施一公等在《科学》发文报道酵母剪接体三维结构

正2016年12月16日,清华大学生命学院、结构生物学高精尖创新中心施一公教授研究组于《科学》(Science)杂志就剪接体的结构与机理研究再发长文(Research Article),题为《酵母剪接体处于第二步催化激活状态下的结构》(Structu re of a Yeast Step II Catalytically Activated Spliceosome),报道了酿酒酵母(Saccharomyces     

静息状态下人源STIM1分子的表达纯化及结构初探

Stormal interaction moleculer1 (STIM1)分子作为内质网膜上的钙离子浓度感受器,是CRAC通道的重要组成部分,对于维持细胞内钙离子的稳态发挥重要的作用.本文利用活细胞共聚焦显微成像技术筛选鉴定出静息态STIM1分子突变体,诱导其在真核系统中表达纯化,并利用负染电镜技术,对收集的蛋白单颗粒进行二维(2D)分类,得到静息态人源STIM1分子的近似模型.     

人源RNA解旋酶DDX1的表达、纯化及结构性质研究

RNA解旋酶DEAD-box(DDX)蛋白家族是目前已知的最大解旋酶家族,可以解旋RNA或者解离蛋白-RNA复合物;其中DDX1蛋白参与多种细胞功能,在mRNA/rRNA加工及衰减、病毒复制及转录、激素代谢以及肿瘤发生发展等各方面发挥着重要作用.但目前有关DDX1如何识别、结合和解旋RNA,如何在各种生理病理过程中发挥...     

人A组轮状病毒结构蛋白VP7原核表达及其卵黄抗体效价的研究

为获得人A组轮状病毒重组结构蛋白VP7及其高效价的卵黄抗体,使用PCR技术扩增VP7 DNA片段并将其克隆到原核表达载体pET28a上形成重组质粒pET28a-VP7。将重组质粒转化基因工程菌E.Coil BL21(DE3),用0.5 mM IPTG诱导VP7重组蛋白的表达。通过包涵体纯化和蛋白复性后,将VP7重组蛋白与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡,收集鸡蛋。用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体IgY。进一步应用SDS-PAGE、ELISA和点杂交技术,分析该卵黄抗体的纯度、效价和特异性。结果表明在基因工程菌E.coli BL21(DE3)中能够实现VP7重组抗原的表达,将重组抗原VP7免疫产蛋鸡,提取纯化得到滴度为1:100 000的抗VP7卵黄抗体,且特异性的识别野生型A组轮状病毒。     

我国科学家发现小分子药物调控人源电压门控钠离子通道蛋白的结构学基础

电压门控钠离子通道蛋白在产生和传导动作电位中发挥重要作用.在哺乳动物中,基于组织特异性,至少有9种电压门控钠离子通道异构体,其中命名为"Nav1.3"的电压门控钠离子通道蛋白在中枢神经系统中表达量高.有证据表明Nav1.3蛋白的突变与局灶性癫痫和多微脑回畸形疾病有关,因此Nav1.3蛋白可以作为治疗癫痫药物的靶点.     

人源CLC-7/Ostm1复合物结构揭示一种新构象（英文）

CLC-7是位于溶酶体膜上的Cl^-/H⁺交换转运蛋白。CLC-7及其β亚基Ostm1的缺陷均会导致骨硬化症和神经退行性疾病。本文解析了一个具有3.6?分辨率的人源CLC-7/Ostm1复合物的冷冻电镜结构。该结构揭示了CLC-7/Ostm1异源四聚体的一种新构象，其中CLC-7的胞质结构域可能由于高度柔性而缺失。柔性的细胞质结构域无法限制CLC-7的跨膜结构域，从而允许两个亚基相对远离，使得CLC-7跨膜结构域的二聚界面与已知具有稳定胞质结构域的结构相比减小了约一半。这种二聚界面的变化影响了多个骨硬化症相关残基的相互作用。