用化学发光法检测脂膜过氧化 Ⅱ.理化因子诱发红细胞影泡的氧化发光

前文(本刊1986年第2期)我们已报导过用化学发光法测量脂质体的自发的和诱发的发光,在此基础上,本文又介绍了以天然的生物膜——红细胞影泡为材料,研究生物膜的脂质过氧化。影泡的成分远比脂质体复杂,它存在有抗氧化剂系统,因而只有低水平的、自发的化学发光,即低水平的脂质过氧化。H_2O_2能激烈地刺激影泡的脂质过氧化,破坏抗氧化剂体系,增强化学发光。受激的化学发光强度与影泡的浓度成正比。一万拉特以上的γ射线照射,可以加速影泡的脂质过氧化,表现出化学发光明显增强。化学发光的增强与照射剂量成正比,而与剂量率成反比。超氧化物歧化酶可明显地抑制脂质过氧化,从而明显地降低化学发光的强度。     

用化学发光法检测脂膜过氧化 Ⅱ.理化因子诱发红细胞影泡的氧化发光

前文(本刊1986年第2期)我们已报导过用化学发光法测量脂质体的自发的和诱发的发光,在此基础上,本文又介绍了以天然的生物膜——红细胞影泡为材料,研究生物膜的脂质过氧化.影泡的成分远比脂质体复杂,它存在有抗氧化剂系统,因而只有低水平的、自发的化学发光,即低水平的脂质过氧化.H_2O_2能激烈地刺激影泡的脂质过氧化,破坏抗氧化剂体系,增强化学发光.受激的化学发光强度与影泡的浓度成正比.一万拉特以上的γ射线照射,可以加速影泡的脂质过氧化,表现出化学发光明显增强.化学发光的增强与照射剂量成正比,而与剂量率成反比.超氧化物歧化酶可明显地抑制脂质过氧化,从而明显地降低化学发光的强度.     

化学发光法研究迷迭香抗脂质过氧化性能

为考察天然抗氧化剂迷迭香的抗脂质过氧化性能,以大豆油为脂质来源,AAPH为自由基引发剂,鲁米诺为发光试剂,构建化学发光体系,并简要探讨体系部分条件的优化.应用优化的化学发光体系,通过与合成抗氧化剂TBHQ的对比,考察抗氧化剂的浓度和反应温度对迷迭香抗脂质过氧化性能的影响;同时通过与国家标准的过氧化值(POV)碘量滴定法的实验结果的对比,考察化学发光法的方法可靠性.实验建立的化学发光体系AAPH的浓度为40 g/L,鲁米诺的浓度为1.0×10-4mol/L,p H为9.此体系下的实验表明迷迭香的抗脂质过氧化性能优于同浓度的TBHQ,且具有热稳定性.化学发光法与碘量滴定法的实验结论一致,表明构建的化学发光体系可靠.     

化学发光法研究茶多酚抗脂质过氧化

不饱和脂肪酸自动氧化分解产生的脂质过氧化现象,在生命科学、食品科学领域日益受到关注.为此,本实验以月见草油为脂质来源,以AAPH(2,2’-偶氮二异丁基脒二盐酸盐)为自由基引发剂,鲁米诺为发光试剂,天然提取物茶多酚为抗氧化剂,构建了茶多酚-月见草油-AAPH-鲁米诺抗脂质过氧化化学发光体系,研究了茶多酚的抗脂质过氧化动力学过程.结果发现茶多酚能高效抑制脂质过氧化链式反应,抑制时间与茶多酚用量呈线性关系,且没有表现出明显的促氧化现象.     

沙枣叶水煎提取物体外抗氧化作用的研究

本实验通过自发产生脂质过氧化及分别用自由基诱导剂CCl4、H2O2和Fe2+-VitC激发脂质过氧化,以丙二醛(MDA)产生量作为脂质过氧化作用程度指标,观察沙枣叶水煎提取物对小鼠肝脂质过氧化的保护作用强弱.结果显示沙枣叶水煎提取物可降低小鼠肝组织自发性MDA的生成,减轻CCl4 、H2O2 、Fe2+-VitC所诱导的肝脏脂质过氧化反应,具有良好的抗脂质过氧化作用.     

竹叶兰萃取物对四氯化碳诱导脂质过氧化抑制作用

研究了竹叶兰乙酸乙酯萃取物对四氯化碳诱导脂质过氧化抑制作用,竹叶兰乙酸乙酯萃取物能有效抑制Fenton自由基所致卵磷脂脂质体脂质过氧化、CCl4诱导鼠肝细胞、以及人血红细胞脂质过氧化.结果表明竹叶兰解毒机理与竹叶兰对化学毒物诱导脂质过氧化具有明显的抑制活性有关.     

聚乙二醇渗透处理对大豆种子贮存能力的影响及其机理探讨

试验以大豆品种“晋豆1号”为材料,用30％聚乙二醇(PEG)水溶液对收获后的种子渗透处理24h后,在其自然老化过程中其发芽率、发芽指数均高于对照。经处理种子的细胞膜透性、内部过氧化物含量及脂质过氧化反应维持较低的水平。表明应用聚乙二醇渗透处理能够有效地防止大豆种子老化,而降低内脂膜的过氧化反应水平,则是其可能的作用机理。     

石榴皮醇提物的体外抗脂质过氧化作用

目的：研究石榴皮醇提物的体外抗脂质过氧化作用。方法：小鼠肝匀浆与石榴皮醇提物共浴后,以自发产生脂质过氧化或者分别以自由基诱导剂CCl4、H2O2和铁离子-抗坏血酸（Fe^2＋-VitC）激发脂质过氧化作用,以MDA产生量作为脂质过氧化作用程度指标。结果：石榴皮醇提物可明显降低小鼠肝组织自发性MDA的生成,减轻CCl4、H2O2、Fe^2＋-VitC所致的肝脏脂质过氧化反应。结论：石榴皮醇提物具有良好的抗脂质过氧化作用。     

流动注射化学发光法测定抗坏血酸的研究

基于抗坏血酸对鲁米诺与超氧阴离子自由基化学发光反应的抑制作用,建立了一种测定抗坏血酸的流动注射化学发光法.超氧阴离子自由基由紫外光照射碱性核黄素溶液产生.抗坏血酸浓度与化学发光强度的抑制值在0～2×10-6mol/L范围.内具有线性关系.对浓度为6×10-7mol/L的抗坏血酸溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.1%.该方法已用于药物制剂中抗坏血酸的含量测定.     

化学发光法快速高通量检测双嘧达莫

根据过氧化草酸酯与双氧水作用产生的高能中间体能激发荧光物质发光的原理,建立了利用过氧化草酸酯(TCPO)-H2O2-咪唑化学发光体系测定双嘧达莫的新方法.研究了溶剂、酸度、增敏剂及化学发光试剂浓度对化学发光信号的影响.在最佳试验条件下,双嘧达莫浓度在3.3×10-9～1.7×10-6 g/mL范围内其相对化学发光强度与浓度呈良好的线性关系,检出限为1.1×10-9 g/mL.该方法操作简便快速、灵敏度高、试剂用量少,可用于实际样品血清及尿液的检测.     

多种体系中NaHS抗氧化活性的研究

采用邻苯三酚自氧化法、硫代巴比妥酸比色法、DMPD法、甲基紫法和SDS-PAGE法,检测了NaHS对超氧阴离子的清除能力、脂质过氧化的抑制作用、DMPD.+自由基的清除能力、清除羟自由基的能力及蛋白质氧化降解的保护作用.研究结果表明,NaHS在各体系中均具有很强的作用,且呈浓度依赖关系.脂质过氧化的半抑制浓度为22.04μg/mL,对超氧阴离子、DMPD和羟自由基的半清除率分别为3.44、1.26和54.07μg/mL,活性均远高于人工合成抗氧化剂Trolox.对蛋白质的氧化损伤在2μg/mL时已有明显的保护作用,作用也比Trolox强.这些结果表明NaHS在这些反应系统中均表现出突出的抗氧化活性.     

大黄(Rheum officinale Baill)提取液对体外氧自由基清除作用的研究

大黄是一味抗老健身的中药,本文作者用黄嘌呤——黄嘌呤氧化酶体系产生超氧阴离子,用H_2O_2-Fe~(2+)体系产生羟自由基,用过硫酸铵—N,N,N′,N′—四甲基乙二胺体系产生氧自由基,并用化学发光法研究了大黄提取液对氧自由基的清除效应,结果表明,大黄是一种有效的氧自由基清除剂,对前述三种系统发生的氧自由基均有相当强的清除能力,提示大黄可能通过清除氧自由基,抑制脂质过氧化损伤而发挥其抗老健身功效。     

一种基于固定化纳米MnO2的流动注射化学发光分析方法

采用电沉积法在自制的碳电极表面制备纳米MnO2,提出了一种基于固定化MnO2流动注射化学发光测量L-色氨酸的分析方法。对所制备的纳米MnO2颗粒采用超景深三维显微镜,扫描电镜以及红外光谱进行了表征。结果表明,所制备的纳米MnO2均匀致密地分布在碳电极表面。用固定化MnO2作为发光试剂,在聚二甲基硅氧烷(PDMS)自制的流通池中进行化学发光反应。选取超纯水作为载液,当含有硫酸和甲醛的L-色氨酸溶液流过流通池与MnO2接触时,即可产生化学发光。线性范围1.0×10-6~5.0×10-5mol/L,检出限8.0×10-7mol/L。通过氧化试剂的固定化,该法简化了流路和测定步骤,具有快速、简单、环境友好以及易于实现自动化控制等优点。     

化学发光法研究锁阳提取液消除O(-·2)的功能

锁阳为多年生肉质寄生草本中药,中医上用之补肾,去火,治疗老年气弱阴虚等,药用价值较高[1].但对其抗衰老等作用的具体作用机制以及对其药理作用的研究,目前尚未见报道.但有文献表明,一些抗衰老中药中含有抗氧化物质,能抑制人体内过氧化反应和清除自由基[9].本文用化学发光技术测定锁阳提取液对鲁米诺发光体系中的超氧阴离子(superoide anion)的清除作用,从而对锁阳的药理作用从机理上作一些探讨.     

过氧草酸酯-四溴荧光素化学发光法测定多巴胺

对过氧化草酸酯化学发光体系的不同催化剂及荧光试剂进行了研究和比较,基于化学发光的强度和时间曲线,提出了以柠檬酸钠为催化剂和四溴荧光素为荧光试剂的化学发光反应新体系,用于有多巴胺反应生成的过氧化氢的测定.多巴胺线性方程Iα =22.95+0.21c,检出限为1.40 nmol/L,线性为2～1 000 nmol/L,灵敏度高、干扰少,用于针剂中多巴胺测定,回收率94.5％(n=11),结果令人满意.     

大麦提取物体外抗氧化活性检测

用丙酮抽提了大麦的酚类成分并检测了总酚含量以及提取物对羟自由基、超氧阴离子的清除作用,测定了还原力和对大鼠肝微粒体脂质过氧化的一致活性.结果表明,大麦提取物能有效清除由Fenton反应产生的羟自由基及邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子,其活性高于Trolox;有较强的还原力和对脂质过氧化的抑制作用.结果提示大麦提取物在体外...     

三种海藻体外抗氧化活性的研究

在体外化学模拟环境的条件下,采用比色法测定了羊栖菜,条浒苔和坛紫菜醇提物对DPPH自由基,羟基自由基和超氧阴离子的清除能力以及抗脂质过氧化能力。羊栖菜醇提物显示出较强的DPPH自由基清除能力,羟基自由基清除能力与抗脂质过氧化能力,坛紫菜醇提物显示出较强的超氧阴离子自由基清除能力与抗脂质过氧化能力。     

流动注射化学发光法测定邻氨基酚含量的研究

在酸性介质中,Fe3+-过氧化氢体系生成羟基自由基,强氧化活性的羟基自由基与邻氨基酚产生化学发光反应,罗丹明6G能够增敏化学发光信号,为测定邻氨基酚的含量,建立了灵敏的流动注射化学发光分析法.研究了影响化学发光的各种因素,探讨了可能的机理.邻氨基酚浓度在1.0×10 4~1.0×10 2、1.0×10 2~7.0×10 1和7.0×10 1~3.0×100g/L范围内与化学发光信号强度值呈良好的线性关系,检测限为(3σ)3.0×10 5g/L.对1.0×10 3g/L的没食子酸溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为3.9%.应用本方法测定模拟样品中邻氨基酚的含量,进行了加标回收实验,结果满意.     

化学发光法研究锁阳提取液消除O_2~的功能

锁阳为多年生肉质寄生草本中药,中医上用之补肾,去火,治疗老年气弱阴虚等,药用价值较高[1]。但对其抗衰老等作用的具体作用机制以及对其药理作用的研究,目前尚未见报道。但有文献表明,一些抗衰老中药中含有抗氧化物质,能抑制人体内过氧化反应和清除自由基[9]。本文用化学发光技术测定锁阳提取液对鲁米诺发光体系中的超氧阴离子(ｓｕｐｅｒｏｉｄｅａｎｉｏｎ)的清除作用,从而对锁阳的药理作用从机理上作一些探讨。1　材料和方法1.1　样品的处理锁阳干药材为四川产,共20ｇ,切成2ｃｍ×2ｃｍ小薄片,分成4等份,依文献[3],略加改动,分别进行如下…     

千里光多酚提取物的体外抗氧化研究

研究了千里光中酚类物质的抗氧化能力.方法:利用Fenton反应产生羟自由基·OH法来研究千里光多酚、茶多酚对·OH的清除能力;利用·OH诱发卵磷脂脂质过氧化损伤来研究千里光多酚、茶多酚对脂质过氧化的抑制能力;利用·OH 引发DNA损伤来研究千里光多酚、茶多酚对DNA的抑制能力.研究表明:千里光多酚、茶多酚对·OH的IC50分别为:1.120mg/Ml、0.410mg/Ml; 对脂质过氧化的IC50分别为0.980mg/Ml、0.950mg/Ml;对DNA损伤的IC50分别为:0.690mg/Ml、0.140mg/Ml,这表明千里光是一种优良的天然抗氧化剂和自由基清除剂.