人乳头瘤病毒基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变的分布规律及临床意义

为探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变中的分布规律及其与宫颈鳞癌发生发展的关系,应用PCR-反向点杂交技术对109例宫颈病变患者(宫颈鳞癌40例、CIN69例)进行HPV感染基因分型测定.结果显示,109例标本中HPV阳性检出率为100%,最常见HPV基因型为HPV16型;随着病变程度增加HPV单一感染比例逐渐升高,多重感染比例逐渐下降,单一感染以高危型HPV16型感染为主;HPV16型在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC中阳性率分别为30.77%(8/26)、59.09%(13/22)、90.48%(19/21)、90%(36/40),阳性率呈依次上升趋势.宫颈鳞癌及癌前病变与HPV感染直接相关,宫颈癌癌前病变是高、低危HPV共同作用的结果;高危型HPV持续感染是高级别子宫病变及癌变发生的必要条件;HPV16型病毒感染是国人子宫颈鳞癌形成的主要原因.     

人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈癌早期筛查中的应用

目的探讨女性生殖道感染人乳头瘤病毒（HPV）基因检测与颈癌前病变的关系。方法采用HPV分型基因检测系统对妇科门诊就诊的妇女进行宫颈细胞HPV DNA检测（同时检测5种低危型和18种高危型HPV亚型）。结果827例标本中共检出HPV阳性210例（25．4％）,共检出20种HPV亚型,其中单纯低危型HPV亚型感染45例（5．4％）,单纯高危型HPV亚型感染142例（17．2％）,高危、低危亚型共同感染13例（1．6％）;检出感染单一HPV亚型187例（22．6％）,感染两种亚型以上23例（2．8％）。低危型主要为HPV11,其次为HPV43、6;高危型主要为HPV16、其次为58、31、33、18等亚型。结论女性生殖道HPV感染者较易发生颈癌前病变,提示早期发现及防治HPV感染对预防子宫颈癌的发生具有重要意义。     

应用改良导流杂交法检测103例妇女HPV基因型

目的:探讨改良导流杂交法在宫颈病变患者的人类乳头状瘤病毒(HPV)基因型检测中的应用价值.方法:应用改良导流杂交法检测103例宫颈癌筛查患者(宫颈癌组29 例,炎症组33例和正常组41例)的宫颈细胞21种HPV基因型, 并对其中的宫颈癌组同时采用杂交捕获二代系统(HC-II)行13种高危基因型HPV检测.比较两种方法检测不同HPV基因型的阳性率差异.计算用改良导流杂交法检测的各组患者不同HPV基因型的阳性率.结果:在103例研究对象中,改良导流杂交法HPV基因型检测的阳性率达46.6%, 宫颈癌组、炎症组及正常组的阳性率分别为96.6%、39.4%和17.1%, 各组间差别有显著性差异(P＜0.005); 宫颈癌患者前10位的基因型是HPV-16(16.5%)、HPV-58(7.8%)、HPV-52(7.8%)、HPV-18(5.8%)、HPV-31(5.8%)、HPV-6(4.9%)、CP8304(4.9%)、HPV-39(3.9%)、HPV-68(3.9%)和HPV-11(3.9%), 而且存在HPV双重以上的感染.与HC-II检测结果的符合率达96.6%(28/29).结论:改良导流杂交法与HC-II检测结果无差异性,可用于检测宫颈病变患者的HPV基因型.本组宫颈癌患者最常见的5种HPV基因型可能是HPV-16、HPV-58、HPV-52、HPV-18和HPV-31, 且存在更多的HPV双重以上的感染.     

甘肃地区女性宫颈HPV感染的现状研究

目的:了解甘肃地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因亚型、年龄及地区分布等.方法:采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术,对7318名兰州女性进行生殖道21种HPV感染基因亚型筛查.结果:甘肃地区女性HPV感染率为19.9%(1 452/7 318),其中高危型HPV感染率14.78%(1 082/7 318),低危型HPV感染率3.38%(247/7 318),高危型中HPV16为主要致病亚型,占28.59%(415/1 452),低危型中HPV6占6.30%(98/1 452).1452例感染HPV的标本中,单一感染1 188例,占81.82%(1 188/1 452),多重感染264例,占18.18%(264/1 452).按年龄分组中≥50岁组HPV感染率最高,占24.24%.按地区分析,陇南地区HPV感染率最高,达到30.97%(83/268).结论:甘肃地区为宫颈癌高发区,其中HPV16是感染最多的型别,对该地区女性进行子宫颈癌的筛查和防治已成为当务之急.     

湖北荆州地区高危型HPV感染状况及流行病学特征研究

为了解湖北荆州地区女性HRHPV感染的流行病学特征,采用荧光PCR方法检测就诊女性15种HRHPV基因型,用SPSS 23. 0软件进行统计分析.结果表明,3 677例就诊女性总感染率为20. 64%(759例),优势型别依次为HPV52(6. 53%,240例)、HPV58(3. 51%,129例)、HPV16(2. 99%,110例)、HPV39(2. 64%,97例)与HPV68(2. 04%,75例).HRHPV感染率最低年龄段为30～39岁(18. 10%,187例),最高年龄段为60～69岁(37. 61%,41例).HRHPV感染模式中单一型别感染率为14. 11%(519例),双重感染率为4. 81%(177例),三重、四重与五重感染均有检出.HRHPV的感染率(P0. 01)和感染模式(P0. 05)在不同年龄段间有统计学差异.荆州地区女性HRHPV感染型别以HPV52、HPV58和HPV16型为主.感染模式以单一型别感染为主,双重感染次之.年龄与HRHPV的阳性率和多重感染率正相关.     

兰州市膀胱移形细胞癌尿脱落细胞HPV感染基因型调查研究

目的:调查兰州市膀胱移形细胞癌尿脱落细胞HPV型感染率及其主要基因型,进行乳头瘤病毒与膀胱癌移形细胞癌发生发展相关性研究.方法:采用聚合酶链式反应方法(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测了200例膀胱移形细胞癌尿脱落细胞中人类乳头瘤病毒的感染情况.结果:膀胱移形细胞癌尿脱落细胞中HPV6、11、16、18型阳性率分别为7.9%、6.3%、36.9%和7%,低危型人类乳头瘤病毒6、11型阳性率为11.3%,高危型人类乳头瘤病毒16、18型阳性率为37%.人类乳头瘤病毒6、11、16、18型感染阳性率在肿瘤患者尿液中有显著差异(P<0.05),人类乳头瘤病毒16型阳性率在肿瘤病理分级中有显著差异.人乳头瘤病毒16型在膀胱癌中分布为主.结论:高危人乳头瘤病毒可能与膀胱癌发生有关.     

白银地区女性生殖道感染HPV基因型调查分析

调查白银地区女性生殖道感染HPV基因型分布状况,了解不同亚型HPV在女性中的感染情况及流行病学意义。对甘肃省中医院白银分院健康体检、门诊和住院的患者共640例,采集阴道分泌物标本,采用PCR-反向斑点杂交法检测21个HPV基因型。640例样本中检出HPV阳性者65例,检出率为10.2%。共查出15种亚型。HPV阳性者中低危型占4.6%,高危型占78.5%,两型和两型以上混合感染占16.9%;640例样本中感染率最高的为高危HPV39型(2.2%)和HPV16(2.2%),其它分别为HPV58(1.9%),HPV52(1.3%),HPV66(0.7%),HPV6(0.6%),HPV51(0.6%),HPV56(0.6%),HPV18(0.5%),HPV53%(0.5%),HPV31(0.3%),HPV68(0.3%),HPV33(0.3%),HPV42(0.3%),HPV,81(CP8304)(0.2%)。白银地区女性生殖道感染HPV基因分布有区域特点,HPV检测具有重要的流行病学意义。     

HPV16、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体的构建

目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体.方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A.HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,并将二者连接成载体pSC-A-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E(pSC-T,HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7:T),最后以痘苗病毒表达载体pJ38为转移载体,构建质粒pJ38-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pJ38-T),对所有重组质粒进行酶切鉴定和测序分析.结果:E6/E7融合基因成功克隆到pJ38上.结论:成功构建表达HPV E6/E7融合基因重组痘苗病毒载体,为研制宫颈癌治疗性疫苗奠定基础.     

女性HPV感染情况的调查与分析

目的 调查我院妇科门诊18 ～60岁女性宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的情况,确定本地区的主要感染型别.方法 采用人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统对527例女性进行23种HPV基因型检测,分析宫颈病变中HPV亚型感染分布特点.结果 在被调查的527例女性中HPV感染总阳性率为43.8％（231/527）,单项感染占阳性感染的60％（139/231）,其中,低危感染占阳性感染的35％（81/231）,高危感染占阳性感染的25％（58/231）,高低危混合感染占阳性感染的40％（92/231）.主要感染型别为6、11、43、16、58和56,占单项及混合感染率为：6型占35.9％;11型占18.7％;43型占18.7％;16型占16.6％;58型占15.7％;56型占10.5％.结论 本地区HPV型别感染分布以6、11、43、16和58型感染为主.     

通辽地区179例妇科门诊患者人乳头瘤病毒感染检测分析

目的：以通辽地区妇科门诊患者为对象,检测其生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染情况.方法：采用HPV21型凯普导流杂交法,对179例妇科就诊患者宫颈标本进行HPV基因分型检测.结果：HPV基因检测总阳性率为17.31%,其中以单一感染率为主,比例为74.19%,多重感染率为25.81%;共检出16种HPV亚型,包括高危型12型,低危型4型,其中以HPV16、31、18三种亚型最多见.结论：通辽地区HPV感染以单一感染为主,又包含一定比例的多重感染,常见感染亚型分布总体符合亚洲人群规律,但又具有独特的地域分布特点.     

HPV16/18型原位杂交检测在子宫颈液基细胞学中的应用价值

目的:评价薄层液基细胞学及HPV16/18型原位分子杂交检测在子宫颈病变中的应用价值。方法:应用薄层液基细胞学技术及HE染色对112例患者行子宫颈脱落细胞学检查,按照TBS(theBethesda report system)细胞学分类标准分类:无上皮内病变或恶性病变(negative for introepithelia or ma-lignancy,NILM),意义不明确的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell of undetermined significance,ASC-US)、低度鳞状上皮内病变(Low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、高度鳞状上皮内病变(High-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL),鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)。同时应用原位分子杂交方法对样本进行HPV16/18型检测。结果:①在112例细胞涂片中,NILM:16例(14.3%);炎症病变:26例(23.2%);ASC-US:44例(39.3%);LSIL:25例(22.3%);HSIL:1例(0.89%);②112例细胞涂片中HPV16/18型阳性率随着子宫颈病变加重而增高,NILM及炎症、ASC-US、LSIL及HSIL各组间相比,NILM及炎症病变组与LSIL及HSIL组之间表达差异有统计学意义(P<0.05);③对5例细胞学HPV16/18型胞浆阳性病例的子宫颈活检标本进行HPV原位杂交对照检查,结果显示细胞核均呈阳性。结论:子宫颈液基细胞学联合HPV16/18型原位分子杂交检测有助于发现HPV感染引起的子宫颈病变;HPV16/18型细胞涂片中胞浆阳性染色,可作为细胞学检查HPV阳性的判定指标。     

人乳头瘤病毒感染的宫颈癌组织的病理形态学观察

应用核酸杂交技术结合组织病理学的光镜和电镜观察、检测８０例子宫颈癌、４２例正常宫颈组织、３３例宫颈非典型增生组织和１０例宫颈尖锐湿疣组织中的ＨＰＶｓ基因组相关序列。结果表明：（１）４２例正常宫颈组织ＤＮＡ无一例检出ＨＰＶ，而在宫颈癌组织、宫颈非典型增生组织和宫颈尖锐湿疣组织中，ＨＰＶ检出率分别达４３．７５％、４５．４５％和８０％；（２）宫颈癌组织中阳性３５例，阳性率为４３．７５％；ＨＰＶ型别分布主要为ＨＰＶ１６型（１８例，５１．４３％）和ＨＰＶＲ型（８例，２２．８６％）；（３）１８例ＨＰＶ１６型和３例ＨＰＶ１１／６型均为鳞癌，８例ＨＰＶＲ型中有６例也为鳞癌。ＨＰＶ１６型的１８例中有１２例为低分化癌，ＨＰＶＲ型的８例中有５例也为低分化癌；（４）不同型别ＨＰＶ感染的宫颈癌组织，其病理形态学特征有所不同。研究表明，广西地区相当部分宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染有关，其感染的宫颈癌组织具有一定的病理形态学特征。     

高危型HPV在吉林地区各年龄段感染情况调查

目的调查吉林地区不同年龄段女性高危型人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况.方法选定3 243例吉林地区有性生活史并要求进行宫颈病毒筛查的患者,采集宫颈脱落细胞,利用DML2000基因杂交信号扩大仪进行检测.结果吉林地区女性HPV总感染率为26.79%(869/3 243),在869例HPV感染患者中,年龄≤20岁的HPV感染阳性率为42.86%(9/21);20~30岁年龄组HPV感染阳性率为33.2%(166/500);30~40岁年龄组HPV感染阳性率为25.67%(268/1 044);40~50岁年龄组HPV感染阳性率为25.27%(329/1 302);50~60岁年龄组HPV感染阳性率为25.31%(80/316);60岁年龄组HPV感染阳性率为39.53%(17/43).结论 HPV病毒感染与年龄有一定关系,青春期、育龄期及绝经期女性的病毒感染率高.     

成都地区人乳头瘤病毒型别分布研究

应用反向膜杂交技术对1668例标本进行型别鉴定和统计分析.在1668例标本中,共检出阳性标本673例,感染率为40.3%;其中单重感染512例,占阳性标本的76.1%,双重感染96例,占阳性标本的14.3%;单重感染中的高危型感染318例,占阳性标本的47.3%,低危型感染194例,占阳性标本的28.8%.结果表明成都地区HPV感染率较高,且以单一基因型感染为主,其中HPV-16感染率最高,其次是HPV-18,低危型HPV感染以HPV-6和HPV-11为主.     

海口地区人乳头瘤病毒感染的分子流行病学研究

利用PCR扩增和Southen杂交技术,对海口地区人乳头瘤病毒（HPV）型别进行了调查,结果显示,在所抽取的1045份样本中,有436份检出HPV-DNA,总阳性率为41．72％（436／1045）,其中有337份只检出1种型别感染（单侵染）,65份检出2种型别感染（二重侵染）,34份检出3种或3种以上型别感染（三重或三重以上侵染）,分别占感染样本的77．29％,14．91％和7．80％;在单侵染中,高危型所占比例为74．78％（252／337）,不同型别的检出率从高到低分别是HPV16（22．25％）,HPV58（17．89％）,HPV43（16．74％）,HPV52（16．06）和HPV6（8．94％）．其中HPV16,HPV58和HPV43为高危型,其检出率较高,具有一定的区域性．     

HLA-B*6701 as a subtype performing post-selected marking gene for cervical cancer

A method of sequence-based typing (SBT) has been adopted to assort types of exons 2 and 3, which have the most polymorphism, of HLA-B locus of the Tujia nation group in Hubei province. The correlation among the HLA-B alleles, human papillomavirus (HPV) infection and cervical cancer risk has also been investigated. Under the condition of resident location and age, race unified, 100 specimens of cancer patients were sampled as a case group, of which 86 were HPV positive and were screened for HLA-B alleles; while 187 specimens were taken from healthy people, of which 92 were HPV negative as a control group. The result shows that by comparing the above mentioned 86 HPV positive cervical cancer group and 92 HPV negative normal group, it was concluded that HLA-B*6701 was only found in the cervical cancer group (p < 0.034), which shows that HLA-B*6701 can be used as an important candidate biological marking gene for generation of cervical cancer in Wufeng county of Hubei province.     

维吾尔族妇女宫颈癌及HPV感染与多种基因表达上调的关系

 通过对维吾尔族妇女宫颈癌病变的高表达候选基因筛查分析,寻找族群特异的宫颈癌早期预警分子指标及其与HPV感染的相关性。收集维吾尔族妇女患者子宫颈新鲜组织标本85例,其中子宫颈鳞癌53例,慢性宫颈炎32例作为对照。提取组织DNA和RNA,利用HPV特异性PCR引物鉴定HPV感染阳性和型别,采用半定量RT-PCR方法对鉴定7种候选基因的转录表达水平变化。结果表明,宫颈炎或癌旁正常组织中的TK1、SPP1和ARPC2/3 mRNA检出率较低(25%—28%),在宫颈鳞癌中明显增高(62%—66%),其差异显著(P＜0.05);但是ANX8、HSPA1A、S100-A9和S100-P基因的转录表达水平变化不明显,其差异也无统计学意义(P＞0.05)。从HPV感染的角度分析,HPV阴性患者的TK1和SPP1 mRNA表达检出率较低(50.0%和44.2%);HPV阳性患者很高(82.9%和74.2%),有统计学意义(P＜0.05)。研究表明,SPP1、TK1和ARP2/3基因表达上调可能是维吾尔族宫颈癌发生的重要标志,其中TK1和SPP1基因表达水平变化可能对HPV感染有依赖关系。     

液相芯片技术在人乳头瘤病毒检测和分型中的应用

从50例疑似感染人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus, HPV）患者的标本中提取DNA,运用液相芯片技术对提取的DNA进行7种低危型和19种高危型检测,并与反向点杂交检测结果进行比较.50例标本中,液相芯片检出阳性26例,阳性率为52%,其中单一亚型感染20例占40%,多重感染6例占12%,比反向点杂交的多重感染阳性检出率高4%.     

PCR技术检测泌尿生殖道生殖支原体(MG)感染的研究

目的采用PCR检验技术,对吉林地区部分非淋菌性尿道(宫颈)炎(NGU)高危人群泌尿生殖道分泌物标本进行分离鉴定,以探讨MG感染在STD的作用和地位.方法吉林地区NGU高危人群受检者141例,宫颈或尿道口内拭子分泌物标本用PCR技术进行DNA扩增,并与对照组65例进行比较,结果141例标本MG-DNA扩增出26例,阳性率为18.4%,正常对照组65例MG-DNA扩增出3例,阳性率为4.62%(3/65),差异显著(x2=5.933,P=0.014 9＜0.05).结论1)吉林地区STD高危人群有较高的MG感染率,是NGU的病因之一2)PCR技术具有敏感、快速、特异性强特点,可以用来研究MG感染现状,流行情况及致病机制.