血管内皮细胞凋亡过程中几种癌基因表达的研究

为了研究细胞凋亡的分子调控机制,用光学显微技术、ＤＮＡ凝胶电泳和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法,研究了去除生长因子和蛇诱导的两个血管内皮细胞凋亡系统中ｐ５３、ｃ－Ｈｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２基因的表达。发现去除生长因子诱导细胞的凋亡过程中,Ｐ５３基因表达显增加,ｃ－Ｈ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达无变化;蛇毒诱导细胞凋亡过程中,Ｐ５３有达显增加ｃ－Ｈ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达无变化。在正常生     

胸腺内双阴胸腺细胞重建动态的数学模型

根据小鼠的胸腺细胞实验数据,建立了描述胸腺细胞（ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ）发育过程的数学模型,该模型考虑了胸腺细胞与胸腺基质细胞（ｔｈｙｍｉｃ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ,ＴＳＣ）之间的相互作用,能够模拟ＣＤ４－ＣＤ８－ＤＮ细胞重建动态及正常小鼠胸腺细胞的发育过程,研究表明,模型中的一些参数应该是含有时间延迟的,通过模型研究了胸腺细胞与ＴＳＣ之间亲和力在胸腺选择过程中的阳性与阴性选择中的差异,理论预言与实     

采用图像信息学方法研究三维支架中细胞的信号通路

通过慢病毒介导的短发夹RNA对成纤维细胞的转化生长因子β(TGF-β)信号通路进行干扰,采用双光子荧光显微成像技术并结合基于细胞-细胞外基质三维系统的图像信息学方法,研究了植于多孔胶原蛋白支架中成纤维细胞分化过程的TGF-β信号通路.结果表明,在介导成纤维细胞分化的过程中,生长因子TGF-β1比TGF-β3发挥的作用更大,在TGF-β1介导的成纤维细胞分化过程中,蛋白SMAD1和SMAD3通过不同方式也发挥了重要作用.所得结果与通过生化或遗传学方法的结果相吻合.     

抗三尖杉酯碱的HL60细胞蛋白质磷酸化

研究了抗三尖杉酯碱的ＨＬ６０细胞蛋白质磷酸化的变化。经差速离心得到纯膜蛋白，抗性细胞有一高度磷酸化的１１０ｋｕ的蛋白质存在，免疫沉淀ｃ－ＫＡＦ－１蛋白激酶，抗性细胞内ｃ－ＲＡＦ－１蛋白激酶磷酸化程度明显提高，其活性被蛋白激酶Ｃ抑制剂ＣａｌｐｈｏｓｔｉｎＣ明显地抑制。结果表明：ＨＬ６０细胞对三尖杉酯碱的抗药性与蛋白质高度磷酸化有关；抗性细胞内ｃ－ＲＡＦ－１蛋白激酶磷酸化程度明显提高，可能与多药抗药性和抗细胞调亡有关。     

基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化和鉴定

牛碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＲ）ｃＤＮＡ在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，高压均质破碎菌体后，上清液以Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析、Ｃ１８反相ＨＰＬＣ分高纯化得到一分子量为２．２５×１０￣４的蛋白质，其等电点为９．３４，并能与抗牛ｂＦＧＦＭｃＡｂ反应；其氨基酸组成与ｂＦＧＦ文献值一致；活性分析结果表明此蛋白质不仅能促进ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３细胞增值，ＥＤ＿（５０）＝０．８５ｎｇ／ｍｌ，而且能促进鸡胚尿囊膜微血管增生，所得蛋白为具有生物活性的重组碱性成纤维细胞生长因子。     

Xanthobacter autotrophicus产生聚—β—羟基烷酸的显微观…

利用光学显微镜和透射电镜，研究了Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ在发酵中β－羟基烷酸的积累过程及超微结构，得到聚－β－羟基烷酸的最高含量为６２．７０％（Ｗ／ＤＷ），其中聚－β－羟基丁酸与聚－羟基戊酸的比例为１．０：２．６     

胎肝及肝癌组织中IGF—IR的表达研究

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术，从胎肝中克隆出ＩＧＦ－ＩＲβ严基的ｃＤＮＡ序列分析证明同已报道的人胎盘膜ＩＧＦ－ＩＲｃＤＮＡ顺序相同。提示ＩＧＦ－ＩＲ在胎肝的分化发育过程中具有生理意义。     

Xanthobacter autotrophicus产生聚-β-羟基烷酸的显微观察研究

利用光学显微镜和透射电镜，研究了Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ在发酵中聚－β－羟基烷酸的积累过程及超微结构．得到聚－β－羟基烷酸的最高含量为６２．７０％（Ｗ／ＤＷ）．其中聚－β－羟基丁酸与聚－β－羟基戊酸的比例为１．０∶２．６     

发育中花生胚离体萌发和蛋白酶活性变化及脱落酸的影响

发育过程中花生胚氨肽醇有两个活性高峰，与贮藏蛋白质的两个合成高峰相吻合，发育晚期有微弱的羧肽酶活性出现，脱落酸能抑制离体胚萌发，抑制内肽酶和羧肽酶活性，但不抑制氨肽酶活性。发育早期离体胚萌发时贮藏蛋白质降解依赖于羧肽酶、Ａｃｔ－Ｄ和ＣＨＭ处理结果表明羧肽酸在成熟胚已预存但活性处于抑制状态。     

Bc1-2 基因加强表达对 OA 诱发的细胞编程死亡的效应

ＯＡ能诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞进行编程死亡．死亡细胞缩小变圆，细胞质凝聚，ＤＮＡ有控降解成约２００ｂｐ左右的片段，且这一过程可由蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮（ＣＨＸ）抑制．将编码Ｂｃ１－２全长蛋白质的ｃＤＮＡ植入ｐＸＪ４１ｎｅｏ载体中，使其表达由ＨＣＭＶ病毒启动子控制．形成的顺义（ｐＢｃｌ－２－Ｓ）及反义（ｐＢｃｌ－２－ＡＳ）表达质粒经转染导入ＳＫ细胞中获得稳定转染子，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ印迹表明顺义转染子表达较大量的２６ｋｄＢｃ１－２蛋白，而反义转染子则不表达．增强表达的Ｂｃ１－２基因产物对ＯＡ引ＳＫ细胞编程死亡无抑制效应．     

RT—PCR法检测SMMC—7721人肝癌细胞α5β1整合蛋白 …

整合蛋白α５β１是一类存在于细胞表面的细胞粘附分子，在肝癌的发生发展和演进中起着重要的作用。研究了快速定量检测整合蛋白α５β１ ｍＲＮＡ表达的ＲＴ－ＰＣＲ方法，结果表明：在ＰＣＲ反应体系中加入２５ｎｇ到２００ｎｇ ｍＲＮＡ的逆转录产物呈较好的线性关系，并以此为反应条件测定ｐｃＤＮＡ３－α５，ｐｃＤＮＡ３－β１质粒共转染或单转染的α５β１．６－７７２１，α５．３－７７２１，β１．６－７７２１细胞株ｍ     

编程性细胞死亡的研究进展

本文从ＰＣＤ有关的基因、蛋白质、信号等方面介绍了ＰＣＤ的研究进展．线虫的ｃｅｄ－３、ｃｅｄ－４、ｃｅｄ－９,哺乳动物的ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｍｙｂ、ｍｙｄ、Ｂｃｌ－２Ｍｃｌ等是调节ＰＣＤ的重要基因．ＩＣＥ家族蛋白酶、Ｆａｓ、ＰＡＲＰ、蛋白激酶Ａ、酪氨酸蛋白激酶、整合素等蛋白质或酶与ＰＣＤ密切相关,而自杀信号、生存信号、外部信号等是ＰＣＤ重要的诱发因素．     

N—Mannich碱的制备及其与芳香酮的交换反应

用琥珀酰亚胺、芳香醛和芳香胺在乙醇溶液中反应，制取了１０个Ｎ－Ｍａｎｎｉｃｈ碱，其中７个为未见文献报导的化合物，这类Ｎ－Ｍａｎｎｉｃｈ碱在重结晶加热时易发生分解，用Ｉ与芳香酮在ＥｔＯＨ－Ｈｃｌ溶液中进行交换反应时，得到了非预期的产物α，β－不饱和酮及其与ＨＣｌ的加成产物，反应显著经过了交换－消除－加成的过程。     

N－Mannich碱的制备及其与芳香酮的交换反应

用琥珀酰亚胺、芳香醛和芳香胺在乙醇溶液中反应，制取了１０个Ｎ－Ｍａｎｎｉｃｈ碱（Ⅰａ～ｊ），其中７个为未见文献报导的化合物。这类Ｎ－Ｍａｎｎｉｃｈ碱在重结晶加热时易发生分解。用Ⅰ与芳香酮在ＥｔｏＨ－ＨＣｌ溶液中进行交换反应时，得到了非预期的产物α，β－不饱和酮及其与ＨＣｌ的加成产物。反应显然经过了交换－消除－加成的过程。     

腺相关病毒介导带基因座控制区核心序列的β—珠蛋白基因在红？…

为提高人β－珠蛋白基因在基因转移中的稳定性与在红系细胞中的表达水平，构建了带单个和多个基因座控制区核心序列的人β－珠蛋白基因相关病毒（ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓ，ＡＡＶ）载体ＡＶ５３ＨＳ２△β２Ｎｅｏ和ＡＶ５３ＨＳ４３２△β２Ｎｅｏ。利用ＡＡＶ载体介导的基因转移将两种重组体导入红系细胞（ＭＥＬ），分析了它们在ＭＥＬ细胞中的整合与表达。结果表明，ＡＡＶ载体介导带多个基因座控制区核心序     

天门冬糖蛋白的分离纯化及其糖肽键的研究

冷水浸提中药天门冬，提取物经丙酮分级，得到ＡＧ－ａ，ＡＧ－ｂ和ＡＧ－ｃ三个级份。ＡＧ－ｃ用ＤＥＡＥ—纤维素柱纯化，得到水洗脱级份ＡＧ－ｗ和０．５ＮＮａＣｌ洗脱级份ＡＧ－ｃ。凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳，均表明ＡＧ－ｃ为均一性糖蛋白。红外光谱显示，所有的天门冬糖蛋白级份均含有乙酰基团。β—消去反应检测，ＡＧ－ｃ中糖和蛋白质间的连接键为Ｏ—型糖肽键     

天门冬糖蛋白的分离纯化及其糖肽腱的研究

冷水浸提中西药天门冬，提取物经丙酮分级，得到ＡＧ－ａ，ＡＧ′－ｂ和ＡＧ′－Ｃ三个级份，ＡＧ－ｃ用ＤＥＡＥ－纤维素柱纯化，得到水洗脱级份ＡＧ－Ｗ和０．５ＮＮａＣｌ洗脱级份ＡＧ－ｃ。凝胶柱层和醋酸纤维薄膜电泳，均表明ＡＧ－ｃ为均一性糖蛋白。红外光谱显示，所有的天门科冬糖蛋白级份均含有乙酰基因，β－消去反应检测，ＡＧ－ｃ中糖和蛋白质间的连接键为Ｏ－型糖肽腱。     

反胶团法提取细胞色素－C

以细胞色素ｃ（ｃｙｔ－Ｃ）为对象，研究了水相ｐＨ值和离子强度对反胶团法萃取和反萃取ｃｙｔ－Ｃ的影响；讨论了不同种类的表面活性剂的萃取机理。研究结果表明，选择合适的体系及条件，反胶团提取是实现蛋白质分离提纯的有效方法。     

无血清培养细胞HICSF的自分泌生长因子的检测

为了探讨无血清培养细胞ＨＩＣＳＦ的自分泌调控机制，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测生长因子ｂＦＧＦ，ＴＧＦβ１和细胞因子ＩＬ－６，ＩＬ－８，Ｇ－ＣＳＦ以及细胞因子受体ＩＬ－６Ｒ和ＩＬ－８Ｒ在ＨＩＣＳＦ细胞及其同基因来源的血清培养细胞ＨＩＣ中的表达状况，同时用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察重组ＩＬ－６和ＴＧＦβ１对这２种细胞生长的影响，以观察癌细胞在有血清和无血清培养条件下部分生长因子和细胞因子的表达及反应性差异     

大肠杆菌β－半乳糖苷酶基因在小菜蛾细胞中的表达

用携带大肠杆菌β－半乳糖苷酶（β－ｇａｌ）基因的杆状病毒转移载体．ｐＡｃ３６０－β－ｇａｌ与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）ＤＮＡ经钙磷沉淀法共转染小菜蛾细胞系（ＢＣＩＲＬ－ＰＸ２－ＨＮＵ２,Ｐｘ）,利用Ｘ－ｇａｌ空斑检测分析,β－ｇａｌ基因成功地插入ＡｃＮＰＶ基因组中,得到重组病毒Ａｃ－β－ｇａｌ,重组病毒在Ｐｘ细胞中表达出受ＡｃＮＰＶ多角体蛋白基因启动子控制的具有生物活性的外源基因表达产物──β－ｇａｌ．