反义技术—生物技术的第二次浪潮

反义技术是应用反义寡核苷酸来选择性地封闭基因表达的一项新兴的生物技术。它的出现掀起了基础、临床及药物开发领域新一轮的技术革命。简述了反义技术的理论机制、反义核酸的种类、应具备的特性及在相关领域中的应用。     

CTGF反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞转分化的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)合成CTGF与а-SMA表达的影响。方法:测算CTGF反义寡核苷酸对体外培养HLECs的转染率;应用CTGF反义寡核苷酸直接转染第三代HLECs进行细胞生长曲线的测定;采用RT-PCR检测细胞CTGF和α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA水平。结果:直接导入法反义寡核苷酸进入较慢,但导入72h后未出现细胞毒性。CTGF反义寡核苷酸直接导入HLECs培养细胞72h后可见对细胞增殖的抑制作用。直接导入法处理48h后,TGF-β1能显著增加CTGF以及α-SMA mRNA的表达,但却可被CTGF反义寡核苷酸所抑制。而错义寡核苷酸却没有这种作用。结论:CTGF反义寡核苷酸直接转染HLECs能抑制TGF-β1诱导的CTGF与α-SMA表达上调,提示CTGF反义寡核苷酸可能为防治后发性白内障提供新途径。     

Mcl-1反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨髓样细胞白血病-1(Mcl-1)反义寡核苷酸(ASODN)对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法:将Mcl-1 ASODN转染入体外培养的肝癌HepG2细胞。用WST-8法检测不同浓度的Mcl-1 ASODN对HepG2细胞增殖抑制率;用流式细胞仪检测Mcl-1 ASODN对HepG2细胞周期和凋亡的影响,用Hoechst33258染色在荧光显微镜下观察HepG2细胞凋亡的形态学改变。结果:Mcl-1 ASODN作用HepG2细胞48 h后,与空白对照组(blankcontrol)和随机寡核苷酸(RODN)对照组相比,Mcl-1 ASODN组能明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖和诱导其凋亡(P<0.05),Mcl-1 ASODN组细胞出现S期明显的阻滞;Hoechst33258染色可见大量的细胞核固缩,核碎裂。结论:Mcl-1 ASODN能抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

c—Myb基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖和生长的影响

用体外培养技术研究了ｃ－Ｍｙｂ基因的ｍＲＮＡ反义寡核苷酸对慢凿Ｄ５６２红白细胞增殖和生长的影响。结果显示．ｃ－Ｍｙｂ基因反义寡核苷酸在２０－１６０μｇ／ｍｌ时，对细胞的增增与集落的形成有明显的抑制作用，提示：ｃ－Ｍｙｂ基因在控制白血病增殖与生长中起重要作用。     

c－Myb基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖和生长的影响

用体外培养技术研究了ｃ－Ｍｙｂ基因的ｍＲＮＡ反义寡核苷酸对慢粒Ｋ５６２红白细胞系增殖和生长的影响。结果显示：ｃ－Ｍｙｂ基因反义寡核苷酸在２０～１６０μｇ／ｍｌ时，对细胞的增殖与集落的形成有明显的抑制作用，提示：ｃ－Ｍｙｂ基因在控制白血病细胞增殖与生长中起重要作用     

2‘5’寡腺苷酸—反义寡核苷酸体外抑制乙型肝炎病毒研究

乙型肝炎是目前最常见的病毒性传染病之一,但是慢性乙肝的治疗至今仍是难题。治疗原则包括抗病毒、免疫调节、改善肝功能、抗肝纤维化等。用抗病毒治疗来清除病毒是根本的治疗措施。反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,AS)对 HBV 具有一定的抑制效应。但 AS     

一个新的靶点的反义bcl—2寡核苷酸诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：探讨针对bcl-2mRNA蛋白编码区的反义寡核苷酸对HL-60细胞bcl-2蛋白表达和凋亡的作用。方法：应用台盼蓝拒染法和流式细胞仪检测HL-60细胞的活性和bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的情况。结果：10μmol/L和20μmol/L的反义寡核苷酸能抑制HL-60细胞bcl-2蛋白表达和诱导细胞调亡,并且针对bcl-2mRNA蛋白编码区的反义寡核苷酸比针对bcl-2mRNA翻译起始区的反义寡核苷酸作用更强。结论：针对bcl-2mRNA蛋白编码区的反义寡核苷酸能抑制HL-60细胞bcl-2蛋白表达和诱导细胞调亡。     

分子生物学新技术—反义技术

反义技术是近年发展起来的一种分子生物学新技术。它根据核酸杂交原理设计针对特定靶序列的反义核酸,从而抑制特定基因的表达,目前包括反义RNA、反义DNA和核酶三大技术。该技术的研究具有重要的理论意义和实际意义。     

马铃薯淀粉的化学改性

本文结合作者自己的实验研究,概述马铃薯淀粉化学改性的主要途经,以开发马铃薯淀粉的综合利用。     

自蔓延高温合成及其表面涂层技术

自蔓延高温合成（SHS）法是一种新兴的材料制备方法,而由此衍生的自蔓延高温合成表面涂层技术已成为一种重要的材料表面改性技术。介绍了自蔓延高温合成技术的基本原理、分类及其应用。自蔓延高温合成涂层技术有广泛的应用,特别是在石化工业中重要设备的防腐中有重要的作用,可以带来巨大的经济效益和社会效益。今后对SHS涂层技术的研究将集中在复杂形状工件、金属基板材的SHS涂层制备技术及利用添加剂改善SHS涂层性能等方面。     

魔芋葡甘露聚糖的化学改性及其应用性能的研究

采用醚化氧化工艺,以魔芋粉为原料合成了系列印花糊料 Ｍ_１和 Ｍ_２并且就其应用性能分别与意大利的 Ｉｎｄａｌｃａ ＰＡ－４０及海藻酸钠进行比较,其中Ｍ_１各项达到了Ｉｎｄａｌｌａ ＰＡ－４０的水平,Ｍ_２各项指标接近海藻酸钠．     

自蔓延高温合成及其表面涂层技术

自蔓延高温合成 (SHS)法是一种新兴的材料制备方法 ,而由此衍生的自蔓延高温合成表面涂层技术已成为一种重要的材料表面改性技术。介绍了自蔓延高温合成技术的基本原理、分类及其应用。自蔓延高温合成涂层技术有广泛的应用前景 ,特别是在石化工业中重要设备的防腐中有重要的作用 ,可以带来巨大的经济效益和社会效益。今后对SHS涂层技术的研究将集中在复杂形状工件、金属基板材的SHS涂层制备技术及利用添加剂改善SHS涂层性能等方面     

聚苯胺的化学合成、结构及导电性能

导电聚苯胺是结构和性能最稳定的导电高分子材料，有较广泛的应用前景。本实验用化学氧化合成方法，较系统地研究了氧化剂种类、用量、介质酸的浓度以及聚合反应温度等因素对苯胺聚合反应及产物性能的影响；找出了最适宜的合成反应条件和特殊的后处理工艺，并合成出了电导率高达３０．６５Ｓ／ｃｍ，收率达１２７．８％的高性能导电聚苯胺     

苦参凝集素的色氨酸残基修饰与荧光光谱研究

苦参凝集素（SFL）经等电聚焦测得其等电点为5.56,用比色法测得每分子SFL含有3个色氨酸残基,经N-溴代丁二酰亚胺（NBS）修饰表明其中2个Trp残基位于分子表面,当这2个Trp残基补修饰后,SFL的凝血活性完全丧失,糖保护试验表明,SFL专一性抑制糖Man能够保护SFL,阻断NBS对SFL的修饰作用,说明色氨酸不仅是SFL凝血活性所必需的,而且还参与其糖结合部位的组成,SFL随着NBS的逐渐修饰,其内源荧光光谱亦相应发生变化,结果表明分子表面的2个Trp残基可能位于分子的疏水袋中,而另一个Trp残基则埋藏于分子内部,荧光淬灭研究表明,丙烯酰胺能淬灭87%色氨酸残基的荧光。     

CHANGES IN PHYSICO-CHEMICAL CHARACTERISTICS AND STRUCTURES OF WHEAT STRAW SODA LIGNIN AFTER MODIFICATION

麦草碱木素在碱催化下经脱甲基改性可提高其反应活性．本文采用元素分析、扫描电镜、凝胶色谱、１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ波谱较系统地研究脱甲基改性麦草碱木素化学组成、微观表面形态和化学结构的变化．研究结果表明，脱甲基活化改性后，麦草碱木素的甲氧基含量由１０．３％降至６．０９％，而酚羟基和羧基含量分别由２．９８％和４．５８％增至５．５１％和７．１０％．脱甲基改性后氧元素含量下降，改性麦草碱木素的微观形态呈致密的球形，在尺寸上比未改性的麦草碱木素小．改性后麦草碱木素的平均相对分子质量（Ｍｗ）由６２１７降至５１４８，相对分子质量分布情况发生变化．脱甲基改性使苯环上的烷基芳基醚键断开，形成酚羟基，同时，在一定程度上也伴随木素结构单元间化学联接的断裂，体现在其核磁共振波谱和平均相对分子质量的变化．     

烷基呋喃类香料及其合成

综述了２－烷基呋喃的合成方法，总共７种．介绍了几种烷基呋喃化合物的存在、感官特性及用途．     

酰胺型氮杂冠醚的合成

在无水条件下,以２,３－苯并－１０－氮杂－１,４,７,１３－四氧杂环十五－２－烯（Ａ）与酸酐和酰氯反应合成了７个新型的酰胺型氮杂冠醚（Ｂ）。以上化合物均经元素分析、红外、核磁共振数据证实。