甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析

钙调蛋白（Calmodulin）是生物细胞内一种重要的调控蛋白，通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应，我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA，逆转录合成cDNA第一链，以此为模板，参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成5′端和3′端引物，利用多聚酶链式反应（PCR）扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因，序列分析表明，它们均由450个核苷酸组成，编码148个氨基酸，在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白均有很高的同源性，同源率在83％以上，编码的氨基酸序列同源性更同，同源率高达95％以上，这两个基因之间存在差异，其核苷酸序列同源率为85％，编码区的氨基酸序列的同源率为99％，仅在第122个氨基酸由ALA代替了VAL。     

红树无瓣海桑果实中抗氧化活性成分研究

从红树无瓣海桑果实中分离出6个化合物,运用波谱学确定了化合物结构,分别鉴定为异鼠李素（1）,胡萝卜苷（2）,木栓酮（3）,熊果酸（4）,3,4-二羟基苯甲酸（5）,对-羟基-3-甲氧基苯甲酸（6）.化合物（1）,（3）,（4）对HepG2显示出抗氧化活性,其EC50值分别为（25.8士1.3）mM,（62.1±3.5）mM,（45.2±2.8）mM.化合物（1）～（6）均首次从该植物果实中分离得到.     

豇豆钙调蛋白cDNA的克隆及序列分析

从豇豆成熟叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,根据钙调蛋白结构基因两端保守序列设计引物,PCR扩增豇豆钙调蛋白基因,克隆到T-easy载体上并测定了其全序列.序列分析结果表明,豇豆钙调蛋白基因由450个核苷酸组成,编码150个氨基酸.与已知的多种植物钙调蛋白基因相比有很高的相似性,核苷酸序列相似性在80%以上,编码的氨基酸序列相似性在90%以上.     

无瓣海桑不同部位单宁含量及叶片单宁的结构分析

无瓣海桑(Sonneratia apetala)作为红树植物外来种,引种到我国后得到大面积种植.本文以广东湛江高桥无瓣海桑林为研究对象,分析了不同部位的单宁含量,并利用MALDI-TOF MS对成熟叶片纯化单宁的化学结构进行分析.研究结果表明:(1)无瓣海桑不同部位(叶片、树皮、根、果)总酚含量在(127.73±3.80)～(359.54 ± 63.28) mg/g之间,其中树皮的总酚含量最高,而花的含量最低,叶的总酚含量也较高,在不同发育阶段叶片中差异不显著.可溶性缩合单宁在花中的含量也最低((17.56±2.61) mg/g),但在果和树皮中最高((276.48±9.62) mg/g和(254.71±5.62) mg/g).蛋白质结合能力在叶片和果较高,而在根中最低.(2)经MALDI-TOF质谱分析显示,无瓣海桑成熟叶片纯化单宁是以葡萄糖分子和棓酰基为基本结构单元的水解单宁,其中棓酰基通过与葡萄糖或另一份子棓酰基脱水形成的共价键相连.     

钦州市引种无瓣海桑现状及发展对策分析

介绍钦州市引进无瓣海桑的基本状况,并结合钦州市经济社会发展实际情况,提出引种无瓣海桑对策及建议,以便钦州市在全力发展沿海经济的同时,为大力保护和改善沿海生态环境提供依据及对策。     

无瓣海桑人工林的生物量与能量研究

为了认识引进红树林树种无瓣海桑(Sonneratia apetala)的生长与生态特征,对雷州附城镇岚北无瓣海桑生态恢复林地进行样方调查与树干生长分析、凋落物收集网收集、干重热值实验分析和网袋就地凋落叶分解试验.结果表明岚北7a生无瓣海桑群落平均单株无瓣海桑材积为101.415 dm3;群落现存生物量为25 016kg/m2,地下部分现存生物量与地上部分现存生物量比例为0.32;当年现存生物量为8.154kg·m-2·a-1;2001年2月至2002年1月凋落物总量为1.895 kg·m-2·a-1;当年群落生产力为10.040 kg/m2;群落能量现存量为443.483MJ/m2;单株能量固定量为1847.849 MJ;当年能量固定量为144.132MJ/m2,当年年能量归还量34.152 MJ·m-2·a-1(2001年),当年能量净固定量为179.474 MJ·m-2·a-1,当年光能转化率为8.10%.同一季节的落叶分解速率相同,半分解期干冷季节为11d、湿热季节为7d,表现出较高的分解速率.元瓣海桑群落具有显著的高生物量与能量积累和归还量特性,其生产力水平处于我国红树林群落中的最高值,其列太阳能的利用形成生物量的水平接近该生态系统最适条件下的水平.因此,对裸滩宜林地选择无瓣海桑进行红树林生态恢复造林,具有成林快、景观和防护等生态效益明显的特点,适合的华南沿海滩涂推广.但是对红树林保护区而言,人工无瓣海桑群落的上述快速生长特性则表现为极强的入侵性,应引起各沿海红树林保护区高度重视和警惕.     

深圳福田无瓣海桑＋海桑人工林的生态影响

对深圳福田红树林7年龄无瓣海桑 海桑人工林生态影响的研究表明：无瓣海桑 海桑林7年龄时,林下土壤颗粒组成发生改变,土壤含盐量升高,pH值降低,有机质、N、P、K、Pb、Cu、Zn等质量百分浓度升高;人工林促进了后缘天然林种群的生长及乡土红树幼苗进入天然林和人工林,加快了天然林向前缘滩涂的拓展。     

无瓣海桑（Sonneratia apetala）对浮游微藻群落结构及生态功能的影响研究

 2009年春季和秋季对广州市南沙区14涌和19涌以人工种植红树植物无瓣海桑（Sonneratia apetala）为主的湿地水体中的浮游微藻进行采样调查,从种类数、丰度、门类组成和多样性指数对微藻进行群落结构及其生态功能的分析研究,并以此对湿地水质进行评价和从藻类的角度分析无瓣海桑对湿地水体的净化功能。结果显示,微藻种类极其丰富,共鉴定出8门92属338种,总丰度在10⁵～10⁷个/L数量级,其中以19涌湿地公园无瓣海桑林内微藻丰度最高,达9.45×10⁶～1.20×10⁷个/L,为超富营养水平。14涌和19涌都存在着有机污染现象,但14涌湿地水质要优于19涌,主要与其内水文条件较优有关。无瓣海桑如果在较封闭的水体环境中易产生较严重的水体富营养化现象。在管理人工红树林湿地时应注意保证林内与林外水体的流通。     

家蚕质多角体病毒基因部分序列克隆及分析

根据BmCPV(Bombyx mori cytoplasmic polyedrosis virus)核酸片段4的末端序列设计一对引物,通过RT－PCR扩增获得多条DNA片段,对其中占优势的约740bp的片段进行切胶回收,克隆到pGEM-Teasy载体上并进行序列测定。与GenBank中的database比较分析表明,该序列与已登录的序列同源性很低,并与呼肠弧病毒科其它种的对应核酸序列有较大差异。本实验证明所测序列为一新序列。     

无瓣海桑叶结构的研究

利用石蜡切片法对无瓣海桑叶进行解剖研究.结果表明,无瓣海桑(Sonneratia a petala)的叶为等面叶,气孔类型为4(-5)细胞轮列型;叶中脉维管束为周韧维管束,有微弱形成层,并具内生韧皮部;叶具四级侧脉,第一级侧脉为半周韧维管束,第二级、第三级、第四级侧脉为外韧维管束;盐腺先由叶的表皮细胞发育成原基,再进一...     

盐藻Psy基因保守序列的克隆及同源性分析

文中根据两种藻——Dunaliella bardawil和Haematococcus pluvialis的Psy cDNA保守序列以及6种植物——Arabidopsis thaliana，Oryza sative，Tagetes erecta，Lycopersicon esculentum，Capsicum annuum和Daucus carota的Psy基因氨基酸保守序列设计了上游引物5’-GAGTACGCCAAGACCTTCTA-3’和下游引物5’-GTTGTCATAGTCATTCTTCTC-3’．以盐藻基因组为模板、以46～35℃每循环递减0．5℃的退火温度扩增获得的大小约为2490bp的片段，经NCBI／BlastP同源性分析推测其为Psy基因的部分片段．     

花椰菜钙调素和兔抗花椰菜钙调素的初步应用研究

用花椰菜ＣａＭ和兔抗花椰菜ＣａＭ建立了定量测定人血清中抗ＣａＭ自身抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法．兔抗花椰菜ＣａＭ和兔抗牛脑ＣａＭ对花椰菜ＣａＭ有基本相同的亲和力．用花椰菜ＣａＭ和牛脑ＣａＭ作为检测抗原，测定人血清中抗ＣａＭ自身抗体得到同样的结果．临床检测１４２例多种疾病患者血清的结果显示，抗ＣａＭ自身抗体水平升高与类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、肝硬化、过敏性紫癜等疾病有密切关系     

花椰菜天然钙调素抗体的特性及其ELISA定量法的建立

钙调素是一种具有多种调节功能的钙结合蛋白质，其免疫原性很弱，本文采用两次基础免疫和多次加强免疫的方法，获得了免疫花椰菜天然钙调素抗血清，用免疫双扩散法鉴定，其效价为１：３２钙调节不易与固相载体结合，我们先用０．２％戊二醛处理聚苯乙烯板载体，再用于包被钙调素，在上述基础上建立了定量测定植物钙调素的竞争性酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术及检测动物血清中抗钙调素抗体的间接ＥＬＩＳＡ技术。     

兔肌肉生长抑制素基因的cDNA克隆及初步分析

以兔骨胳肌为实验材料,构建了兔骨骼肌cDNA文库,根据该基因保守序列,设计简并引物,利用RT-PCR技术,克隆了兔MSTN基因EST片段,以EST片段为探针,应用Southern杂交技术筛选文库,克隆了兔肌肉生长抑制素基因全长cDNA并在GenBank注册(注册号:AY169410).用生物信息学方法对该基因进行了比较分析,表明从氨基酸序列及进化角度兔和其他哺乳类生物的肌肉生长抑制素基因之间关系密切.     

钙调蛋白与酸枣仁皂甙A作用的~1H核磁共振谱研究

利用高分辨的１Ｈ核磁共振技术研究了 Ｃａ２＋对钙调蛋白（ＣａＭ）分子构象的影响以及酸枣仁皂甙 Ａ与 ＣａＭ的作用机制。研究结果表明；随着 Ｃａ２＋的加入． ＣａＭ分子的构象处于不断的变化之中。前两个Ｃａ２＋的加入主要结合在ＣａＭ的第Ⅲ，ⅣＣａ２＋结合位点（Ｃ结构域）上，后两个Ｃａ２＋的加入，则主要结合在ＣａＭ分子的第Ⅰ，Ⅱ Ｃａ２＋结合位点（Ｎ结构域〕上：酸枣仁皂甙 Ａ在 ＣａＭ上也有两类结合位点，一类是位于 ＣａＭ分子 Ｎ结构域上，只能结合一个药物分子的高亲合点；另一类是位于ＣａＭ分子Ｃ结构域上的至少能结合两个药物分子的低亲合点。     

基于CODEHOP的欧李钙调蛋白基因片段的克隆

为克隆欧李钙调蛋白基因序列,本研究采用CODEHOP方法设计了一对简并引物,F1:5'-GGCTGACCAACTGACCga(c/t)ga(c/t)ca(a/g)at-3';F2:5'-CACGTCAGCCTCTCTGatcat(c/t)tc(a/g)tc-3';并采用传统简并引物设计方法设计了简并引物N1:5’-AAATGGC(A/C/G)GATCAGCT(A/C/T)AC-3’;N2:5:’-CACTT(A/G)GCCATCATGAC(C/T)TT-3’.从欧李的幼苗组织中成功克隆出了钙调蛋白基因片段,并第一次完成了对该序列的测序.通过利用NCBI的Blast进行分析等方法证实了该序列与其他植物的钙调蛋白序列具有高度的同源性,该序列与梅花、桃、甜樱桃的钙调蛋白序列同源性都在90%以上.研究证明CODEHOP软件相比传统的设计简并引物的方法具有可信性和高效性,并且钙调蛋白目的基因的成功克隆对钙调蛋白以及欧李高钙特性的研究提供了基础数据.     

人工无瓣海桑林的土壤动态研究

以造林前立地情况基本一致为条件,选取雷州附城镇潮间带人工恢复的无瓣海桑红树林林地（分别于2000年,1997年和1995年造林）的3个代表性样地,对处于不同生态恢复阶段林地的土壤特性进行实验分析,结果表明该人工红树林生态恢复过程对生境中的土壤理化性质有显影响,主要表现为随着红树林生态恢复的进展,土壤pH迅速降低,机械组成中粘粒比重,有机质含量,风干土壤含水量,可溶性SO4^2-和全铁含量趋于增加,6年生林地土壤具有红树林酸性硫酸盐土的基本特征,说明其成土过程为一快速过程。