伴性基因的选择原理

本文根据基因平衡定律和伴性基因的遗传特点,从理论上讨论了伴性基因的选择原理。主要对显性和隐性伴性基因的完全和部分选择问题进行了分析和讨论,并推导出了各种选择方式下基因频率的计算公式。     

双链干扰RNA对基因抑制的发现——2006年诺贝尔生理医学奖评介

2006年度诺贝尔生理医学奖授予了美国斯坦福大学医学院病理遗传学教授安德鲁.费尔(A ndrew F ire)和马萨诸塞大学医学院分子医学教授克瑞格.梅罗(C raigM ello),表彰他们发现了“RNA-干扰,双链RNA对基因的抑制”,这是在遗传信息传递过程控制中的一个基本的机制.他们的工作不但具有重要的理论意义,而且使我们看到癌症、爱滋病、遗传病治疗的希望.文章系统地介绍了这一工作的研究背景、方法、结论,并分析了该结果在生物学中的意义.     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白的crylC基因

目前,有8种crylC类基因已被克隆,其主要分布在杀虫亚种和鲇泽亚种.本文对杀虫晶体蛋白CrylC的结构与功能、作用方式、抗性问题及基因改造等方面作一综述,还就存在的问题与前景进行探讨.     

LEA基因及Lea蛋白的研究进展

综述了有关ＬＥＡ基因及Ｌｅａ蛋白的研究进展：ＬＥＡ基因与Ｌｅａ蛋白的结构和功能;ＬＥＡ基因表达和Ｌｅａ蛋白积累与环境胁迫的关系;一种ＬＥＡ基因即ＨＶＡ１基因及其转基因研究     

几种常用的基因敲除技术

随着功能基因组学研究的深入发展，基因敲除技术逐渐成为基因功能研究的重要手段，本文就常用的三种基因敲除技术，即同源重组、插入突变、RNA干扰各自的原理、适用的范围和优缺点作简要介绍。     

电击基因转移系统的研究

电击法是一种新的生物技术，其转化效率是用化学法所得不到的．ＬＮ—１０１和ＬＮ—２０１是两种基因脉冲导入系统，能提供可以控制的高压、大电流脉冲。     

环状芽胞杆菌（Bacilluscirculans）的转化和中性蛋白酶基因的表达

用枯草芽胞杆菌质拉载体ｐＮＱ１２２和含有中性蛋白酶基因的重组质粒ｐＭＰＲ８转化环状芽胞杆菌Ｃ－２，转化频率为１．０×１０３转化子／μｇＤＮＡ．含有ｐＭＰＲ８的转化子能在酪蛋白平板上形成清晰的水解圈，其蛋白酶活性与相同质粒转化枯草杆菌ＤＢ１０４所得酶活性相近．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证实了转化细胞中存在质粒ｐＮＱ１２２和ｐＭＰＲ８，两种质粒在该菌中的稳定性差别很大．     

苏云金芽孢杆菌高效菌株cry基因分析及多价基因组合的研究

对本室筛选的高活性Ｂ．ｔ．野生株进行了ｃｒｙ 基因检测,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明ｃｒｙＩＡｃ和ｃｒｙ１Ｃ位于质粒上．利用接合转移和电穿孔转化等方法对这些菌株进行了遗传改良研究．结果表明：高效野生株７４０４、ＨＤ－１－Ｘ和９５１０ 不易获得并表达外源ｃｒｙ 基因,而高效野生株Ｂｔｉ． ｔ－１８９７ 的电转化频率较高,并获得以Ｂｔｉｔ－１８９７ 为受体,对甜菜夜蛾、棉铃虫、黏虫和淡色库蚊均有毒力,具有ｃｒｙＩＡｃ、ｃｒｙＩＣ、ｃｒｙＩＶ及ｃｙｔ多价基因的广谱工程菌株．     

大麦黄矮病毒抗性基因的Ti质粒构建

通过酶切、连接、转化等技术 ,将大麦黄矮病毒抗性基因复制酶基因ORF2插入Ti质粒pGA4 82的T DNA区 ,从而提供了新的目的基因转化小麦的农杆菌 /质粒系统 .     

同源盒基因Hox2.3在小鼠造血调控中的作用

同源盒基因在造血细胞系细胞中表达,它们的表达具有细胞类型特异性,为了阐明同源盒基因在小鼠造血调控过程中是否有决定性作用,我们采用反义脱氧寡聚核苷酸抑制试验和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)试验,证明小鼠同源盒基因(Hox2.3)对正常小鼠髓系血细胞的生长、发育调控起重要的作用。     

小麦叶绿体psbA基因的克隆及表达

用ＰＣＲ直接从小麦叶绿体基因组扩增到完整的ｐｓｂＡ基因，并构建了ｐｓｂＡ基因的克隆ｐＴＤ１Ⅱ。为研究ｐｓｂＡ基因在Ｅ·ｃｏｌｉ中的表达，将完整的ｐｓｂＡ基因正向插入高表达载体ｐＫＫ２２３－３中构建表达克隆ｐＫＴＤ１。含有重组表达质粒的转化细胞经ＩＰＴＧ诱导后提取总蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，小麦叶绿体ｐｓｂＡ基因能在Ｅ·ｃｏｌｉ中表达３２ｋＤ的Ｄ１蛋白，表达的Ｄ１蛋白占细菌总蛋白的３％以上。     

NPR1基因研究进展

从拟南芥(Arabidopsis thaliana)中克隆到的NPRl基因是植物系统获得性抗性中的一个关键基因，它在植物抗病基因工程中将起到重要的作用。近年来，国内外许多学者对NPRl基因进行了较系统的研究。在此对NPRl基因的结构、作用机理、核定位以及与植物抗病性的关系等方面的研究进展进行综述，并展望它在抗病育种工作中的应用前景。     

肝片吸虫抗原基因的克隆与筛选

提取肝片吸虫总RNA,经oligo(dT)-纤维素柱分离得到mRNA,反转录合成cDNA后,连接Eco RI人工合成接头,酶切后克隆到表达型质粒载体pGEX-1λT,转化大肠杆菌JM107菌株构建肝片吸虫cDNA文库(文库大小约为2.1×105)．用免疫印迹筛选出5个阳性克隆,分别命名为pFH2,pFH4,pFH16,pFH21和pFH29．其中pFH21印迹信号最强．Eco RI酶切pFH21显示插入片段大小约为1.0kb.重组子pFH21经SDS-PAGE电泳显示表达有一个重组蛋白,分子量约为48kD.     

抗α毒素单链抗体基因表达载体的构建

将 2种抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体 (ScFv)基因ScFv - 2E3和ScFV - 1A8分别克隆至表达质粒pUC119,pET - 2 0b ,pET - 2 8a和pHOG2 1中 ,构建了重组质粒PUC -2E3和pUC - 1A8,pET2 0b - 2E3和pET2 0b - 1A8,pET2 8a - 2E3和pET2 8a - 1A8以及pHOG - 2E3和pHOG - 1A8,然后分别转化至大肠杆菌中 ,提取质粒 ,并进行酶切鉴定和核苷酸序列分析 ,结果表明构建的重组质粒中均含目的ScFv基因片段 ,说明已成功构建了 8个含ScFv基因的表达质粒     

以潮霉素B磷酸转移酶基因为遗传标记的启动子探针型载体的构建

用来自大肠杆菌的潮霉素Ｂ磷酸转移酶基因（ｈｙｇｒ）作为遗传标记构建了启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ８,该基因的转录和翻译起始区以及５’－端编码区两个密码子均被除去,载体骨架为大肠杆菌质粒ｐＵＧＶ２,该标记基因的终止子来自Ｐｈａｎｅｒｃｈａｅｔｅｃｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ的ＬＩＰ６基因     

豌豆小叶突变体基因(af)的定位

以半无叶类型、普通类型豌豆为试验材料,对小叶突变体基因位置与子叶颜色基因、初花节位基因的遗传距离进行了研究。结果表明:小叶突变体性状是受单基因控制的,呈完全隐性,小叶突变体基因af、子叶颜色基因i、初花前节位lf表现连锁遗传,且位于第一染色体,测得小叶突变体基因af和子叶颜色基因i之间的遗传距离为6.71个遗传单位,小叶突变体af基因和初花节位基因lf的遗传距离为37.73个遗传单位,三对基因之间的顺序为lf,af,i。     

与小麦高分子量谷蛋白基因探针杂交的阳性克隆分离及基因在重组子上的定位

将经San 3A部分酶切后的小麦总DNA片段克隆到λCharon40载体上构建了小麦基因文库.以两个人工合成的同源于小麦高分子量(HMW)谷蛋白基因的片段对此基因库进行筛选,获得了两个阳性克隆,推测其中一个包含了HMW谷蛋白全部的基因顺序.两个克隆的部分限制性内切酶位点已被确定.在Southern杂交中,用位于基因编码区内的寡核苷酸片段作探针,将阳性部分定位在一定的酶切片段上.