内分泌干扰物对雌激素受体信号通路的影响

内分泌干扰物(endocrine disruptive chemicals,EDCs)可通过干扰雌激素受体(ER)信号通路影响相关转录活动.在阐述ERα和β两个亚型的基本结构特征和其信号转导途径的基础上,重点回顾近年来关于EDCs对ER信号转导通路干扰机制的研究进展.EDCs对ER信号通路的干扰机制包括配体依赖和非依赖两种,配体依赖机制分为直接作用和间接作用.直接作用的机制是EDCs可作为配体与雌激素竞争ER上的结合位点,从而影响ER的促转录活性.间接作用机制的研究热点集中在芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR),EDCs作为配体可激活AhR,而AhR能够促进ER蛋白泛素化并降解,也可通过与ER竞争辅助激活因子或直接影响ER介导的DNA转录.EDCs通过非配体依赖以及非基因组途径干扰机体的内分泌活动的机制目前仍不清楚,提示未来需注重研究EDCs对多种信号通路的影响.     

应用重组基因酵母法检测松花江吉林段土壤有机组分甲状腺激素干扰效应

利用重组甲状腺激素受体（TR）基因酵母,结合土壤样品索氏提取、富集和净化方法,检测松花江吉林段土壤有机组分甲状腺激素干扰效应及其分布特征。测试结果表明：所有样点均未检测出TR诱导效应;部分样点检测出TR抑制效应,检出率为56．25％,最大抑制率为46．00％;采用RIC20值（抑制率为20％时每孔所需要的土壤量,以mg计）表征样点的抑制效应,其RIC20值为0．81～5．34,表明松花江吉林段土壤中存在TR抑制效应污染物,可能具有潜在的环境危害。研究土壤甲状腺激素干扰效应的分布特征发现研究区甲状腺激素干扰效应分布与产业布局相关,TR抑制效应较高的样点主要集中在工业区及养殖区,表明TR抑制效应物质可能来源于工业污染或畜产养殖污染。通过本研究探明了松花江吉林段土壤有机组分的甲状腺激素干扰特征,为该地区土壤污染防治以及风险评价提供了基础的毒理学数据。     

城市污水中内分泌干扰物去除效率的研究进展

环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)是一类对保持动态平衡的生物体内天然激素起干扰作用的外源物质,作为第三代污染物,EDCs已经引起全球的关注。研究发现水体中微量的EDCs即可对水生生物产生内分泌干扰效应,具有潜在的环境及健康风险,而城市污水是水体中EDCs的主要来源。主要综述了城市污水中了EDCs的种类、来源与危害,并着重分析了现有的城市污水处理工艺对EDCs去除机制及效率的研究进展,提出了目前存在的主要问题和未来研究发展的方向。     

孤儿核受体Nur77的多功能性及其相关药物靶点作用机制的研究进展

核受体Nur77(也称TR3)是立早基因NR4A1编码的产物,在细胞增殖、分化、凋亡、自噬、炎症以及代谢等生命活动过程中发挥重要的调控作用.Nur77不仅作为转录因子调控下游靶基因的转录和表达,还能作为不依赖于转录的调节因子,通过蛋白相互作用以及改变亚细胞定位的方式发挥作用.Nur77的配体至今尚未在生物体内发现,因此...     

左心室射血功能障碍的心衰患者心房细胞中兰尼碱受体转录水平明显降低

为检测心衰患者心肌细胞中钙离子调节基因的转录水平,探索心力衰竭及左室射血功能(left ventricular ejection fraction,LVEF)受损的分子机制,通过反转录PCR检测钙离子调节基因的转录水平并采用t检验的方法比较了左室射血功能受损组与对照组的差异。结果表明:兰尼碱受体(ryanodine receptor,RyR)转录水平在左室射血功能受损组中的转录水平明显升高,差异具有统计学意义。可见左室射血功能受损的心衰患者,其心肌细胞中RyR转录水平高于左室功能正常的心衰患者,表明RyR参与了左室射血功能的调节。     

酪氨酸羟化酶与帕金森病的关系研究

酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)是多巴胺(Dopamine,DA)生物合成途径的关键酶,帕金森病(Parkinson's disease, PD)是由于黑质纹状体DA严重不足导致的一种神经变性疾病.研究了TH主导的DA代谢调节与PD发生的相互关系,TH结构、DA代谢的调节以及TH在PD发生发展和治疗中的作用.     

杂色鲍幼虫变态及TR干扰下内参基因的筛选

内参基因的稳定性对实时定量PCR的结果影响巨大。采用Ge Norm、norm Finder和Ref Finder三款软件比较了鲍变态和干扰幼虫甲状腺激素受体(TR)两种情况下内参基因的稳定性。软件分析了EIF5A、OAZ1、YB1、RPL3、RPS9和ACT等6个候选内参基因的C_t值,据此获得各基因的稳定值。在杂色鲍幼虫的变态过程中,EIF5A稳定性最高,排名平均数为1,表明该基因可以作为这一阶段实时定量PCR的内参基因,但是在干扰TR情况下,EIF5A的稳定性下降,排名平均数为3.91。RPS9则与之相反,在变态过程该基因表达稳定性最差,而在干扰TR时表达稳定性最好。ACT在两种情况下稳定性较好,排名平均数均位列第二位,可以作为这两种情况下的通用内参基因。其他基因的稳定性在这两种情况下也发生剧烈变换。这表明内参基因的稳定与样品具体处理情况关系密切。为了保证定量PCR结果的准确性,需要针对具体处理情况相应地进行内参基因的稳定性评估。     

TPA诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡及与RXRα和TR3的关系

 在肝癌细胞SMMC7721中研究TPA诱导的凋亡及它与细胞核受体TR3和RXRα的关系.实验中使用SMMC7721肝癌细胞.用MTT法检测生长抑制.用DAPI荧光染色法观察凋亡形态,随机记数1 000个细胞以计算凋亡指数.用CAT分析检测RXRα转录活性的抑制.用Western Blot检测RXRα蛋白的表达水平.用RT-PCR检测TR3 mRNA的表达水平.用MTT检测到TPA对SMMC7721肝癌细胞的生长抑制,并且有剂量依赖性.TPA诱导SMMC7721肝癌细胞的凋亡,RXRα蛋白随时间依赖性的降解,并且用CAT分析检测到TPA能抑制RXRα的转录活性.另外TPA能诱导TR3 mRNA的表达上调.TPA抑制SMMC7721肝癌细胞的生长,并诱导凋亡.TPA能上调TR3的mRNA,使RXRα随时间依赖性的降解,并能抑制RXRα的转录活性.因此TPA诱导SMMC7721肝癌细胞的凋亡可能与细胞核受体TR3和RXRα有某些联系.     

锯缘青蟹视神经节FSH和LH的免疫识别

甲壳动物的视神经节含有性腺抑制激素(Gonad inhibiting hormone, GIH),长期以来视神经节被理解为生殖抑制效应.本研究应用脊椎动物卵泡刺激素(Fllicle stimulating hormone,FSH)抗体和黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)抗体,从锯缘青蟹(Scylla serrata)视神经节的视外髓、视内髓和视端髓检测到FSH和LH免疫细胞化学阳性反应.锯缘青蟹视神经节中的FSH和LH免疫阳性物质,可能参与了生殖神经内分泌调节.     

基于TR的超宽带智能反射面建模与优化

针对超宽带智能反射面(IRS)无线通信系统中的时延扩展会造成符号间干扰(ISI)及影响系统性能的问题,研究了基于时间反演(TR)的超宽带IRS无线通信系统建模与优化.首先,基于Rake接收机建立了干扰分析模型,分析了Rake接收机的抽头参数对信干噪比(SINR)、误比特率(BER)的影响.仿真分析表明：与1 GHz带宽相比,2GHz带宽下的ISI使得IRS无线通信系统SINR降低4.73 dB,BER性能损失789%.其次,将TR技术引入到超宽带IRS无线通信系统,在接入点(AP)使用TR技术进行预滤波,利用TR技术的时空聚焦特性抑制IRS通信系统ISI,并提出了一种基于TR技术的联合优化AP端TR预滤波器波形和IRS反射因子新算法.仿真结果表明：与随机相位算法相比,新算法将IRS无线通信系统和速率提升了165%.     

刺桐叶过氧化物酶催化氧化内分泌干扰物双酚A的研究

双酚A(BPA)是目前世界上使用最广泛的工业化合物之一,该酚类化合物是内分泌干扰物(Endocrine Disrupting Chemicals,EDCs)的重要成员之一;BPA对水生生物和人体细胞具有雌激素作用和生物学毒性.EDCs具有生物富集、效用持久以及生理学响应浓度极低等特性,使得其在水体中很难通过传统水处理技术去除.基于酶催化高效、反应条件温和等优点以及刺桐叶片中具有较高的过氧化物酶活性,为了开发其叶片经济价值,探讨刺桐叶片过氧化物酶在清除水体中EDCs中应用前景.考察了刺桐叶片过氧化物酶对水体中EDCs类物质BPA的去除效果及反应条件.结果表明,经过3 h,该酶对BPA清除达99.7%,最佳清除能力的p H范围为7~9,温度为25~50℃,最适酶活性单位为15 U/m L,最佳H_2O_2/BPA摩尔浓度之比为5.     

JcERF1基因RNA干扰载体的构建、转化及沉默效果研究

构建了麻疯树(Jatropha curcas)一个新的ERF类转录因子基因RNA干扰(RNAi)载体,并将之转入过表达JcERF1基因烟草体内, 得到了RNA干扰型烟草. 利用实时荧光定量PCR(QPCR)检测了JcERF1基因的表达量, 发现该基因在干扰型烟草中表达量明显降低. 通过野生型、过表达型和干扰型烟草的种子萌发实验和高盐胁迫实验发现: 与过表达型烟草相比, 干扰型烟草的抗盐能力明显降低, 且干扰型烟草的游离脯氨酸和可溶性糖含量在高盐处理后上升的幅度明显低于过表达型烟草. 以上研究结果说明JcERF1基因在干扰型烟草体内已被有效沉默, 同时说明该基因具有提高转基因烟草抗盐性的功能.     

siRNA干扰p38α上调人血管eNOS基因启动子转录活性

目的:通过靶向 p38α的siRNA干扰人血管内皮细胞的 p38α信号通路,探索其对血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的调节作用.方法:利用 Western 印迹检测 siRNA-p38α干扰HUVEC-12细胞后 p38α蛋白的表达,确定 siRNA-p38α的最佳作用时间和浓度,然后通过双荧光素酶报告基因技术检测转染 siRNA-p38α后细胞裂解液的荧光强度,分析eNOS基因启动子的转录活性变化.结果:与对照组比较,siRNA-p38α干扰后 p38α蛋白表达明显减弱,而相应的 eNOS启动子转录活性上调, 以100 nmol/L 的 siRNA-p38α作用 48 h 的效果最佳.结论:siRNA干扰 p38α信号可上调人血管内皮细胞 eNOS基因的转录活性.     

应用SPE-HPLC/FLD-UV法测定猪粪中4种天然雌激素

目前，内分泌干扰物（EDCs）对人类及其他野生动物的影响日益加剧，成为又一影响全球的环境问题。 EDCs对人体及野生动物的影响机理与其他有毒有害物质不同，它并不直接给生物体带来危害，而是通过影响生物体内部激素的合成、分泌、转运和代谢，干扰生物体正常的生理活动，从而给物种带来灾难性的影响。     

植物MYB转录因子研究

转录因子是通过转录水平或转录后水平上调控目的基因的表达来调控植物生长发育及生理代谢的.MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子是最大的植物转录因子家族成员之一,参与了细胞分化、细胞周期的调节,激素和环境因子应答,并对植物次生代谢以及叶片等器官形态建成具有重要的调节作用.文章对MYB的发现及其结构特征和功能研究进展进行综述,为进一步开展MYB基因的克隆、功能研究和利用提供参考.     

植物MYB转录因子研究

转录因子是通过转录水平或转录后水平上调控目的基因的表达来调控植物生长发育及生理代谢的.MYB (v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子是最大的植物转录因子家族成员之一,参与了细胞分化、细胞周期的调节,激素和环境因子应答,并对植物次生代谢以及叶片等器官形态建成具有重要的调节作用.文章对MYB的发现及其结构特征和功能研究进展进行综述,为进一步开展MYB基因的克隆、功能研究和利用提供参考.     

MicroRNA特征与功能

通过分析总结现代分子生物学国际前沿microRNA(miRNA)领域的研究文献，整理出miRNA研究的基本脉络和走向。miRNA是一类长度～22nt的非编码小分子RNA，在包括线虫、果绳、家鼠、人体以及拟南芥等生物中普遍存在；它在调节基因转录与表达，调控生物体正常发育等生理过程中扮演重要角色。从比较的角度出发，揭示了miRNA与小干扰RNA在其代谢与功能方面共用某些途径，相互交叉与替代，可能同属一个更广范围的小分子RNA介导的生理调控机制。miRNA的研究可能对新一代基因药物的开发具有深远意义。     

亚临床甲状腺功能减退患者TSH与B型尿钠肽原水平的相关性研究——以天水市秦州区人民医院病案为例

目的:探讨亚临床甲状腺功能减退(甲减)患者血清促甲状腺激素(TSH)水平与B型利钠肽原水平的关系.方法:回顾分析本院心内科住院患者96例,空腹测定肝功、心肌酶谱、甲状腺功能和B型利钠肽原水平等指标,TT4、TT3、FT4、FT3浓度数值均在正常范围内.根据TSH水平在0.55TSH4.78 um/L范围为甲功正常组;以血清TSH浓度在TSH≥4.78 um/L范围为亚临床甲减为观察组,并进行统计比较和相关分析研究.结果:正常组和观察组在男女性中分别发病和血脂、心肌酶方面有显著性差异(P0.01);两组之间游离甲状腺素原(FT4)和B型尿钠肽水平之间有显著性差异(P0.05);正常组TSH水平与甲状腺功能和B型尿钠肽水平无相关性,观察组TSH水平与TT4、TT3、FT4之间呈负相关(相关系数,γ=-0.758,-0.637,-0.781,P=0.00);与B型尿钠肽水平也无相关性(相关系数,γ=0.005,P0.05).结论:亚甲减患者出现血脂、心肌酶和B型尿钠肽原的改变,并没有通过TSH甲状腺激素调节轴改变心功能指标B型尿钠肽原水平的高低.通过甲状腺激素水平来调节心肌代谢活动,未发现内分泌性腺轴对心脏内分泌的影响.     

干扰长链非编码RNA NEAT1上调miR-126抑制胃癌细胞的生长、间质转换及裸鼠肿瘤形成

目的 研究干扰长链非编码RNA核富集的转录物1(NEAT1)上调miR-126抑制胃癌细胞的生长,间质转换及裸鼠肿瘤形成的影响.方法 通过RT-PCR分析NEAT1在胃癌MGC-803、SGC-7901细胞和正常胃上皮GES-1细胞中的表达,并检测sh-NEAT1的沉默效率.NEAT1沉默后,EDU染色分析肿瘤细胞的增...     

高内涵筛选NF-kB信号通路的技术体系建立

NF-KB是参与免疫调节、炎症反应、肿瘤发生等过程重要的转录因子,在TNFa、IL-1β、LPS等因子诱导下NF-KB发生核转位并渺活其转录活性.尝试利用高内涵筛选(High Content Screerung,HCS)和RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术建立NF-KB核转位高通量筛选体系,该体系的应用将有助于发现新的NF-KB信号通路调节因子,为免疫与肿瘤的机制研究提供线索.