;MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基与MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基先后使用,可诱导林茜草生根形成完整植株.     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

木槿愈伤组织继代培养在不同培养基上的变化

木槿下胚轴在MS附加2,4-D(0.5mg/l)、激动素(0.1mg/l)和3％蔗糖的培养基(MS_1)上诱导出愈伤组织。将愈伤组织分别转移到不同培养基上,在特定培养基上可以发生根、芽和体细胞胚,并萌发成苗。组织切片观察了胚和器官的形态建成。最后,文中就激素、蔗糖浓度以及愈伤组织类型对形态建成的影响作了讨论。     

黄瓜再生体系的建立

本实验以黄瓜(CucumissativusL.)品种“LS-21”为实验材料,按如下培养基配方:MS培养基,附加6-BA(0.8～1.6)mg/l IAA0.2mg/l;不同浓度的6-BA分别与NAA及2,4-D配合,研究影响黄瓜组织培养的诸多因素,建立了黄瓜离体子叶高频不定芽再生系统。主要结果如下:黄瓜5-6日苗龄无菌苗子叶作外植体,愈伤组织生长旺盛,芽诱导率高;7-8天的外植体则生长势弱,不利再生芽的分化。6-BA(1.2～1.6)mg/l IAA0.2mg/l,芽分化频率较高,其中6-BA1.2mg/l的芽分化率可达51%;待再生芽长至2-3cm时移入生根培养基(1/2MS 0.1mg/LIAA),生根率达90%,40-60d可得到完整再生植株。