斑马鱼雌核紫外线辐射灭活及延迟受精的研究

雌核灭活是雄核发育的第一个关键步骤,为研究紫外线对斑马鱼卵的雌核灭活效果,将斑马鱼的卵采用干法或置于纯水、Ringer氏溶液和Cortland鱼用生理盐水进行紫外线照射,结果表明,各种方法中均得到畸形鱼苗,并经染色体检查大多为单倍体;四种方法中在Cortland鱼用生理盐水中灭活效果最好,120 mJ·cm-2紫外线可以使雌核完全灭活;干法处理不能达到雌核完全灭活的目的,在纯水中灭活后的卵子受精率较低.而延迟受精的结果也表明,盐度较高的Cortland鱼用生理盐水可以较好的保护卵子,维持较长时间的受精能力,和其它处理方法有明显的差异.     

锯缘青蟹受精过程核相变化的研究

用光镜和组织切片技术研究了锯缘青蟹受精过程核相变化的特征．锯缘青蟹刚排出的成熟卵子为初级卵母细胞．核相处于第1次成熟分裂的中期．在卵子产出后30min内第1极体排出并分裂成两个小极体;第2极体随着受精膜的形成和举起而排放。在卵子产出后50～60min内排出;第1．2极体分别位于受精膜的内外两侧．雄性原核形成早于雌性原核;雌雄原核形成后向卵子中央移动。最后发生联合形成联合核．排卵后的6～7h内。合子核才开始第1次核分裂．锯缘青蟹为数精人卵．单精受精．     

金鱼受精过程超微结构研究的快速半薄切片定位

介绍一种适于金鱼受精过程超微结构研究的快速半薄切片定位方法。经Ｅｐｏｎ８１２包理的受精卵，切０．１５～０．５μｍ厚的切片，用甲苯胺兰Ｏ－派若宁Ｂ染液在酒精灯上烤染后镜检，整个过程在５ｍｉｎ内完成。用此方法可将受精后至第一次卵裂前各时期的精子头、卵子染色体及雌雄原核找到并可进一步用于超微结构研究。     

斑马鱼GAPDH蛋白片段的原核表达差异分析

为了分析斑马鱼GAPDH基因不同区域原核表达构建的诱导效应差异,应用生物信息技术分析斑马鱼GAPDH分子结构,通过定向删除技术,构建表达部分斑马鱼GAPDH蛋白片段的质粒。通过IPTG诱导,SDS-PAG检测,分析GAPDH基因不同区域构建的蛋白表达差异。结果:引物对ZGCKF/ZGCXR构建的GAPDH重组表达质粒具有IPTG诱导表达效应,而引物对ZGNKF/ZGNXR构建的质粒则不具有IPTG诱导表达效应。因此,为了在原核表达真核蛋白时应考虑过表达的真核蛋白是否会影响宿主的代谢以及是否会导致宿主的抵抗,设计引物时应当选择合适的区域构建重组质粒才能获表达产物。     

弓獭蛤受精及早期卵裂过程核相变化的细胞学观察

采用Hoechst 33258染色和荧光显微镜技术,对弓獭蛤(Lutraria arcuata)受精和早期卵裂过程中的核相变化进行观察.其成熟未受精卵呈圆球形,卵径55~60μm,核相处于第1次成熟分裂前期;精子为鞭毛型,全长约50~55μm.精卵混合后,精子迅速附着于卵子表面;受精后10~30 min,精子入卵膨胀成球形;30~50 min进行第1次成熟分裂,排出第1极体;50~60 min进行第2次成熟分裂,排出第2极体;同时精核和卵核体积膨胀,形成雄原核和雌原核;70 min左右,雌、雄原核联合,形成第1次有丝分裂的中期分裂相;70~90 min受精卵进行第1次卵裂,形成2个卵裂球;90~110 min进行第2次卵裂,形成1大3小的4个卵裂球.     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精(IVF)过程中多精受精的发生原因进行了阐述,指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因,其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出.大量研究表明,除了物种的特异性以外,不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关.     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精(IVF)过程中多精受精的发生原因进行了阐述,指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因,其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出。大量研究表明,除了物种的特异性以外,不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关。     

长喙毛莨泽泻双受精过程的细胞学观察

对长喙毛莨 泽泻双受精过程进行了细胞学观察，结果表明，开花前３小时已可观察到花粉管进入胚囊，开花前２小时至开花后８小时，大部分雌，雄性核发生融合，合子内的雌、雄性核仁可以融合，以一个大核仁的形式进入分裂期，但核仁正在融合或尚未开始融合的合子同样可以进入分裂期。初生胚乳核内的核仁存在３种情况，即３个核仁或者不融合，或者精子核仁与珠孔端极核核仁融合，或者３个核仁融合成一个大核仁，配子融合属于有丝分裂前     

人工四倍体鲤鲫成熟卵受精过程的扫描电子显微镜观察

以人工四倍体鲤鲫卵子和普通红鲤精子为材料进行人工受精，在受精后的不同时间以扫描电子显微镜观察卵子对精子的应答反应、受精孔形态、数量与大小以及受精过程等超微结构特征. 结果表明，四倍体卵子动物极的卵壳上仅有一个受精孔,但受精孔区域有5—6个似小山丘状的嵴状结构，而鲤却完全没有这种结构. 研究证实：四倍体鲤鲫成熟卵属单受精孔、单精受精类型，其特异的嵴状形态结构可作为区分普通鲤的标记表型.     

被子植物受精过程中雌雄配子融合的研究现状

被子植物的双受精对其生命有极其重要的作用，本文从国际和国内两个方面简介绍被子植物双受精过程的体内系统研究现状，为今后被子植物受精过程的研究提供一些理论依据。     

PCBs 对斑马鱼鳃及肝脏细胞超微结构的影响的初步研究

为了进一步了解ＰＣＢｓ对人类健康及生存的直接影响 ,作者对暴露在 50 μｇ/Ｌ质量浓度的ＰＣＢｓ水中的实验斑马鱼的鳃、肝脏细胞的超微结构进行观察研究 ,现将结果报道如下 .1　材料与方法实验斑马鱼 (Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ) ,体长 2 8- 3 5ｃｍ ,体质量 0 3 - 0 4ｇ,在水族箱暂养 1 0ｄ后活体取样 ,将实验组与对照组活鱼分别取其肝脏及鳃并用 4%戊二醛溶液和 1 %锇酸双固定 ,0 2ｍｏｌ磷酸缓冲液 (ｐＨ7 4)冲洗 ,各级乙醇脱水 ,环氧丙烷透明 ,Ｅｐｏｎ 81 2包埋 ,ＬＫＢ - 5型超薄切片机切片 ,醋酸铀及Ｒｅｙｎｏｌｄ…     

实验用斑马鱼的质量控制研究——不同健康状况实验鱼的毒性实验比较

目的设计一套实验鱼的质量控制实验,将两组不同健康状况实验鱼暴露于同一化学污染压力下,比较两者不同的压力响应,同时对现行的实验用鱼质量控制要求的适宜性进行分析与讨论。方法采用OECD 203鱼类急性毒性实验方法,以重铬酸钾(K2Cr2O7)作为实验鱼质量控制实验的参比样品,分别将健康斑马鱼(HZ)和生病斑马鱼(SZ)暴露于不同浓度灭多威(Methomyl)的水溶液中96 h。记录24 h4、8 h7、2 h和96 h的死亡率。确定96 h鱼类死亡50%的受试物浓度,半数致死浓度用96 h-LC50表示。结论在96 h的实验周期中,健康斑马鱼的K2Cr2O724h-LC50为323.38 mg/L,Methomyl 96 h-LC50为4.91 mg/L;病鱼K2Cr2O724 h-LC50为302.55 mg/L,Methomyl 96 h-LC50为3.04 mg/L。说明两种斑马鱼虽然都符合K2Cr2O724 h-LC50在200~400 mg/L之间的实验用鱼质控要求,但两种健康状态的鱼对于同一化学污染压力下的96 h-LC50却有较显著差异。     

氨氮对斑马鱼2种代谢酶类的影响

以斑马鱼(Brachyclanio rerio)为实验材料,用氯化铵模拟水体中氨氮进行急性毒性实验.得到24,48,72,96 h的半致死浓度(LC50),分别为126,114,105,101 mg/L.在96 h LC50以下,设6个质量浓度梯度,进行24 h氨氮胁迫,之后测定斑马鱼不同组织中的过氧化氢酶(CATase),腺三磷酸酶(ATPase)活性.结果表明,各类酶活的变化与氨氮质量浓度都呈一定相关性,随着氨氮质量浓度增大,ATP酶活性受到显著抑制,CAT酶呈曲线变化.     

斑马鱼3种胰蛋白酶原基因的克隆、序列分析及组织表达

 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶类超家族成员之一,在动物蛋白消化中起着重要作用。为深入研究胰蛋白酶在鱼类中的蛋白结构和生理功能,利用RT-PCR和RACE方法,成功获得了斑马鱼3种胰蛋白酶原cDNA序列(zftry1a、zftry1b和zftry2)。结果表明,zftry1a和zftry1b均有242个氨基酸残基组成,其中包括15个氨基酸的信号肽和5个氨基酸(LDDDK)的激活肽。zftry2由247个氨基酸残基组成,其中包括15个氨基酸的信号肽和9个氨基酸(APLGDDDDK)的激活肽。氨基酸序列比对结果显示,三者具备胰蛋白酶原的保守结构特征,如含有催化三联体氨基酸(His-57、Asp-102和Ser-195),12个半胱氨酸,位于底物结合口袋底部Asp-189和口袋开口处的Gly-216、Gly-226等。进化树结果显示,斑马鱼zftry1a和zftry1b属于group I,为阴离子胰蛋白酶原;斑马鱼zftry2属于group II,为阳离子型胰蛋白酶原。RT-PCR结果显示,三者组织分布模式类似,且在肠中有最高表达量。这些结果为研究鱼类胰蛋白酶原的基因进化和功能以及进一步探讨鱼类消化生理的分子机制奠定了基础。     

1951—2014年淮河流域降水量时空变化特征

以1951—2014年淮河流域29个站点月降水量数据为研究对象,运用线性趋势、累积距平、小波分析及空间分析等方法,分析了降水量时间和空间变化特征.结果表明:(1)1951—2014年,年、春、夏和秋季降水量呈不显著减少趋势,冬季降水量则具有不显著增加趋势.(2)春、秋和冬季易发生旱涝灾害,夏季降水量变化控制年降水量变化.(3)年降水量具有准2a和6a振荡周期.(4)东南部年和四季降水量多于西北部,这与我国年和四季降水量分布模式一致.(5)空间上,年和四季降水量变率中,年和夏季最大,降水量减少区域呈半环状包围降水量增加区域;整个流域冬季降水量几乎没有变化.     

祁连山地区近60年气温时空变化特征

全球气候变暖正改变着全球水汽,进而深刻影响人类的生存与发展.祁连山是中国西部重要的生态安全屏障和生物多样性保护区域,也是地质灾害的多发区.因此,为了明确祁连山地区气温的时空变化特征,针对祁连山及其周边地区21个气象站点的1960-2019年的气温数据,利用Anusplin气温插值法对祁连山区域的气温进行插值,并借助滑动...     

LED光谱对斑马鱼繁殖行为、产卵量和受精率的影响

[目的]考察不同LED光谱对斑马鱼的繁殖行为、产卵量和受精率的影响.[方法]将成年斑马鱼分别用白光、红光、蓝光和绿光的LED光谱处理7 d,随后进行雌雄鱼配对并拍摄繁殖行为,获得繁殖行为参数及连续3日的累积产卵量和受精率.[结果]与白光处理相比:1)蓝光、绿光和红光处理对斑马鱼的触碰次数和追逐次数均无明显影响,但蓝光和...     

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育的比较

目的对MII期水牛卵母细胞进行人工诱导激活,可以间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,并且,卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27 h或30 h的囊胚发育率(19.0%,17.7%)明显高于体外成熟21 h或24 h的囊胚发育率(12.3%,13.8%);Ion联合6_DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同培养条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(21.7%,13.0%)。     

中国优秀女子撑竿跳高运动员悬垂至推竿阶段时间特征分析

运用文献资料法、摄像法、解析法、数理统计法等研究方法,着重对中国优秀女子撑竿跳高运动员悬垂至推竿阶段各时相的时间指标进行分析,认为:我国女子撑杆跳运动员长摆时间、短摆时间和伸展时间差异较大,悬垂时间、拉引转体时间和推竿时间差异较小;悬垂、长摆、短摆、伸展阶段相互作用比较大,关系密切,其中长摆时间技与总时间、最终成绩的相关性最高.