沙棘叶水溶性多糖SJ21的分离纯化及组成分析

本文的目的是研究沙棘叶中的多糖组分.采用热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖的方法,用酸性乙醇和DEAE_SephdexA_25进行分离纯化,红外光谱鉴定多糖,纸层析及气相色谱分析其单糖组成.结果证明:纯度鉴定表明SJ21为纯多糖,分子量约为70KD.SJ21红外光谱中有典型的多糖和β型糖苷键吸收峰.纸层析及气相色谱分析其单糖组成为Xyl、Ara、Man、Glc、Gal,摩尔比为1.0∶2.1∶2.9∶5.3∶3.7.SJ21为首次从沙棘叶中提取获得.     

沙棘叶水溶性多糖的初步纯化及体外清除自由基活性研究

通过采用热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为三个级分:SJ1、SJ2和SJ3,经PC和GC分析都含有Xyl(木糖)、Ara(阿拉伯糖)、Glc(葡萄糖)、Man(甘露糖)、Gal(半乳糖)、GalA(半乳糖醛酸).对粗多糖及SJ2脱蛋白后的多糖SJ2'进行清除自由基活性研究,结果表明,粗多糖对三种自由基的清除力很小,而SJ2'能有效清除·OH、O2-·自由基,对脂质自由基R·效果不明显.     

沙棘叶黄酮纯化工艺优化

采用溶剂浸提法提取总黄酮,大孔树脂吸附纯化,分光光度法测定总黄酮的含量,正交试验建立沙棘叶总黄酮纯化的优化工艺.结果得出沙棘叶黄酮纯化优化工艺是:选用AB-8型大孔树脂对沙棘叶总黄酮粗制品进行吸附纯化,用浓度为0.20mg/mL,pH=6.0沙棘叶黄酮溶液上样,控制流速为2.0mL/min.选用70%乙醇进行洗脱,用量为柱床体积的4倍,流速为3.0mL/min.经纯化后得精制品1.29g,总黄酮含量为14.89%,比粗制品黄酮含量提高103倍.用此工艺,AB-8型湿树脂饱和吸附量为79.19mg/ml,树脂重复利用8次后,吸附率都在70%以上,仍无明显变化.上述工艺操作简单、方法可靠,产品得率高,说明此工艺可以有效纯化沙棘叶总黄酮,且树脂可重复利用次数多,性能好,适合于沙棘叶黄酮的大规模生产.     

荔枝保鲜过程中多酚氧化酶活性的抑制研究

荔枝保鲜过程中极易产生酶促褐变．本文采用分光光度法，研究了荔枝果皮的多酚氧化酶(PPO)的活性．考察了抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、双氧水等的褐变抑制效果，确定出以柠檬酸为抑制剂后，通过抑制剂浓度、pH值、温度等因素对多酚氧化酶活性的影响，得出各个影响因素的两个水平值．最后通过正交试验法确定出荔枝保鲜过程中多酚氧化酶抑制的最佳条件．     

沙棘叶水溶性多糖的提取及分离纯化

通过采用热水提取和乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为3个级分SJI、SJ2和SJ3,将SJ2脱蛋白后经DEAE-Sephadex A-25进行分离纯化得SJ21和SJ22,经纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和Sepharose CL-4B柱层析纯度鉴定表明:SJ21和SJ22的相对分子质量均约为7×104,为首次从沙棘叶中分离得到的纯多糖.     

沙棘叶中黄酮提取及大孔树脂分离纯化槲皮素

采用响应面的方法对热碱水提取沙棘叶中黄酮的条件进行优化,较佳工艺条件为pH值11.4,温度75.5℃,质量浓度28.6 mg/mL,提取2.0h,产率为1.23％.磷酸沉淀后采用大孔树脂进行纯化,比较了3种大孔树脂AB-8、DM301、HPD-100对沙棘黄酮的纯化效果,最终选出较佳大孔树脂为AB-8,且当上样液浓度为1.0 mg/mL、pH值为6.0、吸附1.0h后,树脂的吸附率达到最大值.最后用3倍柱体积蒸馏水洗脱除去杂质,用不同体积分数乙醇溶液（30％,50％,70％,80％,90％）进行梯度洗脱,并将解吸液用高效液相色谱（HPLC）进行检测,结果显示80％和90％乙醇解吸液中槲皮素纯度均可到达97％以上.     

荔枝保鲜过程中多酚氧化酶活性的抑制研究

荔枝保鲜过程中极易产生酶促褐变.本文采用分光光度法,研究了荔枝果皮的多酚氧化酶(PPO)的活性.考察了抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、双氧水等的褐变抑制效果,确定出以柠檬酸为抑制剂后,通过抑制剂浓度、pH值、温度等因素对多酚氧化酶活性的影响,得出各个影响因素的两个水平值,最后通过正交试验法确定出荔枝保鲜过程中多酚氧化酶抑制的最佳条件.     

掌叶半夏凝集素的分离纯化及抗蚜活性研究

前已发现某些国产药用植物粗提物在体外实验中的杀虫活性与所含蛋白有关，利用４５％饱和硫酸铵沉淀，ＰＨＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ疏水柱层析和ＱＳＡｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ离子交换柱层析，从掌叶半夏块茎中分离纯化到一种蛋白质（ＰＰＡ），ＰＰＡ在刺吸口器害虫棉或桃蚜的人工饲料中分别含０．１２％或０．１５％时显示出明显的致死作用，ＰＰＡ是一种热稳定性较强，亚基分子量１２ｋｕ的非共价结合的上聚体凝集素。     

香水梨中多酚氧化酶的活性研究

以磷酸盐作为缓冲液。提取梨中多酚氧化酶的粗酶液。以邻苯二酚为底物。用分光光度法研究了多酚氧化酶作用的最适条件以及一些化学试剂对酶活性的影响．结果表明：香水梨中多酚氧化酶酶促反应的适宜温度为25℃,最适pH值为5．0。半胱氨酸、维生素C为较好的抑制剂,柠檬酸对多酚氧化酶的抑制作用随浓度不同而不同．     

沙棘叶水溶性多糖的生物活性研究

采用热水提取乙醇沉淀,获得了沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为3个级分(即SJ1,SJ2和SJ3),经PC和GC分析,各级分都含有Xyl,Ara,G lc,M an,Gal,GalA.抑菌实验表明:沙棘叶多糖对大肠杆菌、枯草杆菌和四叠菌都有明显的抑菌作用,对白葡萄球菌呈阴性.     

烟草中多酚氧化酶的生理生化特征及其活性控制的研究

对烟草叶中的多酚氧化酶(PPO)进行了部分纯化，对比了叶中PPO在苗期和田间的活性差异，研究了其活性变化规律，发现生长旺盛期PPO活性高于其他时期，研究了烟叶在不同水势条件下PPO活性变化规律，发现水势过高、过低，PPO活性均较低，在一872．78kPa水势条件下，PPO活性最高，所以细胞中的含水量是影响PPO活性的因素之一．研究了PPO在35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃和75℃等烘烤温度条件下的热敏感性，发现：酶的最适反应温度为35℃；温度由35℃升至75℃，活性逐渐下降，在每一温度下保持5min，活性趋于稳定，用回归法得出了烟叶中PPO的下降百分数与温度之间的关系式．用双倒数作图法比较了NaDiCa、EDTA、巯基乙醇和硫脲4种常用抑制剂对烟叶中PPO活性的抑制强度，结果表明：同一浓度下它们对PPO的抑制强度依次递减，而NaDiCa抑制效率明显高于其他3种抑制剂；CuCl2可以促进PPO活性，用回归法得出了活力增加百分数与二价铜离子浓度的关系式。     

中华芦荟多酚氧化酶的分离纯化

采用丙酮粉沉淀抽滤法从中华芦荟中提取多酚氧化酶.提取的粗酶液经30%~80%硫酸铵分级沉淀,透析除盐,DEAE-Sephadex A-50阴离子交换柱层析,后经PEG 6000浓缩,得到纯化的多酚氧化酶,其纯化倍数为13.28.纯化后的酶液经SDS-PAGE电泳分析,采用考马斯亮蓝R-250染色显示为单一蛋白带,分子量约为54.1 KD.     

牛蒡中多酚氧化酶的活性及其影响因素研究

对牛蒡中所含的多酚氧化酶的活性及其影响因素的研究表明,牛蒡中多酚氧化酶的适宜ｐＨ值是６．０～７．５,适宜温度４５℃,较有效的抑制剂是２％钾明矾和０．０２％ＳＳＡ的混合液,或０．５８％磷酸和０．０２％ＳＳＡ的混合液．用此溶液浸泡过的牛蒡,再用ＨＰＥ薄膜袋包装后,在－４０℃下速冻,放在－１８℃冷冻库保存,贮藏期达６个月以上．     

家蝇蛹中多酚氧化酶的分离纯化及抑菌活性的研究

采用缓冲液浸提、超滤、亲和层析和高效液相色谱4种方法,从家蝇蛹中分离纯化一种D-半乳糖专一性的多酚氧化酶(PO),并对其抑菌活性进行了研究.在SDS-PGAGE中呈现出两个条带,其中表观分子质量为78 ku的条带为目的蛋白;经过高效液相色谱分析,呈现出了分别和SDS-PAGE结果中相对应的两个峰,其中第一个峰为要纯化的目的蛋白;目的蛋白经过肽指纹图谱检测为PO,精确分子质量为79ku.1mL纯化的PO在1 g/L的质量浓度下对1 mL稀释后的大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌和伤寒沙门菌(106mL-1)的抑制率分别为43.2%、38.7%和50.1%.     

海带抗氧化多酚的制备及活性研究

用1:1的氯仿:甲醇超声提取海带成分,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用DPPH法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、铁氰化钾还原法和邻苯三酚自氧化进行抗氧化实验,同时与抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和没食子酸(GA)进行对照。结果显示海带提取物与各萃取组分均具有较强的抗氧化能力,其中乙酸乙酯提取物(EA)抗氧化活性最强。在50μg/mL浓度时,EA清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的能力和还原能力均高于抗氧化剂BHT,且清除超氧阴离子自由基的能力也高于GA;另外,Aqueous组分在所有测定浓度下清除羟自由基能力均高于GA,清除O2-的能力也高于BHT。海带各提取物总酚含量的分析表明总酚含量与抗氧化活性之间具有一定的相关性,总酚含量高其抗氧化能力也相应提高,表明多酚是提取物中重要的抗氧化成分。4种抗氧化方法的比较表明DPPH法的相关系数最高(R=0.987),是海带体外抗氧化实验最有效的方法。     

桉叶多酚种质资源筛选

桉叶中多酚含量丰富,是一类具有开发价值的天然活性物质。对国内多个品种桉叶的多酚含量进行比较,为桉叶多酚的开发利用进行资源筛选。选择了四川、广西、湛江和广州的主要桉树品种,15种桉叶进行桉叶多酚提取和抗氧化活性筛选,其中湛江广林9号、广林29号以及广西广林9号的桉叶多酚含量和抗氧化活性均高于其它品种,可作为桉叶多酚提取原料。另外对桉叶的干燥处理方法进行了考察,结果表明阴干的桉叶多酚含量高,抗氧化活性强。     

微波法水提取沙棘叶中黄酮的研究

以水为介质，对沙棘叶进行微波处理提取黄酮，其提取效果与常规水浸提法比较表明，微波提取效率大大提高.微波水提取黄酮的最佳工艺条件为：微波功率360W，提取时间3min，沙棘叶粉与水的质量比为1：30，提取率为1．21％．     

荔枝果肉不同极性多酚提取及其抗氧化活性比较

为了了解荔枝果肉多酚的含量及其抗氧化活性,分别选用60%乙醇和80%丙酮从荔枝果肉中提取多酚,并按极性大小对其多酚进行分部萃取,采用DPPH、FRAP和ABTS法比较不同极性多酚的体外抗氧化活性差异.结果表明,采用80%丙酮提取的荔枝果肉多酚的抗氧化活性显著强于60%乙醇提取的（P0.05）,两种提取法所获得的不同极性多酚含量都存在显著差异（P0.05）,其中水部多酚含量最高,正丁醇部次之;四种极性多酚的抗氧化活性亦存在显著差异（P0.05）,以乙酸乙酯部活性最强,正丁醇部其次（P0.05）.通过对不同极性荔枝果肉多酚的有效分离和抗氧化活性比较,为荔枝果肉多酚的分离纯化和抗氧化机制研究奠定了基础.