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甜菜坏死黄脉病毒RNA4的菌传功能分析 总被引:2,自引:1,他引:2
构建了甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA4全长核苷酸序列以及5种编码区突变体的侵染性cDNA克隆,不同结构伯RNA4体外转录物与只含有RNA1,2和3的BNYVV分离物总RNAs混合后分别接种寄主植物番杏(Tetragonia expansa)作为毒源,繁殖后接种甜菜,利用无毒甜菜多黏菌(Polymyxa betae)进行传毒实验,结果表明,RNA4编码区内各种缺失突变均能显著地抑制多黏菌的传播,但插入4个碱基的移码突变体对传毒没有影响,说明BNYVVRNA4中的部分核苷酸序列对于被真菌介体高效传播是必需的,并且可能是在RNA水平上具有功能。 相似文献
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甜菜坏死黄脉病毒RNA5对病毒致病性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
利用甜菜坏死黄脉病毒(Beet necrotic yellow vein virus, BNYVV) RNA5全长侵染性cDNA克隆体外转录获得的RNA5体外转录物, 与只含有RNA1, 2以及RNA1, 2和3的两个BNYVV突变株BNYVV-Hu0和BNYVV-Hu3的RNAs分别混合, 并接种于寄主植物番杏(Tetragonia expansa)和甜菜(Beta vulgaris L). 结果表明, RNA5是BNYVV中除RNA3以外的另一个病毒致病性相关分子, 它的存在能够提高病毒的侵染效率和在寄主体内的积累水平, 并与RNA3协同作用, 导致病毒侵染后的症状表现加重. 相似文献
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《科学通报》2008,(7)
利用烟草坏死病毒A中国大豆分离物(Tobacco necrosis virus A Chinese isolate,TNV-AC)的全长侵染性cDNA克隆构建系列突变体进行体外转录.在枯斑寄主苋色藜(Chenopodium amaranticolor)上的侵染性检测结果表明,TNV-AC亚基因组RNA1的转录起始位点位于基因组RNA的G2184,亚基因组RNA2的转录起始位点位于基因组RNA的G2460.进一步分析表明,亚基因组RNA1中p8和p6基因的翻译灭活突变可导致病毒在苋色藜上的侵染症状消失,但不影响病毒在烟草原生质体中的复制,说明p8和p6基因产物可能影响病毒在细胞之间的移动,是病毒造成枯斑所必需的基因.通过原核表达产物分析,证明了亚基因组RNA2中外壳蛋白(coat protein,CP)基因的可读框起始于基因组RNA的2612~2614位AUG.CP可读框核苷酸替换或缺失突变分析表明,完整的CP蛋白虽不是病毒建立侵染所必需的,但其翻译起始密码子区域的核苷酸序列保守性及可读框核酸序列的完整性对病毒侵染苋色藜后产生枯斑的数量、显症时间和病毒RNA的积累量具有明显影响.综合以上结果,对TNV-AC的cp基因在侵染枯斑寄主苋色藜过程中的其他功能进行了讨论. 相似文献
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中国番茄黄化曲叶病毒和烟草曲茎病毒AC2和AC4蛋白为RNA沉默的抑制子 总被引:3,自引:1,他引:2
中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)能系统侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)等寄主植物但不诱导明显的症状,而烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)单独侵染则诱导曲叶等症状。对表达GFP基因的转基因本氏烟的接种试验表明,TYLCCNV-Y10不回复已建立的GFP沉默也不抑制GFP沉默的建立,而TbCSV-Y35能部分回复已建立的沉默且能在新叶抑制沉默的建立。农杆菌共浸润试验发现,TYLCCNV-Y10和TbCSV-Y35的AC2和AC4蛋白都能抑制GFP的局部沉默并延迟GFP的系统沉默,为RNA沉默的抑制子。比较共浸润区GFP mRNA的积累表明,Y10 AC2与Y 35AC2蛋白具有相近的RNA沉默抑制能力,而Y35 AC4蛋白是一个比Y10 AC4蛋白更强的抑制子。因而,TbCSV-Y35和TYLCCNV-Y10致病性差异的原因可能与二者AC4蛋白的功能差异有关。 相似文献
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利用烟草坏死病毒A中国大豆分离物(Tobacco necrosis virus A Chinese isolate, TNV-AC)的全长侵染性cDNA克隆构建系列突变体进行体外转录. 在枯斑寄主苋色藜(Chenopodium amaranticolor)上的侵染性检测结果表明, TNV-AC亚基因组RNA1的转录起始位点位于基因组RNA的G2184, 亚基因组RNA2的转录起始位点位于基因组RNA的G2460. 进一步分析表明, 亚基因组RNA1中p8和p6基因的翻译灭活突变可导致病毒在苋色藜上的侵染症状消失, 但不影响病毒在烟草原生质体中的复制, 说明p8和p6基因产物可能影响病毒在细胞之间的移动, 是病毒造成枯斑所必需的基因. 通过原核表达产物分析, 证明了亚基因组RNA2 中外壳蛋白(coat protein, CP)基因的可读框起始于基因组RNA的2612~2614位AUG. CP可读框核苷酸替换或缺失突变分析表明, 完整的CP蛋白虽不是病毒建立侵染所必需的, 但其翻译起始密码子区域的核苷酸序列保守性及可读框核酸序列的完整性对病毒侵染苋色藜后产生枯斑的数量、显症时间和病毒RNA的积累量具有明显影响. 综合以上结果, 对 TNV-AC的cp基因在侵染枯斑寄主苋色藜过程中的其他功能进行了讨论. 相似文献
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口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长基因组感染性克隆的构建 总被引:2,自引:1,他引:2
以构建的口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长cDNA为模板, 使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录, 得到病毒RNA. 用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞, 可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应. 对收获的病毒分别用RT-PCR, 乳鼠毒力试验以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定, 结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒. 同时用空斑实验法观察了拯救病毒及其亲本毒株的生长特性, 结果表明二者在致病性上没有明显差异, 这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础. 相似文献
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本研究重点解决用针刀医学技术治疗股骨头无菌性坏死机理和操作方法.针刀治疗股骨头无菌性坏死是通过针刀对髋关节囊、关节囊韧带、股骨颈的骨膜和髋关节相邻周边组织切割分离铲拨松解可以产生轻微创伤、出血、局部组织释放创伤因子,激发人体自我修复重建反应,激活成骨细胞造骨功能,加速新骨生成,促进新血管和神经终端组织再生与重建,使局部组织血流加速,改善血液供应和神经营养状况,阻止坏死进一步发展,使股骨头坏死区域再血管化,为坏死组织吸收和为新骨再生爬行替代过程创造条件.在充分理解针刀医学技术治疗股骨头无菌性坏死机理后,根据病人实际综合情况设计治疗方案.早期坏死可治愈,中、晚期能减轻痛苦、降低致残等级和提高生活质量,免除开刀的痛苦和难以承受高额手术费用. 相似文献
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烟草花叶病毒及番茄花叶病毒弱毒疫苗N14基因组重组体的构建与侵染性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用基因交换的方法将烟草花叶病毒普通株(中国分离物,TMV-Cv和番茄花叶病毒弱毒疫苗N14基因组的运动蛋白(MP)、外壳蛋白(CP)基因编码区和3'非编码区嵌合于N14和TMV-CV 5'非编码区和复制酶基因的下游,构建重组病毒克隆pTN和pNT,并进行体外转录和烟草侵染试验结果 pTN和 pNT体外转录物对烟草均具侵染性:前者感染枯斑三生烟( Nicotiana tobacum cv.Samsun NN),等量感染的枯斑形成数比 PTMV-Cv少;感染普通烟( Nicotiana tobacum cv. Huangm-iaoyu,黄苗榆品种),出现典型系统症状,但叶片畸形率较低.后者感染枯斑三生烟,等量感染的枯斑形成数比pN14多;感染普通烟仍不出现系统症状.结果表明:重组病毒TN和NT仍能在试验用烟草中增殖,前者在普通烟上基本表现为TMV-Cv的强病毒性状,后者在普通烟上表现为N14的弱病毒性状; TMV-CV和 N14的复制酶与 MP, CP和 3'非编码区之间为非严紧型连接,两者在类似的各亚基因组之间可进行功能互补.初步推测,N14复制酶编码基因的突变区对N14的致弱起主要作用;其运动蛋白编码基因的突变区对被侵染烟草 相似文献
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《科学通报》1959,4(20):697-697
松苗立枯病是一个世界性的苗圃病害,各国对此构的研究已有50多年的历史,但仍未获得完滿解决。根据1956—1959年在各地病苗上分离的結果,我們发現侵染松苗产生立枯病的病菌共有三种:Rhizoctonia solani,Pythium sp.和Fuzarium spp.,其中Rhizoctonia solani是主要的。这三种病菌出現时期似受温度的影响。在早期,从松苗上分离所得的病菌多为R.solani,其次为Pythium sp.,在后期則多为鐮刀菌。除紅松外,前两种病菌多誘致松树产生猝倒型症状,而后一种則造成立枯型症状。防治松苗立枯病是个錯綜复杂的問題。因为它的病原多而又是土壤习居菌,侵染时期长,以及由树种不同和土壤性貭的差异而引起的复杂关系,使这个問 相似文献
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从云南分离的烟草曲顶病毒为菜豆金色花叶病毒属的一个新种 总被引:27,自引:5,他引:22
从我国云南省保山地区烟草上表现曲顶症状的植株上分离获得病毒分离物Y1,经粉虱传毒及粒子形态观察,证明为菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒,用14种单克隆抗体进行三抗体夹心ELISA测定,结果表明Y1与我国及巴基斯坦、印度等国报道的双生病毒的抗原表位型均不同,对Y1基因组DNA-A的全序列进行了分析,全长2746个核苷酸,其中病毒链含有两个ORF,互补链含有4个ORF,Y1与其他双生病毒基因组DNA-A全序列、基因间隔区序列及各ORF编码的氨基酸序列的比较分析表明,Y1是一种新的Begomovirus病毒,定名为烟草曲顶病毒,英文名为Tobacco curly top virus,简称TCTV,TCTV全基因组与印度报道的番茄曲叶病毒和番木瓜曲叶病毒的同源性最高,达85%,而其CP基因与巴基斯坦棉花曲叶病毒分离物72b高度同源,氨基酸水平的同源性达98%。 相似文献
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与烟草曲叶病毒伴随的新型DNA分子鉴定 总被引:11,自引:2,他引:11
根据已报道的两种粉虱传双生病毒DNAβ分子的保守序列设计引物,利用PCR技术从烟草曲叶病毒Y5和Y8分离物扩增到一类环状DNAβ分子,其全长分别为1333和1338nt,序列分析表明,Y5DNAβ可能编码8个可读框(ORFs),病毒链和互补链各含有4个ORFs;Y8DNAβ可编码7个ORFs,病毒链含有4个ORFs,互补链含有3个ORFs,除茎环结构TAATATTAC外,DNAβ与烟草曲叶病毒Y5和Y8基因组DNA-A序列几乎无同源性,Y5和Y8的DNAβ全长核苷酸序列同源性较高,为85%,而与已报道的胜红蓟黄脉病毒(AYVV)DNAβ及棉花曲叶病毒(CLCuV)的两个DNAβ的同源性为51%-65%,免疫捕获PCR及粉虱传毒实验表明,DNAβ分子包裹在双生病毒粒子中,并伴随病毒由烟粉虱传播。 相似文献
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细胞死亡是生物界普遍存在的现象,它不同于机体死亡.在正常人体组织中,每天都有千千万万个细胞死亡。细胞死亡的方式主要有两种:坏死(necrosis)和程序性细胞死亡(programmed cell death)。细胞坏死是细胞对外来伤害的一种被动反应,如局部缺血、高热、物理化学损伤和生物侵袭等,均可造成细胞急速死亡。细胞坏死的主要形态学特征是细胞发生肿胀.最后导致细胞膜破裂和溶解,细胞内前炎症因子等内容物释放,引起严重的炎症反应。细胞坏死现象与人类多种疾病相关。如病毒感染引起的急性重型肝炎,其基本病理变化就是患者小叶肝细胞发生不同程度的坏死,在显微镜下可见肝汇管区及小叶内有以淋巴细胞和单核细胞为主的炎性细胞浸润、小叶网状支架被破坏。 相似文献
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欧盟正严格限制年轻人使用选择性5-羟色胺再吸收抑制剂(SSRI)及5-羟色胺和去甲肾上腺素再吸收抑制剂(SNRI)。作为监管机构,欧洲医药评价署(EMEA)认为,儿童和青少年应当在规定的症状下才可使用这类药物,不包括抑郁症和焦虑症。 相似文献
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植物雄性不育的遗传机制探讨 总被引:9,自引:0,他引:9
本文评述了雄性不育性的遗传分类、细胞质育性因子、核质互作方式、环境调控、遗传操作等方面的研究进展,提出了解释雄性不育产生的双基因模型假说,认为控制雄性育性表达有二类核基因,一类是控制小孢子发生过程的基因(花粉发育结构基因),另一类是调控花纷发育结构基因表达条件的基因(调节基因),这二类基因任一发生突变均将产生遗传的雄性不育,细胞质(内环境)和生境(外环境)通过调控调节基因的表达成其产物,使得花纷发育结构基因表达所需条件不能满足而导致雄性不育. 相似文献
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阿特拉津及其降解产物对张家口地区饮用水资源的影响 总被引:12,自引:0,他引:12
用磺酸化聚(二乙烯基苯-并-N-乙烯基吡咯烷酮)合物填充的SPE小柱提取水中痕量阿特拉津及其代谢物(DEA,DIA,HA,DEDIA),HPLC-APCIMS联机分离检测,方法快速、灵敏,抗化学干扰性好,该方法检测限为0.01-0.05μg/L,对张家口地区的洋河水系及地下水进行了普查,检测出了阿特拉津及其代谢物,发现污染源多年排放使得阿特拉津已进入宫厅水库和深入地下水层,130m深的井水中阿特拉津的有毒代谢物DEA高达7.2μg/L,地下水中有毒代谢物DEA和DIA的浓度远远高于母体阿特拉津浓度(6-10倍),成为污染地下水质的主要因素。 相似文献